Produção, caracterização, aplicação e determinação estrutural de Celulase de Moniliophthora perniciosa

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2010
Autor(a) principal: Santana, Mona Liza lattes
Orientador(a): Taranto, Alex Gutterres
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Estadual de Feira de Santana
Programa de Pós-Graduação: Mestrado Acadêmico em Biotecnologia
Departamento: DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
País: Brasil
Palavras-chave em Português:
Palavras-chave em Inglês:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: http://tede2.uefs.br:8080/handle/tede/1193
Resumo: Cellulases are enzymes that degrade plant cell wall. These enzymes are produced by various microorganisms, which filaments fungi are the main producers. Pathogenic microorganisms produced enzymes available to act the degradation of plant cell wall, allowing their invasion in the plant. In addition with a possible involvement in the pathogenic mechanism of Moniliophthora perniciosa, cellulases are enzymes that have wide application in the food and biofuels. In this context, this study aimed to produce, characterize, apply and determine the tree-dimensional of glycosidic enzymes. The results showed that the best conditions for its production, in liquid fermentation, were using 7 g L-1 yeast extract in 19 days of incubation. The pH optimum and temperature for maximum cellulase activity were 7.2 and 47°C, respectively. Studies of the effects of salts on enzyme activity showed that the potassium chloride and potassium bromide causes increase in enzyme activity and the presence of 100 mM. Kinetic studies showed a Km and Vmax of 0.03732 mg / mL substrate CMC and 27.47 μmoles / mg / min, respectively. The sequence of the cellulase of M. perniciosa was obtained from the database of Genome / Proteome M. Pernicious with 2193 base pairs and 731 amino acids, and using it to build the three-dimensional model for comparative modeling. After molecular dynamics simulations of the model presented an early stable simulation between 2.00 and 2.36 nanoseconds. The complex cellulolytic obtained from M. pot, was efficient in the hydrolysis of bagasse-cane sugar and reducing the viscosity of cashew apple juice.
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spelling Taranto, Alex Gutterres7710819168701768023557http://lattes.cnpq.br/2280347921476698Santana, Mona Liza2020-06-30T17:09:32Z2010-02-26SANTANA, Mona Liza. Produção, caracterização, aplicação e determinação estrutural de Celulase de Moniliophthora perniciosa. 2010. 64 f. Dissertação (Mestrado Acadêmico em Biotecnologia)- Universidade Estadual de Feira de Santana, Feira de Santana, 2010.http://tede2.uefs.br:8080/handle/tede/1193Cellulases are enzymes that degrade plant cell wall. These enzymes are produced by various microorganisms, which filaments fungi are the main producers. Pathogenic microorganisms produced enzymes available to act the degradation of plant cell wall, allowing their invasion in the plant. In addition with a possible involvement in the pathogenic mechanism of Moniliophthora perniciosa, cellulases are enzymes that have wide application in the food and biofuels. In this context, this study aimed to produce, characterize, apply and determine the tree-dimensional of glycosidic enzymes. The results showed that the best conditions for its production, in liquid fermentation, were using 7 g L-1 yeast extract in 19 days of incubation. The pH optimum and temperature for maximum cellulase activity were 7.2 and 47°C, respectively. Studies of the effects of salts on enzyme activity showed that the potassium chloride and potassium bromide causes increase in enzyme activity and the presence of 100 mM. Kinetic studies showed a Km and Vmax of 0.03732 mg / mL substrate CMC and 27.47 μmoles / mg / min, respectively. The sequence of the cellulase of M. perniciosa was obtained from the database of Genome / Proteome M. Pernicious with 2193 base pairs and 731 amino acids, and using it to build the three-dimensional model for comparative modeling. After molecular dynamics simulations of the model presented an early stable simulation between 2.00 and 2.36 nanoseconds. The complex cellulolytic obtained from M. pot, was efficient in the hydrolysis of bagasse-cane sugar and reducing the viscosity of cashew apple juice.As celulases são enzimas degradadoras da parede celular vegetal e podem ser produzidas por diversos microrganismos, sendo os fungos filamentosos os principais produtores. Essas enzimas estão diretamente envolvidas na degradação da parede celular vegetal, o que permite a invasão de microrganismos patogênicos na planta, além de sua vasta aplicação em diversos segmentos industriais como a indústria alimentícia e de biocombustíveis. Neste contexto, o presente trabalho objetivou produzir, caracterizar, aplicar e determinar a estrutura tridimensional de celulase de Moniliophthora perniciosa, o fungo causador da vassoura-de-bruxa. Os resultados mostraram que as melhores condições para a sua produção, em meio submerso, foi utilizando 7g.L-1 de extrato de levedura em 19 dias de incubação. O pH e temperatura ótimos de atividade máxima de celulase foram 7,2 e 47°C, respectivamente. Quanto à termoestabilidade, a enzima se manteve estável a 60°C após 30 minutos de incubação. Os estudos dos efeitos de sais na atividade enzimática demonstraram que o cloreto de potássio e brometo de potássio são bons ativadores da enzima. Os estudos cinéticos mostraram um Km e Vmax de 0,03732 mg/mL com relação ao substrato CMC e 27,47 μmoles/mg/min, respectivamente. A sequência de celulase de M. perniciosa foi obtida a partir de banco de dados do Projeto Genoma/Proteoma do M. perniciosa com 2193 pares de bases e 731 aminoácidos, utilizando-a para a construção do modelo tridimensional por modelagem comparativa. Após simulações de dinâmica molecular o modelo apresentou um início de simulação estável entre 2,00 e 2,36 nonossegundos. O complexo celulolítico obtido de M. peniciosa, foi eficiente na hidrólise do bagaço-de-cana de açúcar e na redução da viscosidade do suco de caju.Submitted by Bruno Matos Nascimento (brunomatos@uefs.br) on 2020-06-30T17:09:32Z No. of bitstreams: 1 Produção caracterização.pdf: 1605353 bytes, checksum: 66918c61fa9108c4ab9ebdea923c7eeb (MD5)Made available in DSpace on 2020-06-30T17:09:32Z (GMT). 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