EFEITOS DA SUPLEMENTAÇÃO COM Folliculinum 6 cH DURANTE A MATURAÇÃO in vitro DE OÓCITOS OVINOS
| Ano de defesa: | 2018 |
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| Autor(a) principal: | |
| Orientador(a): | |
| Banca de defesa: | |
| Tipo de documento: | Dissertação |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
| Idioma: | por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Estadual do Ceará
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=84484 |
Resumo: | <div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Na agropecuária, o desenvolvimento do setor de melhoramento genético animal, através da inserção de biotécnicas da reprodução, como a produção in vitro de embriões (PIV), tem determinado uma maior produção de alimentos de forma sustentável. Todavia, em pequenos ruminantes essa técnica ainda não é tão eficiente com baixas taxas de produção de embriões ovinos.Portanto, para melhorar o rendimento da obtenção de oócitos competentes a serem utilizados na PIV, ainda são necessárias algumas estratégias que pertitam o aprimoramento desses sistemas e o melhoramento dos meios de maturação in vitro de oócitos. Este estudo investigou o efeito de Folliculinum 6 cH sobre as taxas de maturação e viabilidade, após a maturação in vitro de complexos cumulus oócitos (CCOs) ovinos. Para tanto, os ovários ovinos foram coletados em um abatedouro local, lavados uma vez em alcool a 70%, seguido de duas lavagens em meio MEM HEPES suplementado com antibióticos e transportados também em meio MEM HEPES mais antibióticos. No laboratório, os CCOs foram recuperados pela técnica de slicing. Os CCOs selecionados foram maturados em 200 - 350 μL (10 mL por CCO) em TCM199 (meio controle), TCM199 suplementado com Folliculinum 6 cH ou com 0,05% etanol (v/v veículo homeopático). A maturação foi realizada durante 24 horas sob 5% de CO2 no ar. Após a maturação, os oócitos foram desnudados mecanicamente e fixados para avaliar a distribuição das mitocôndrias, atividade mitocondrial e a configuração da cromatina (degenerado - DEG, vesícula germinativa - VG, quebra da vesícula germinal - VGBD, metáfase I - MI e metáfase II - MII). Além disso, o meio foi armazenado em -80 ºC para dosagem de EROs (espécies reativas de oxigênio) e ensaio hormonal. Em relação à taxa de DEG, o tratamento Folliculinum obteve maior número de oócitos degenerados quando comparado ao controle. Além disso, a adição do Folliculinum 6 cH promoveu a menor taxa de maturação (MII) (P<0,05) quando comparado ao tratamento etanol. O tratamento etanol apresentou 100% de oócitos com distribuição mitocondrial homogênea, bem como maior atividade mitocôndrial (P<0,05). Nenhuma diferença entre os tratamentos foi observada em relação a produção de ROS e da progesterona (p>0,05). Em conclusão, a adição de Folliculinum 6 cH no meio de maturação aumenta a degeneração oócitária e conseqüentemente, diminui as taxas de retomada da meiose.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chave: Homeopatia. Maturação Oocitária. Ovário. Ovelha.</span></font></div> |
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EFEITOS DA SUPLEMENTAÇÃO COM Folliculinum 6 cH DURANTE A MATURAÇÃO in vitro DE OÓCITOS OVINOSFisiologia<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Na agropecuária, o desenvolvimento do setor de melhoramento genético animal, através da inserção de biotécnicas da reprodução, como a produção in vitro de embriões (PIV), tem determinado uma maior produção de alimentos de forma sustentável. Todavia, em pequenos ruminantes essa técnica ainda não é tão eficiente com baixas taxas de produção de embriões ovinos.Portanto, para melhorar o rendimento da obtenção de oócitos competentes a serem utilizados na PIV, ainda são necessárias algumas estratégias que pertitam o aprimoramento desses sistemas e o melhoramento dos meios de maturação in vitro de oócitos. Este estudo investigou o efeito de Folliculinum 6 cH sobre as taxas de maturação e viabilidade, após a maturação in vitro de complexos cumulus oócitos (CCOs) ovinos. Para tanto, os ovários ovinos foram coletados em um abatedouro local, lavados uma vez em alcool a 70%, seguido de duas lavagens em meio MEM HEPES suplementado com antibióticos e transportados também em meio MEM HEPES mais antibióticos. No laboratório, os CCOs foram recuperados pela técnica de slicing. Os CCOs selecionados foram maturados em 200 - 350 μL (10 mL por CCO) em TCM199 (meio controle), TCM199 suplementado com Folliculinum 6 cH ou com 0,05% etanol (v/v veículo homeopático). A maturação foi realizada durante 24 horas sob 5% de CO2 no ar. Após a maturação, os oócitos foram desnudados mecanicamente e fixados para avaliar a distribuição das mitocôndrias, atividade mitocondrial e a configuração da cromatina (degenerado - DEG, vesícula germinativa - VG, quebra da vesícula germinal - VGBD, metáfase I - MI e metáfase II - MII). Além disso, o meio foi armazenado em -80 ºC para dosagem de EROs (espécies reativas de oxigênio) e ensaio hormonal. Em relação à taxa de DEG, o tratamento Folliculinum obteve maior número de oócitos degenerados quando comparado ao controle. Além disso, a adição do Folliculinum 6 cH promoveu a menor taxa de maturação (MII) (P<0,05) quando comparado ao tratamento etanol. O tratamento etanol apresentou 100% de oócitos com distribuição mitocondrial homogênea, bem como maior atividade mitocôndrial (P<0,05). Nenhuma diferença entre os tratamentos foi observada em relação a produção de ROS e da progesterona (p>0,05). Em conclusão, a adição de Folliculinum 6 cH no meio de maturação aumenta a degeneração oócitária e conseqüentemente, diminui as taxas de retomada da meiose.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chave: Homeopatia. Maturação Oocitária. Ovário. Ovelha.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">In agriculture, the development of the animal genetic improvement sector, through the insertion of reproductive biotechniques, such as an in vitro embryo production (PIV), has determined a higher production of food in a sustainable way. However, in small ruminants and this technique is still not as efficient with low production rates of ovine embryos. Therefore, to improve the yield of competent oocytes to be used in the IVP, they are still in line with the difficulties in danger or improvement of the oocytes. systems and the enhancement of in vitro maturation media of oocytes. This study investigated the effect of Folliculinum 6 cH on maturation rates and viability after in vitro maturation of ovine cumulus oocytes (CCOs). For this, sheep ovary were collected in a local slaughterhouse, washed once in 70% alcohol, followed by two washes in MEM HEPES medium supplemented with antibiotics and also transported in MEM HEPES medium plus antibiotics. No laboratory, the CCOs were recovered by the cutting technique. The selected CCOs were matured in 200-350 μL (10 mL per CCO) in TCM199 (control medium), TCM199 supplemented with Folliculinum 6 cH or with 0.05% ethanol (v / v - homeopathic vehicle). The maturation was performed for 24 hours under 5% CO2 non-air. After maturation, the oocytes were mechanically stripped and fixed to evaluate a distribution of mitochondria, mitochondrial activity and chromatin configuration (degenerate - DEG, germinal vesicle - VG, germinal vesicle rupture - VGBD, metaphase I - MI and metaphase II - MII ). In addition, the medium was stored at -80 ° C for the dosing of ROS (reactive oxygen species) and hormone assay. Regarding the SDR rate, the Folliculinum treatment obtained a higher number of degenerate oocytes when compared to the control. In addition, an addition of Folliculinum 6 cH promoted a lower maturation rate (MII) (P <0.05) when compared to the ethanol treatment. The ethanol treatment presented 100% oocytes with homogeneous mitochondrial distribution, as well as higher mitochondrial activity (P <0.05). There were no differences between treatments for observation in relation to ROS and progesterone production (p> 0.05). In conclusion, an addition of Folliculinum 6 cH in the medium of maturation increases the oocyte degeneration and consequently decreases as rates of resumption of meiosis.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Keywords: Homeopathy. Oocyte Maturation. Ovary. Sheep.</span></font></div>Universidade Estadual do CearáVALDEVANE ROCHA ARAUJODAMASCENO, KAYSE NAJARA MATOS2019-05-17T16:49:06Z2018info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=84484info:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UECEinstname:Universidade Estadual do Cearáinstacron:UECE2019-05-17T16:49:06Zoai:uece.br:84484Repositório InstitucionalPUBhttps://siduece.uece.br/siduece/api/oai/requestopendoar:2019-05-17T16:49:06Repositório Institucional da UECE - Universidade Estadual do Cearáfalse |
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