Método para análise de aspirado esplênico de cão: desenvolvimento de ferramentas aplicáveis ao monitoramento de variações de populações leucocitárias na Leishmaniose visceral

• Ano de defesa: 2005
• Autor(a) principal: Melo, Stella Maria Barrouin
• Orientador(a): Carvalho, Lain Carlos Pontes de
• Banca de defesa: Carvalho, Lain Carlos Pontes de, Costa, Jackson Maurício Lopes, Pompeu, Margarida Maria de Lima, Atta, Ajax Mercês, Nascimento, Roberto José Meyer
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Instituto de ciências da Saúde
• Programa de Pós-Graduação: em Imunologia
• País: brasil
• Palavras-chave em Português: Leishmaniose visceral; Cão; Imunocitoquímica
• Área do conhecimento CNPq: Ciências da Saúde
• Link de acesso: http://repositorio.ufba.br/ri/handle/ri/20211

Introdução: Este estudo centrou-se no desenvolvimento de um método para análise do baço do cão como órgão-alvo de avaliação diagnóstica, objetivando caracterizar componentes celulares da resposta imune in situ na infecção por Leishmania chagasi, dado o papel desse animal como reservatório em áreas endêmicas da doença. Metodologia: O estudo foi desenvolvido em uma seqüência de experimentos, envolvendo cães sadios e portadores de leishmaniose visceral canina (LVC) para: (i) determinar a sensibilidade de testes parasitológicos realizados com amostras de aspirados esplênicos e do linfonodo poplíteo no diagnóstico confirmatório da infecção em 64 cães soropositivos para anticorpos anti-Leishmania; (ii) avaliar a segurança da biópsia aspirativa com agulha fina em cães, como procedimento para obtenção de amostras para análise em laboratório, sendo a técnica utilizada em 209 animais que apresentavam condições clínicas variando de ausência de sinais a quadros terminais de LVC; e (iii) padronizar técnicas para a análise de amostras de baço, por meio de coloração citoquímica com corante de Wright e hematoxilina-eosina, e marcação imunocitoquímica com anticorpos monoclonais, e aplicá-las na avaliação da composição celular esplênica de 14 cães saudáveis e 15 portadores de LVC. Resultados: Na primeira abordagem, foi obtida uma taxa de detecção de parasitos de 74% em aspirados esplênicos, em comparação com 18% em aspirados de linfonodo, indicando o uso de aspirados de baço como amostras de escolha para o diagnóstico parasitológico da doença. Em seguida, a avaliação do risco potencial da punção aspirativa de baço, objetivando a obtenção de amostras para análise das células do sistema imune do cão nesse órgão, mostrou que o procedimento não causou efeitos adversos e pôde ser considerado eficaz e seguro. Na etapa subseqüente, o método desenvolvido permitiu a identificação de diferenças significativas entre as populações de leucócitos esplênicos e do sangue periférico nos diferentes grupos, incluindo alterações associadas à doença. Todos os resultados são discutidos. Conclusão: A avaliação de aspirados de baço com o método proposto constitui uma contribuição potencial ao estudo do sistema imune do cão, com a perspectiva de ser aplicado como uma ferramenta analítica no monitoramento da resposta imune esplênica in situ em pesquisas com imunoterápicos e preparações candidatas a vacina contra a LVC