Síntese, caracterização e ensaios biológicos de biomateriais de alginato contendo doador de óxido nítrico e nanopartículas de prata
Ano de defesa: | 2020 |
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Síntese, caracterização e ensaios biológicos de biomateriais de alginato contendo doador de óxido nítrico e nanopartículas de prataALGINATOSNANOPARTÍCULAS DE PRATAÓXIDO NÍTRICOAÇÃO ANTIBACTERIANAALGINATESILVER NANOPARTICLESNITRIC OXIDEANTIBACTERIAL ACTIONPROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIA E TECNOLOGIA/QUÍMICA - UFABCOrientadora: Profa. Dra. Amedea Barozzi SeabraDissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC. Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia/Química, Santo André, 2020.Oxido nitrico (NO) esta relacionado a diversos processos biologicos, apresentando, tambem, atividades antibacteriana e antitumoral. Nanoparticulas de prata (AgNPs) sao conhecidas por sua atividade antibacteriana. Neste estudo, AgNPs, sintetizadas biogenicamente usando extrato de cha verde (Camellia sinensis), foram combinadas com acido S-nitrosomercaptosuccinico (S-nitroso-MSA), uma molecula doadora de NO, com objetivo de avaliar o potencial antibacteriano dessa combinacao. O alginato, um polimero natural, biodegradavel e biocompativel, foi usado para produzir hidrogel (AHG) e nanoparticulas polimericas (ANPs) para a incorporacao de S-nitroso-MSA e/ou AgNPs. Os materiais foram caracterizados por diversas tecnicas e a celula Vero, modelo in vitro para celulas saudaveis, foram usadas para avaliar a citotoxicidade desses materiais e determinar concentracoes seguras de aplicacao. Bacterias Gram-Negativa Escherichia coli ATCC 25922, e duas Gram-Positivas: Staphylococcus aureus ATCC 25923 e Streptococcus mutans UA159 foram usadas para avaliar o potencial antibacteriano das formulacoes preparadas. Caraterizacao das AgNPs demonstraram rede cristalina correspondente a prata reduzida com estrutura cubica de face centrada e o Espalhamento de Luz Dinamico (DLS) apresentou tamanho de 35,3 } 5,9 nm. A caracterizacao do AHG apresentou estabilidade termica e resistencia a tensao de cisalhamento com variacao de frequencia, pela analise reologica; Microscopia Eletronica de Varredura apresentou que o AHG seco possui superficie lisa e homogenea. Liberacao do NO pelo S-nitroso-MSA no AHG foi sustentada por 18 h na temperatura da pele. A caracterizacao das ANPs apresentou tamanho hidrodinamico entre 256,65 } 9,26 nm e 271,13 } 8,99 nm, com indice de polidispersao entre 0,37 } 0,03 e 0,40 } 0,02, e potencial Zeta entre -15,63 } 1,47 mV e -44,77 } 4,38 mV, indicando boa estabilidade. Eficiencia de encapsulamento do MSA pelas ANPs foi de 98,7 } 0,1 %, indicando grande potencial de acao como carreador do S-nitroso-MSA. Liberacao de NO pelas ANPs contendo S-nitroso-MSA apresentou liberacao sustentada por 12 h. Atividade antibacteriana de 2 ¿Êg/mL de AHG-S-nitroso-MSA-AgNPs para as tres linhagens bacterianas testadas foi significantemente mais alta comparada ao AHG contendo individualmente S-nitroso-MSA ou AgNPs. Destaca-se que essa concentracao de AHG (2 ¿Êg/mL) foi segura para as celulas Vero. ANP contendo S-nitroso-MSA e AgNPs demonstraram atividade bacteriostatica para Escherichia coli ATCC 25922 and Staphylococcus aureus ATCC 25923 com 3.125 ¿Êg/mL de ANP-S-nitroso-MSA-AgNPs, uma concentracao tambem segura para celulas Vero. Portanto, AHG e ANPs possuem grande potencial de aplicacao como agentes antibacterianos contra bacterias multirresistentes com sinergismo de acao.Nitric oxide (NO) is related to several biological processes, also presenting antibacterial and antitumoral applications. Silver nanoparticles (AgNPs) are also well known for its antibacterial activity. In this work, AgNPs, biogenically synthesized using green tea (Camellia sinensis) extract, were combined with S-nitrosomercaptosuccinic acid (S-nitroso-MSA), a NO donor, in order to study the antibacterial potential of this combination. Alginate, a natural, biodegradable and biocompatible polymer was used to produce hydrogel (AHG) and nanoparticles (ANPs) to incorporate S-nitroso-MSA and/or AgNPs. The materials were characterized and Vero cells, in vitro model for healthy cells, were used to evaluate cytotoxicity and to determine a safe concentration of application. Gram-negative bacterium Escherichia coli ATCC 25922, and two gram-positive bacteria: Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Streptococcus mutans UA159 were used to evaluate the potential antibacterial action of prepared formulations. Characterization of AgNPs demonstrated reduced silver lattice with face centered cubic structure and Dynamic Light Scattered presented a size 35.3 ± 5.9 nm. For AHG characterization it was observed thermal stability and resistance to variable shear stress by rheological measurements; SEM presented dried hydrogels with smooth surface. S-nitroso-MSA on hydrogels demonstrated sustained NO release for 18 h at skin temperature. ANPs characterization presented hydrodynamic size between 256.65 ± 9.26 nm and 271.13 ± 8.99 nm, with polydispersity index between 0.37 ± 0.03 and 0.40 ± 0.02, and zeta potential between -15.63 ± 1.47 mV and -44.77 ± 4.38 mV, indicating good stability. MSA Encapsulation Efficiency of 98.7 ± 0.1 % by ANPs, indicates great potential of use on drug delivery S-nitroso-MSA encapsulated in ANPs presented sustained release of NO for 12 h. AHG-S-nitroso-MSA-AgNPs presented antibacterial action at 2 ìg/mL for the three strains tested with significantly higher activity compared to AHG containing individually S-nitroso-MSA or AgNPs. Importantly, this AHG concentration (2 ìg/mL) was safe for Vero cells, the model used for healthy cells. ANP containing S-nitroso-MSA and AgNPs demonstrated bacteriostatic activity for Escherichia coli ATCC 25922 and Staphylococcus aureus ATCC 25923 at 3.125 ìg/mL ANP-S-nitroso-MSA-AgNPs concentration, which is safe for Vero cells. Therefore, AHG and ANPs have potential for topical and inner body antibacterial applications with synergism action between NO and AgNPs for multi-drug resistant bacteria.Seabra, Amedea BarozziPolo, André SartoSouza, Juliana dos Santos deUrzedo, Alessandro Lamarca2020info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf99 f. : il.http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=121972http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=121972&midiaext=78894http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=121972&midiaext=78895Cover: http://biblioteca.ufabc.edu.br/php/capa.php?obra=121972porreponame:Repositório Institucional da UFABCinstname:Universidade Federal do ABC (UFABC)instacron:UFABCinfo:eu-repo/semantics/openAccess2021-11-05T16:02:02Zoai:BDTD:121972Repositório InstitucionalPUBhttp://www.biblioteca.ufabc.edu.br/oai/oai.phpopendoar:2021-11-05T16:02:02Repositório Institucional da UFABC - Universidade Federal do ABC (UFABC)false |
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