Caracterização fenotípica, epidemiologia molecular e suscetibilidade aos antifúngicos dos agentes da criptococose em gatos domésticos (Felis catus) no Rio de Janeiro

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Reis, Rosani Santos
• Orientador(a): Trilles, Luciana, Gremião, Isabella Dib Ferreira
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Link de acesso: https://arca.fiocruz.br/handle/icict/64930
• topic: Criptococose; Epidemiologia; MLST; Gatos; Fatores de Virulência; Cryptococcosis; Epidemiology; MLST; Cats; Virulence Factors; Criptococose; Epidemiologia; Gatos; Fatores de Virulência; Tipagem de Sequências Multilocus

A criptococose é uma micose sistêmica de distribuição mundial, causada por espécies dos complexos Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii, presentes no ambiente. Pouca atenção tem sido dada à criptococose em animais, destacando-se o gato, que apresenta notável suscetibilidade a estes agentes e pode ser sentinela para o risco da infecção humana. O perfil epidemiológico da criptococose felina é desconhecido no Brasil. O presente estudo teve como objetivo realizar a caracterização fenotípica e genotípica de Cryptococcus spp. e seu perfil de suscetibilidade antifúngica a partir de casos de criptococose felina e de fontes ambientais, além de correlacionar com os aspectos clínicos e epidemiológicos desta micose no gato doméstico. Foi realizado um estudo com 28 isolados de Cryptococcus spp. obtidos de 19 gatos no período de 2000 a 2020, e 8 isolados ambientais relacionados a dois casos de criptococose felina no Rio de Janeiro. Após identificação fenotípica dos isolados de Cryptococcus spp., estes foram caracterizados molecularmente, identificados os tipos sexuados, e avaliados fatores de virulência como produção de cápsula, melanina e termotolerância in vitro. A ploidia foi determinada por citometria de fluxo. As cepas clínicas e ambientais foram submetidas a teste de sensibilidade in vitro aos antifúngicos anfotericina B, itraconazol, fluconazol, voriconazol e flucitosina, pelo método de microdiluição em caldo (M27-A3, CLSI) Foram identificados 29 C. neoformans e sete C. gattii, entre isolados clínicos e ambientais. Todos os iaolados foram do tipo sexuado MAT α. Na análise molecular, foi encontrado 63,9 % (n = 23) do tipo molecular VNII, 16,7 % (n = 6) de VNI e 19,4 % (n = 7) de VGII. No total, 17 subtipos moleculares foram identificados. Foram identificadas 6 cepas diploides, todas VNII. O tipo molecular VGII apresentou maior termotolerância e produção de melanina, sugerindo maior virulência. VNII foi mais sensível ao estresse térmico (40°C). A maioria das cepas (94,4%) foi wild type nos testes de suscetibilidade antifúngica. Apenas duas cepas foram non-wild type, uma frente fluconazol e outra fluconazol, voriconazol e itraconazol. As cepas isoladas de gatos com a forma fixa da criptococose e daqueles cujo desfecho foi alta clínica, apresentaram volume de cápsula menores, que das cepas da forma disseminada da doença e de desfecho "óbito". O elevado percentual do tipo raro VNII na população estudada pode estar associado à grande incidência de lesões cutâneas, já que o VNII apresentou maior sensibilidade a temperaturas elevadas. O gato doméstico pode ser sentinela para a criptococose devido a sua suscetibilidade aos agentes da micose, pois foram isolados dos gatos genótipos descritos em humanos, bem como genótipos novos. O presente estudo, com foco na criptococose felina, traz uma preciosa contribuição para epidemiologia molecular e questionamentos quanto ao nicho ecológico do VNII e, como e o quanto estaríamos expostos a esse tipo molecular