Avaliação do papel das células T CD8+ na infecção experimental por Leishmania braziliensis

• Ano de defesa: 2011
• Autor(a) principal: Novais, Fernanda Oliveira
• Orientador(a): Oliveira, Camila Indiani de
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Link de acesso: https://arca.fiocruz.br/handle/icict/4200
• topic: Leishmania braziliensis; Linfócitos T CD8+; Neutrófilos; BALB/c; Leishmaniose Tegumentar Americana; Perforina; Leishmania braziliensis; CD8+ T cells; Neutrophils; BALB/c; American Tegumentary Leishmaniasis; Perforin

Linfócitos T CD8+ são células do sistema imune adaptativo capazes de induzir a morte de células infectadas através de mecanismos citotóxicos. No modelo de infecção intradérmica por Leishmania revelou-se que os linfócitos T CD8+ são responsáveis tanto pela indução de patogênese bem como pela imunidade contra a infecção primária por L. major. Até o momento, o papel dos linfócitos T CD8+ não foi estudado na infecção experimental por L. braziliensis. Neste estudo, investigamos o recrutamento dos linfócitos T CD8+ para o sítio de infecção e determinamos a sua função. Cinco semanas após a infecção intradérmica por L. braziliensis, camundongos BALB/c apresentaram um aumento na porcentagem de linfócitos T CD8+ presentes na orelha infectada e estes produziram, principalmente, IFN-g e Granzima B. Já no linfonodo de drenagem, estas células não produzem granzima mas, sim, IFN-g e TNF-a. Utilizando o mesmo modelo de infecção, camundongos BALB/c ou C57BL/6 depletados de linfócitos T CD8+ ou camundongos deficientes em b2-microglobulina ou em CD8 apresentaram redução no tamanho da lesão ao longo da infecção e menor carga parasitária cinco semanas após a infecção. A depleção de linfócitos T CD8+ não induziu qualquer alteração no recrutamento e produção de IFN-g, TNF-a e IL-10 pelos linfócitos T CD4+ no sítio de infecção ou no linfonodo de drenagem. Além disso, a capacidade proliferativa ou a produção de citocinas específicas in vitro após estímulo com células dendríticas infectadas por L. braziliensis não sofreram alteração. A ausência de linfócitos T CD8+ após a 8 infecção por L. braziliensis também não alterou o recrutamento de monócitos inflamatórios nem a sua diferenciação em células dendríticas. Por último, a análise histológica e de citometria de fluxo mostrou aumento no recrutamento de neutrófilos para o sítio de infecção e este resultado pode ser correlacionado com o controle da doença. Para confirmar o envolvimento dos linfócitos T CD8+ no desenvolvimento de lesão por L. braziliensis, transferimos linfócitos T CD8+ de camundongos naïve ou imunes, bem como linfócitos T CD4+ somente ou linfócitos T CD8+ e T CD4+ para camundongos RAG-/-. Neste contexto, a transferência de linfócitos T CD8+ naïve ou imunes induziu uma intensa patologia no sítio de infecção bem como a disseminação de parasitas para outros sítios, como a orelha não infectada, pata e nariz. Camundongos RAG-/- controle e aqueles que receberam linfócitos T CD8+ naïve ou imunes apresentam a mesma quantidade de parasitas no sítio de infecção, embora o aspecto da lesão tenha sido muito diferente. A transferência de linfócitos T CD4+ foi capaz de controlar a carga parasitária nestes animais e o mesmo foi observado após transferência de linfócitos T CD4+ e T CD8+ em conjunto. Nestes animais não observamos lesões em outros sítios, indicando que os linfócitos T CD8+ contribuem para a disseminação dos parasitas. Por último, transferimos linfócitos T CD8+ provenientes de camundongos selvagens ou deficientes de IFN-g e perforina e observamos que, na ausência de perforina, a patologia e a disseminação parasitária são controladas. Portanto, este estudo sugere envolvimento dos linfócitos T CD8+ na patogênese induzida por L. braziliensis devido ao seu potencial citotóxico e, em paralelo, inibindo o recrutamento de neutrófilos para o sítio de infecção.