Análise imunoistoquímica de proteínas relacionadas à autofagia (Atg7, p62, LC3A e p-mTOR) em cistos radiculares, cistos dentígeros e ceratocistos odontogênicos
Ano de defesa: | 2021 |
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Tipo de documento: | Dissertação |
Tipo de acesso: | Acesso embargado |
Idioma: | por |
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Universidade Estadual da Paraíba
Centro de Ciências Biológicas e da Saúde - CCBS Brasil UEPB Programa de Pós-Graduação em Odontologia - PPGO |
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Link de acesso: | http://tede.bc.uepb.edu.br/jspui/handle/tede/3952 |
Resumo: | No contexto dos cistos odontogênicos, o cisto radicular (CR), o cisto dentígero (CD) e o ceratocisto odontogênico (CO) se destacam por serem os mais prevalentes. Na patogênese de lesões císticas, estudos têm destacado a participação de um mecanismo intracelular catabólico que envolve diversas proteínas, com destaque para Atg7, LC3A, p62 e p-mTOR. Até o momento, pouco se sabe sobre o envolvimento desse mecanismo de degradação intracelular na patogênese de cistos odontogênicos. Dessa forma, o presente estudo se propôs a analisar a imunoexpressão de proteínas relacionadas à autofagia (Atg7, p62, LC3A e p-mTOR) em CRs, CDs e COs. A amostra foi constituída por 20 CRs, vinte CDs e 20 COs. Dados clínicos (sexo, idade e localização anatômica das lesões) foram coletados a partir de fichas de requisição de biópsia. No estudo morfológico, foram avaliados o padrão do revestimento epitelial e a intensidade do infiltrado inflamatório nos CRs. No estudo imunoistoquímico, sob aumento de 400×, foram estabelecidos os percentuais de células positivas (núcleo e citoplasma) para as proteínas em 10 campos microscópicos do revestimento epitelial, bem como o predomínio da imunorreatividade nas camadas epiteliais. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística por meio do teste de Mann-Whitney (p < 0,05). Foi observada maior frequência de CRs com infiltrado inflamatório grau III (55,0%) e revestimento epitelial hiperplásico (60,0%). Todos os CRs, CDs e COs revelaram expressão citoplasmática de Atg7 e p62. Expressão nuclear de Atg7 e p62 foi constatada em todos os COs, bem como na maioria dos CRs (90,0% e 95,0%, respectivamente) e CDs (80,0% e 95,0%, respectivamente). Para essas proteínas, houve predomínio de imunorreatividade em camada basal/parabasal nos COs e em todas as camadas do epitélio nos CRs e CDs. Expressão citoplasmática de LC3A foi identificada na maioria dos CRs (70,0%), CDs (85,0%) e COs (65,0%). Expressão nuclear de LC3A foi observada na maioria dos CRs (70,0%) e CDs (70,0%), bem como em menor proporção dos COs (35,0%). Houve predomínio de imunorreatividade para LC3A em camada parabasal/ superficial do epitélio nos COs. Por sua vez, CRs e CDs exibiram considerável variabilidade na imunorreatividade para LC3A nas camadas epiteliais. Expressão citoplasmática de p-mTOR foi observada em todos os CDs e COs, bem como em 50,0% dos CRs. Positividade nuclear para p-mTOR foi identificada com maior frequência nos CDs (70,0%), seguidos dos COs (55,0%) e CRs (25,0%). Em todos os grupos, houve predomínio de imunorreatividade para p-mTOR em camada superficial do epitélio. Foram identificados maiores percentuais de positividade citoplasmática para Atg7 nos CRs e COs quando comparados aos CDs, com diferença significativa entre os últimos (p < 0,05). Não foram observadas diferenças significativas entre os grupos para a expressão citoplasmática de LC3A (p > 0,05). Os maiores percentuais medianos de positividade citoplasmática para p62 e p-mTOR foram observados, respectivamente, nos CRs (p < 0,05) e COs (p < 0,05). Os COs apresentaram maior expressão nuclear de Atg7 em comparação aos CRs e CDs (p < 0,05). Além disso, CRs e COs exibiram maior expressão nuclear de p62 em comparação aos CDs (p < 0,05). Todos os grupos revelaram baixos percentuais de positividade nuclear para LC3A e p-mTOR. Não foram constatadas diferenças significativas na expressão das proteínas relacionadas à autofagia de acordo com o padrão do revestimento epitelial e a intensidade do infiltrado inflamatório nos CRs (p > 0,05). Os resultados deste estudo sugerem a participação da autofagia na patogênese dos CRs, CDs e COs. A imunoexpressão das proteínas Atg7, LC3A, p62 e p-mTOR, no entanto, pode não estar relacionada às características histopatológicas dos CRs. Além disso, a translocação nuclear das proteínas Atg7 e p62 pode contribuir para o comportamento biológico mais agressivo dos COs. |
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Análise imunoistoquímica de proteínas relacionadas à autofagia (Atg7, p62, LC3A e p-mTOR) em cistos radiculares, cistos dentígeros e ceratocistos odontogênicosCisto radicularCisto dentígeroCistos odontogênicosAutofagiaImuno-histoquímicaRadicular cystImmunohistochemistryAutophagyOdontogenic cystsDentigerous cystODONTOLOGIA::CLINICA ODONTOLOGICANo contexto dos cistos odontogênicos, o cisto radicular (CR), o cisto dentígero (CD) e o ceratocisto odontogênico (CO) se destacam por serem os mais prevalentes. Na patogênese de lesões císticas, estudos têm destacado a participação de um mecanismo intracelular catabólico que envolve diversas proteínas, com destaque para Atg7, LC3A, p62 e p-mTOR. Até o momento, pouco se sabe sobre o envolvimento desse mecanismo de degradação intracelular na patogênese de cistos odontogênicos. Dessa forma, o presente estudo se propôs a analisar a imunoexpressão de proteínas relacionadas à autofagia (Atg7, p62, LC3A e p-mTOR) em CRs, CDs e COs. A amostra foi constituída por 20 CRs, vinte CDs e 20 COs. Dados clínicos (sexo, idade e localização anatômica das lesões) foram coletados a partir de fichas de requisição de biópsia. No estudo morfológico, foram avaliados o padrão do revestimento epitelial e a intensidade do infiltrado inflamatório nos CRs. No estudo imunoistoquímico, sob aumento de 400×, foram estabelecidos os percentuais de células positivas (núcleo e citoplasma) para as proteínas em 10 campos microscópicos do revestimento epitelial, bem como o predomínio da imunorreatividade nas camadas epiteliais. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística por meio do teste de Mann-Whitney (p < 0,05). Foi observada maior frequência de CRs com infiltrado inflamatório grau III (55,0%) e revestimento epitelial hiperplásico (60,0%). Todos os CRs, CDs e COs revelaram expressão citoplasmática de Atg7 e p62. Expressão nuclear de Atg7 e p62 foi constatada em todos os COs, bem como na maioria dos CRs (90,0% e 95,0%, respectivamente) e CDs (80,0% e 95,0%, respectivamente). Para essas proteínas, houve predomínio de imunorreatividade em camada basal/parabasal nos COs e em todas as camadas do epitélio nos CRs e CDs. Expressão citoplasmática de LC3A foi identificada na maioria dos CRs (70,0%), CDs (85,0%) e COs (65,0%). Expressão nuclear de LC3A foi observada na maioria dos CRs (70,0%) e CDs (70,0%), bem como em menor proporção dos COs (35,0%). Houve predomínio de imunorreatividade para LC3A em camada parabasal/ superficial do epitélio nos COs. Por sua vez, CRs e CDs exibiram considerável variabilidade na imunorreatividade para LC3A nas camadas epiteliais. Expressão citoplasmática de p-mTOR foi observada em todos os CDs e COs, bem como em 50,0% dos CRs. Positividade nuclear para p-mTOR foi identificada com maior frequência nos CDs (70,0%), seguidos dos COs (55,0%) e CRs (25,0%). Em todos os grupos, houve predomínio de imunorreatividade para p-mTOR em camada superficial do epitélio. Foram identificados maiores percentuais de positividade citoplasmática para Atg7 nos CRs e COs quando comparados aos CDs, com diferença significativa entre os últimos (p < 0,05). Não foram observadas diferenças significativas entre os grupos para a expressão citoplasmática de LC3A (p > 0,05). Os maiores percentuais medianos de positividade citoplasmática para p62 e p-mTOR foram observados, respectivamente, nos CRs (p < 0,05) e COs (p < 0,05). Os COs apresentaram maior expressão nuclear de Atg7 em comparação aos CRs e CDs (p < 0,05). Além disso, CRs e COs exibiram maior expressão nuclear de p62 em comparação aos CDs (p < 0,05). Todos os grupos revelaram baixos percentuais de positividade nuclear para LC3A e p-mTOR. Não foram constatadas diferenças significativas na expressão das proteínas relacionadas à autofagia de acordo com o padrão do revestimento epitelial e a intensidade do infiltrado inflamatório nos CRs (p > 0,05). Os resultados deste estudo sugerem a participação da autofagia na patogênese dos CRs, CDs e COs. A imunoexpressão das proteínas Atg7, LC3A, p62 e p-mTOR, no entanto, pode não estar relacionada às características histopatológicas dos CRs. Além disso, a translocação nuclear das proteínas Atg7 e p62 pode contribuir para o comportamento biológico mais agressivo dos COs.In the context of odontogenic cysts, the radicular cyst (RC), the dentigerous cyst (DC) and the odontogenic keratocyst (OKC) stand out for being the most prevalent. In the pathogenesis of cystic lesions, studies have highlighted the participation of an intracellular catabolic mechanism involving several proteins, especially Atg7, LC3A, p62 and p-mTOR. Until now, little is known about the involvement of this intracellular degradation mechanism in the pathogenesis of odontogenic cysts. Thus, the present study aimed to analyze the immunoexpression of autophagy-related proteins (Atg7, p62, LC3A and p-mTOR) in RCs, DCs and OKCs. The sample consisted of 20 RCs, twenty DCs and 20 OKCs. Clinical data (gender, age and anatomical location of the lesions) were collected from biopsy requisition forms. In the morphological study, the pattern of the epithelial lining and the intensity of the inflammatory infiltrate in the RCs were evaluated. In the immunohistochemical study, under 400× magnification, the percentages of positive cells (nucleus and cytoplasm) for proteins in 10 microscopic fields of the epithelial lining were established, as well as the predominance of immunoreactivity in the epithelial layers. The data obtained were submitted to statistical analysis using the Mann-Whitney test (p < 0.05). A higher frequency of RCs with grade III inflammatory infiltrate (55.0%) and hyperplastic epithelial lining (60.0%) was observed. All RCs, DCs and OKCs revealed cytoplasmic expression of Atg7 and p62. Nuclear expression of Atg7 and p62 was found in all OKCs, as well as in most RCs (90.0% and 95.0%, respectively) and DCs (80.0% and 95.0%, respectively). For these proteins, there was a predominance of immunoreactivity in the basal/parabasal layer in OKCs and in all layers of the epithelium in RCs and DCs. Cytoplasmic expression of LC3A was identified in most RCs (70.0%), DCs (85.0%) and OKCs (65.0%). Nuclear expression of LC3A was observed in most RCs (70.0%) and DCs (70.0%), as well as in a smaller proportion of OKCs (35.0%). There was a predominance of immunoreactivity for LC3A in the parabasal/superficial layer of the epithelium in OKCs. On the other hand, RCs and DCs exhibited considerable variability in LC3A immunoreactivity in the epithelial layers. Cytoplasmic expression of p-mTOR was observed in all DCs and OKCs, as well as in 50.0% of RCs. Nuclear positivity for p-mTOR was identified more frequently in DCs (70.0%), followed by OKCs (55.0%) and RCs (25.0%). In all groups, there was a predominance of p-mTOR immunoreactivity in the superficial layer of the epithelium. Higher percentages of cytoplasmic positivity for Atg7 were identified in RCs and OKCs when compared to DCs, with a significant difference between the last two (p < 0.05). No significant differences were observed between groups for cytoplasmic expression of LC3A (p > 0.05). The highest median percentages of cytoplasmic positivity for p62 and p-mTOR were observed, respectively, in RCs (p < 0.05) and OKCs (p < 0.05). OKCs showed higher nuclear expression of Atg7 compared to RCs and DCs (p < 0.05). Furthermore, RCs and OKCs exhibited higher nuclear expression of p62 compared to DCs (p < 0.05). All groups showed low percentages of nuclear positivity for LC3A and p-mTOR. No significant differences were found in the expression of autophagy-related proteins according to the pattern of the epithelial lining and the intensity of the inflammatory infiltrate in the RCs (p > 0.05). The results of this study suggest the participation of autophagy in the pathogenesis of RCs, DCs and OKCs. Nevertheless, the immunoexpression of Atg7, LC3A, p62 and p-mTOR proteins may not be related to the histopathological characteristics of RCs. Furthermore, the nuclear translocation of Atg7 and p62 proteins may contribute to the more aggressive biological behavior of OKCs.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESConselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPqUniversidade Estadual da ParaíbaCentro de Ciências Biológicas e da Saúde - CCBSBrasilUEPBPrograma de Pós-Graduação em Odontologia - PPGONonaka, Cassiano Francisco Weegehttp://lattes.cnpq.br/0224522010734716Monteiro, Bárbara Vanessa de Brito066.279.244-04Gordón-Núñez, Manuel Antonio978.663.264-87Ferreira, Christany Rodrigues2021-12-21T12:42:47Z2999-12-312021-07-09info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfFERREIRA, C. R. Análise imunoistoquímica de proteínas relacionadas à autofagia (Atg7, p62, LC3A e p-mTOR) em cistos radiculares, cistos dentígeros e ceratocistos odontogênicos. 2021. 107f. Dissertação (Programa de Pós-Graduação em Odontologia - PPGO) - Universidade Estadual da Paraíba, Campina Grande-PB, 2021.http://tede.bc.uepb.edu.br/jspui/handle/tede/3952porinfo:eu-repo/semantics/embargoedAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UEPBinstname:Universidade Estadual da Paraíba (UEPB)instacron:UEPB2021-12-21T12:43:20Zoai:tede.bc.uepb.edu.br:tede/3952Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://tede.bc.uepb.edu.br/jspui/PUBhttp://tede.bc.uepb.edu.br/oai/requestbc@uepb.edu.br||opendoar:2021-12-21T12:43:20Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UEPB - Universidade Estadual da Paraíba (UEPB)false |
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