Produção de amilase por Aspergillus flavus isolado a partir da mandioca (Manihot esculenta)

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2017
Autor(a) principal: Brito, Ricardo Gomes de
Outros Autores: http://lattes.cnpq.br/5534957579963007
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal do Amazonas
Instituto de Ciências Biológicas
Brasil
UFAM
Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/6960
Resumo: Nas ultimas quatro décadas graças ao avanço da biotecnologia a indústria de enzimas teve um rápido e grade desenvolvimento chegando ao patamar que conhecemos hoje . Quanto às amilases, estas estão entre as principais classes de enzimas industriais tendo aproximadamente 25% do mercado mundial de enzimas. As enzimas amilolíticas são amplamente utilizadas em aplicações biotecnológicas que vão desde a Indústria de alimentos, fermentação, têxtil, de papel, entre outras.Varias amilases microbianas estão disponíveis comercialmente e são utilizadas na hidrolise do amido, que é um homopolissacaideo formado por unidades de glicose unidas por ligações glicosídicas. É composto por dois polissacarídeos, a amilose e a amilopectina, as amilases atuam na quebra das ligações glicosídicas presentes nas cadeias de amilose e amilopectina. Objetivou-se no presente estudo a produção de enzimas amilolíticas a partir de fungos filamentosos, através de fermentação no estado liquido, visando a potencial utilização em processos biotecnológicos. A atividade amilolítica foi determinada pelo método que baseia -se na variação da intensidade da cor do complexo iodo-amido, denominado de atividade dextrinizante (FUWA, 1954). Para dosagem foram usados pH 6 e temperatura a 50° C, parâmetros esses definidos como sendo os que as amilases em estudo apresentaram sua máxima atividade que foi de 79,2 U/mL. Também foi feita caracterização cinética das amilases em estudo e de acordo com o método de Lineweaver-Burk foi possível determinar a constante Michaelis-Menten KM e também o valor de Vmáx que foram 37,2 mg/mL para KM e 4,0 mg/mL/min. para Vmáx. Quanto à identificação do isolado selecionado, tanto a analise morfologia quanto a molecular tiveram como resultado a espécie Aspergillus flavus sendo que na identificação molecular foram analisadas duas regiões do DNA as regiões ITS e RSU ambas com 100% para a espécie em questão.
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As enzimas amilolíticas são amplamente utilizadas em aplicações biotecnológicas que vão desde a Indústria de alimentos, fermentação, têxtil, de papel, entre outras.Varias amilases microbianas estão disponíveis comercialmente e são utilizadas na hidrolise do amido, que é um homopolissacaideo formado por unidades de glicose unidas por ligações glicosídicas. É composto por dois polissacarídeos, a amilose e a amilopectina, as amilases atuam na quebra das ligações glicosídicas presentes nas cadeias de amilose e amilopectina. Objetivou-se no presente estudo a produção de enzimas amilolíticas a partir de fungos filamentosos, através de fermentação no estado liquido, visando a potencial utilização em processos biotecnológicos. A atividade amilolítica foi determinada pelo método que baseia -se na variação da intensidade da cor do complexo iodo-amido, denominado de atividade dextrinizante (FUWA, 1954). Para dosagem foram usados pH 6 e temperatura a 50° C, parâmetros esses definidos como sendo os que as amilases em estudo apresentaram sua máxima atividade que foi de 79,2 U/mL. Também foi feita caracterização cinética das amilases em estudo e de acordo com o método de Lineweaver-Burk foi possível determinar a constante Michaelis-Menten KM e também o valor de Vmáx que foram 37,2 mg/mL para KM e 4,0 mg/mL/min. para Vmáx. Quanto à identificação do isolado selecionado, tanto a analise morfologia quanto a molecular tiveram como resultado a espécie Aspergillus flavus sendo que na identificação molecular foram analisadas duas regiões do DNA as regiões ITS e RSU ambas com 100% para a espécie em questão.In the last four decades thanks to the advancement of biotechnology the enzyme industry has had a rapid and rapid development reaching the threshold we know today. As for amylases, these are among the major classes of industrial enzymes having approximately 25% of the world market for enzymes. Amylolytic enzymes are widely used in biotechnology applications ranging from the food industry, fermentation, textile, paper, among others. Several microbial amylases are diponivies commercially and are used in the hydrolysis of starch, which is a homopolysaccharide formed by glucose units linked by glycosidic bonds. It consists of two polysaccharides, amylose and amylopectin; amylases act to break the glycosidic bonds present in the amylose and amylopectin chains. The objective of this study was the production of amylolytic enzymes from filamentous fungi, through fermentation in the liquid state, aiming at the potential use in biotechnological processes. The amylolytic activity was determined by the method based on the color intensity variation of the iodo-starch complex, called the dextrinizing activity (FUWA, 1954). For dosing, pH 6 and temperature at 50 ° C were used, which parameters were defined as being the ones that the amylases under study had their maximum activity, which was 79.2 U / mL. It was also possible to determine the MichaelisMenten KM constant and the Vmax value, which were 37.2 mg / mL for KM and 4.0 mg / mL for KM, ml / min. for Vmax. As for the identification of the selected isolate, both the morphology and molecular analysis resulted in the Aspergillus flavus species. In the molecular identification, two regions of the DNA were analyzed in the ITS and RSU regions, both with 100% for the species in question.Universidade Federal do AmazonasInstituto de Ciências BiológicasBrasilUFAMPrograma de Pós-Graduação em BiotecnologiaAstolfi Filho, Spartacohttp://lattes.cnpq.br/2699190136695057Costa, Josemar Gurgel dahttp://lattes.cnpq.br/4452132280168723Yamaguchi, Klenicy Kazumy de Limahttp://lattes.cnpq.br/9935066425464773Brito, Ricardo Gomes dehttp://lattes.cnpq.br/55349575799630072019-02-19T13:16:43Z2017-12-19info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfBRITO, Ricardo Gomes de. Produção de amilase por Aspergillus flavus isolado a partir da mandioca (Manihot esculenta). 2017. 54 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Instituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal do Amazonas, Coari, 2017.https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/6960porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAMinstname:Universidade Federal do Amazonas (UFAM)instacron:UFAM2019-02-20T05:03:54Zoai:https://tede.ufam.edu.br/handle/:tede/6960Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://200.129.163.131:8080/PUBhttp://200.129.163.131:8080/oai/requestddbc@ufam.edu.br||ddbc@ufam.edu.bropendoar:65922019-02-20T05:03:54Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM - Universidade Federal do Amazonas (UFAM)false
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