Anemia falciforme em Salvador-Bahia: caracterização fenotípica, molecular e de sequências gênicas potencialmente importantes na expressão dos genes gama da hemoglobina fetal

• Ano de defesa: 2005
• Autor(a) principal: Adorno, Elisângela Vitória
• Orientador(a): Gonçalves, Marilda de Souza
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz
• Link de acesso: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/35421
• topic: Anemia falciforme; Haplótipos; Genótipo; Hemoglobina fetal; Fenótipo; Sickle cell anemia; Haplotypes; Genotype; Fetal hemoglobin; Phenotype

do gene da globina p, levando à substituição do ácido glutâmico por valina na cadeia da globina p. A anemia falciforme ou a homozigose para a HbS, freqüentemente apresenta manifestações clínicas heterogêneas, fortemente relacionadas aos níveis de hemoglobina fetal (HbF). O presente estudo investigou as características fenopíticas e os marcadores moleculares presentes em portadores da anemia falciforme de Salvador-BA, identificando seqüências gênicas potencialmente importantes para a expressão dos genes gama. O perfil de hemoglobinas e o nível de HbF foram determinados por cromatografia líquida de alta performance (HPLC). Informações sobre o çierfil clínico dos pacientes foram obtidas através da análise de prontuários. A talassemia foi investigada pela reação em cadeia da poiimerase (PCR) e os haplótipos ligados ao grupo de genes da globina P^ foram investigados por PCR e análise de sítios polimórficos utilizando endonucleases de restrição (RFLP). As regiões promotoras dos genes yG e yA e o HS2-LCR foram amplificados assimetricamente e seqüenciadas no ABI Prism 3100 prism DNA Sequencer. As análises estatísticas foram desenvolvidas no software EPI-INFO versão 6.04 e a significância foi estabelecida para p < 0.05. Foram analisados 131 pacientes, dos quais 125 tiveram identificado o genótipo P^, tendo sido encontrado 64 (5L2%) CAR/Ben;36 (28,8%) Ben/Ben; 18 (14,4%) CAR/CAR; dois (1,6%) CAR/Aty; dois (1,6%) Ben/Cam; um (0,8%) CAR/Cam; um (0,8%) Car/Arabia-India e um (0,8%) Sen/Aty. A talassemia a2 foi estudada em 110 pacientes, onde 30 (27,3%) foram heterozigotos e dois (1,8%) homozigotos. O uso de transfusão sangüínea foi maior em pacientes com HbF <10,0% (p:=0,009). Pacientes com genótipos a diferentes apresentaram diferenças para os valores de Hb (p=0,018); Ht (p=0,019); VCM (p=0,0004) e HCM (p=0,039). Os níveis de HbF foram maiores entre os pacientes Ben/Ben que entre os CAR/CAR (p=0,007) e CAR/Ben (p=0,013). A análise das seqüências do HS2-LCR de dez indivíduos demonstrou a substituição G—>A na posição -10.677, presente apenas entre os portadores do hapiótipo Ben com nível elevado de HbF, sugerindo uma possível associação entre este polimorfismo, a expressão dos genes y e a síntese da HbF. A análise da região promotora do gene yG demonstrou a substituição T-^C na posição -157, que parece ser uma seqüência característica entre os pacientes estudados. Também foi encontrada a deleção de 4 pb na posição -222 a -225 no gene yG e relacionado ao hapiótipo Cam. Os dados demonstraram um novo polimorfismo localizado no HS2-LCR e na região promotora do gene yG da globina, justificando a realização de estudos adicionais, associando os níveis de HbF, marcadores biológicos e mecanismos relacionados, visando esclarecer um possível papel no desenvolvimento do fenótipo da doença.