Estudo biológico e molecular de dois isolados de Lettuce mosaic virus (LMV)

• Ano de defesa: 2017
• Autor(a) principal: Pereira, Kelly Marques
• Orientador(a): Figueira, Antonia dos Reis
• Banca de defesa: Souza, Sára Maria Clalfoun de, Pinto, César Augusto Brasil
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Lavras
• Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-graduação em Biotecnologia Vegetal
• Departamento: Não especifica vinculação com nenhum departamento
• País: brasil
• Palavras-chave em Português: Lettuce mosaic virus; Alface - Vírus; Alface - Cultivo; Lettuce - Virus; Lettuce - Cultivation
• Área do conhecimento CNPq: Genética Vegetal
• Link de acesso: https://repositorio.ufla.br/handle/1/28537

O Lettuce mosaic virus (LMV) é considerado um dos vírus de maior importância na cultura da alface, pois além de causar perdas consideráveis na cultura, é transmitido por sementes e por afídeos. Em condições naturais, podem ocorrer diversos variantes genéticos do LMV, como a estirpe que causa o fechamento de cabeça em alface cv. Regina 579, que tem sido estudada no DFP/UFLA, denominado LMV cf. Neste trabalho, foi estudado o efeito dessa estirpe, em comparação com outra estirpe, denominado LMV AF198, em 12 cultivares de alface: Quatro Estações, Grand Rapids, Rubete, Everglades, Salinas 88, Winslow, Colorado, Regina, Raider Plus, Balsamo, Luiza e Grandes Lagos, As cultivares de alface foram inoculadas mecanicamente com os dois isolados virais, foram mantidas repetições como controle. As plantas foram monitoras visualmente, para avaliação dos sintomas e, a partir do 14° dia após inoculação, foram testadas, semanalmente, pelo teste sorológico DAS-ELISA para acompanhar o desenvolvimento da infecção. As cultivares que não foram positivas para o DAS-ELISA e as que apresentaram sintomas diferentes entre as estirpes foram submetidas à extração de RNA e ao RT-PCR. Simultaneamente, foram desenhados primers específicos para amplificação das proteínas P3 e 6K2, uma vez que em trabalhos anteriores, sugeriu-se um estudo dessas proteínas, ou seja, as mesmas candidatas à indução do sintoma atípico do LMV cf. Dentre os sintomas observados, as cultivares em que se apresentaram o fechamento da cabeça quando inoculadas com LMV Cf, foram, Regina 579 e Quatro Estações. Na estirpe LMV cf, as cvs. Rubete, Everglades, Salinas 88 e Luíza apresentaram resistência, com resultado negativo no DAS-ELISA, as demais cvs. apresentaram concentração de partículas virais e foram positivas. Na estirpe LMV AF198, somente as cvs. Everglades e Luíza mantiveram a resistência, apresentando resultado negativo; dentre as cvs. que apresentaram resultado positivo destaca-se a Salinas 88, que, embora não tenha apresentado sintomas, foi detectada concentração de partículas virais com resultado positivo no DAS-ELISA, mesmo resistente. No RT-PCR todas as cvs. analisadas foram positivas. Foi concluído que existe diferença entre as duas estirpes, as quais podem ser observadas nos sintomas induzidos nas cvs. e nos resultados obtidos pelo DAS-ELISA e RT-PCR. As proteínas 6K2 dos dois isolados foram expressas em plantas transgênicas, não tendo havido diferenças entre elas, sugere-se o estudo das demais proteínas. Esse estudo traz informações importantes na relação desse patógeno com a planta hospedeira e os resultados obtidos colaboram com os estudos de melhoramento de cultivares de alface resistente às diversas estirpes do LMV.