Variação de Número de Cópias em Genes Relacionados à Resistência aos Antimaláricos em Isolados de Plasmodium spp. do Brasil

• Ano de defesa: 2017
• Autor(a) principal: Costa, Gabriel Luíz
• Orientador(a): Sousa, Taís Nóbrega de
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Fiocruz/IRR
• Link de acesso: https://arca.fiocruz.br/handle/icict/19515
• topic: Malária; Plasmodium vivax; Plasmodium falciparum; Resistência às drogas; Variação do número de cópias gênicas; Malaria; Plasmodium vivax; Plasmodium falciparum; Drug resistance; Copy number variation; Malária; Plasmodium; Resistência a Medicamentos

Um dos maiores desafios do controle da malária é a resistência do parasito aos antimaláricos. A biologia molecular tem permitido a compreensão desse fenótipo com o estudo de marcadores associados a ela, tais como o Polimorfismo de Base Única (SNP) e o Polimorfismo de Variação de Número de Cópias Gênicas (CNV). Alterações gênicas atribuídas ao CNV podem levar a alterações fenotípicas no parasito, conferindo resistência ou suscetibilidade aos antimaláricos. Sua presença foi relacionada com a falha terapêutica a drogas com o cloroquina (CQ) e mefloquina (MQ) em diversas regiões do mundo. Os genes pfmdr1 e pfgch1 de P. falciparum e pvmdr1 de P. vivax são relacionados com resistência a diferentes fármacos. Entretanto, no Brasil poucos estudos caracterizaram esses genes quanto à presença de CNVs, sendo que sua maioria investigou a diversidade genética associada aos SNPs. O objetivo deste estudo foi investigar a presença de CNV nos genes pfmdr1 e pfgch1 de P. falciparum e pvmdr1 e pvcrt-o de P. vivax, assim como SNPs nos genes pfcrt e pfmdr1 de P. falciparum. O CNV foi determinado por qPCR utilizando sondas de hidrólise e os SNPs por PCR-RFL P. As amostras foram coletadas entre 2002 a 2012, em 3 diferentes estado s brasileiros – Mato Grosso (n=31), Rondônia (n=27) e Amapá (n=10). As 31 amostras analisadas de P. falciparum apresentaram cópia única para pfmdr1 e pfgch1 , apesar do histórico de resistência do parasito a vários antimaláricos utilizados ao longo do tempo no Brasil. Entretanto, um importante SNP em pfcrt (K76T), relacionado com resistência à CQ, foi identificado em todas as amostras analisa das. Nesse estudo, também foram analisados 38 isolados de P. vivax, sendo reportado a amplificação gênica em 7 (18%) amostras para pvmdr1. No sudoeste asiático altas taxas de CNV em pvmdr1 foram reportadas (38%), sendo relatado por um único estudo no Brasil (0,9% de amplificação). Um resultado importante desse estudo foi a observação, pela primeira vez, da amplificação de pvcrt-o. Embora estudos anteriores o associem com resistência e casos graves da doença, nenhum avaliou a presença de CNV em pvcrt-o. Este estudo é um dos primeiros a avaliar a presença de CNV nos genes pvmdr1, pvcrt-o e pfgch1 no Brasil, assim como estudar a distribuição de CNV no mundo através de uma revisão sistemática.