Avaliação da variabilidade gênica de múltiplos parálogos da proteína de virulência GP63 de Leishmania braziliensis

• Ano de defesa: 2019
• Autor(a) principal: Brito, Adriana Neuman Albuquerque Lins Moura de
• Orientador(a): Melo Neto, Osvaldo Pompílio de
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Link de acesso: https://arca.fiocruz.br/handle/icict/62674
• topic: Metalloendopeptidase; glicoproteína gp63-Leishmania; Leishmania braziliensis; Metalloendopeptidases; glycoprotein gp63-Leishmania; Leishmania braziliensis; Metalloendopeptidases; glicoproteína gp63-Leishmania; Leishmania braziliensis

Ao longo da sua evolução as espécies de Leishmania desenvolveram métodos deescape do sistema imune dos hospedeiros. Um dos principais mecanismos de escapeé mediado pela proteína de virulência GP63, que possui uma diferença significativana quantidade de genes que a codificam, em diferentes espécies de Leishmania.Dentre as principais espécies patogênicas, a L. braziliensis possui o maior número degenes codificantes (39), quando comparada a L. infantum (7) e L. major (6). Análisesgenômicas indicam que esses genes podem possuir diferentes momentos deexpressão ao longo do ciclo celular do parasita. Este estudo objetivou avaliar aexpressão de grupos de proteínas de GP63, nas diferentes fases do ciclo de vida deLeishmania sp. Para tal, anticorpos policlonais anti-GP63 produzidos frente apeptídeos específicos dessas proteínas foram obtidos, purificados e utilizados emensaios de western blotting (WB) frente a proteínas recombinantes GP63, juntamentecom ensaios de curvas de crescimento de L. braziliensis e L. infantum. A L. braziliensispossui uma grande quantidade e variabilidade de genes de GP63, que quandotestadas frente a anticorpos feitos contra peptídeos especificos da mesmademonstraram, tanto reações cruzadas contra outras GP63 como especificidade paradeterminados genes. Os ensaios utilizando curvas de crescimento de L. braziliensissugeriram a hipótese de que existe uma maior quantidade de genes sendo expressosem determinados momentos do ciclo do parasita. Ensaios de RNASeq foramrealizados e não foi possível identificar um grupo de genes GP63 sendo claramenteexpressos, apesar de existir uma maior quantidade de transcritos na fase estacionáriado parasita. Os resultados observados fornecem uma visão geral no padrão doreconhecimento de anticorpos anti-GP63 específicos e no perfil de expressão dosgenes de GP63 na fase promastigota de L. braziliensis, evidenciando a plasticidadedesse parasita, responsável pela maioria dos casos de LC no Brasil.