Detecção de Campylobacter fetus em lavados prepuciais de touros pela PCR

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2000
Autor(a) principal: Ana Paula Reinato Stynen
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de Minas Gerais
UFMG
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Bovino
Lavado prepucial
Diagnóstico
Gene 23S rDNA
Campylobacter fetus
Campilobacteriose genital bovina
PCR
Equino Doenças
Infecções por campylobacter
Link de acesso: http://hdl.handle.net/1843/BUDB-8BQGN8
Resumo: A PCR based on the 23S rDNA sequence was developed for the detection of C. fetus from preputial washings of bulls. Three extraction methods were evaluated for the extraction of DNA in preputial washings: the guanidiniu, tiocynate, the alkaline lysis and the Chelex 100 methods. To determine the specificity of the test, Camppylobacter sp, Helicobacter sp and Escherichia coli reference strains were submitted to PCR. Preputial washings of 47 bulls from one farm with a positive diagnosis of Bovine Genital Campilobactosis were tested by PCR and direct fluorescent antibody test (DFAT). Only C. fetus subps, fetus and C.fetus subps, venerealis were amplified by PCR and the detection limit was 3,8 x 10² CFU/ml of C. fetus. The specificity of the amplified product was confirmed by restriction analysis with Avall. Eight bulls were considered infected by the two tecniques, but three animals were only positive by PCR and seven only by DFAT. The present PCR assay was suitable to detect C. fetus in preputial washing samples.
id UFMG_033f3cd78af42172072dd9cc5b10a47b
oai_identifier_str oai:repositorio.ufmg.br:1843/BUDB-8BQGN8
network_acronym_str UFMG
network_name_str Repositório Institucional da UFMG
repository_id_str
spelling Detecção de Campylobacter fetus em lavados prepuciais de touros pela PCRBovinoLavado prepucialDiagnósticoGene 23S rDNACampylobacter fetusCampilobacteriose genital bovinaPCREquino DoençasInfecções por campylobacterA PCR based on the 23S rDNA sequence was developed for the detection of C. fetus from preputial washings of bulls. Three extraction methods were evaluated for the extraction of DNA in preputial washings: the guanidiniu, tiocynate, the alkaline lysis and the Chelex 100 methods. To determine the specificity of the test, Camppylobacter sp, Helicobacter sp and Escherichia coli reference strains were submitted to PCR. Preputial washings of 47 bulls from one farm with a positive diagnosis of Bovine Genital Campilobactosis were tested by PCR and direct fluorescent antibody test (DFAT). Only C. fetus subps, fetus and C.fetus subps, venerealis were amplified by PCR and the detection limit was 3,8 x 10² CFU/ml of C. fetus. The specificity of the amplified product was confirmed by restriction analysis with Avall. Eight bulls were considered infected by the two tecniques, but three animals were only positive by PCR and seven only by DFAT. The present PCR assay was suitable to detect C. fetus in preputial washing samples.Uma reação em cadeia da polimerase (PCR) baseada na seqüência 23S do DNA ribossomal foi desenvolvida para detecção de C. fetus em lavados prepuciais de touros. Foram avaliados três métodos de extração de DNA nos lavados prepuciais: o método do tiocianato de guanidina, o da lise alcalina e do Chelex 100. Para determinar a especificidade do teste, amostras de referência de Campylobacter SP, Helicobacter SP e Escherichia coli forma submetidas a PCR. Lavados prepuciais de 47 touros de uma propriedade com diagnóstico de Campilobacteriose Genital Bovina foram testados pela PCR e imunofluorescência direta (IFD). Somente amostras de C. fetus subps. venerealis e C. fetus subps. fetus foram amplificadas e o limite de detecção da PCR em lavado prepucial foi de 3,8 x 102 CFU/ml de C. fetus. A especificidade do produto amplificado foi confirmada pela análise de restrição frente à enzima Ava II. Oito touros foram considerados infectados pelas duas técnicas, porém três animais só foram positivos à PCR e sete somente na IFD. A PCR padronizada mostrou-se eficiente na detecção de C. fetus em amostras de lavado prepucial, nas condições trabalhadas.Universidade Federal de Minas GeraisUFMGAndrey Pereira LageRomulo Cerqueira LeiteEdel Figueiredo BarbosaMaurilio Andrade RochaDulciene Maria M QueirozAna Paula Reinato Stynen2019-08-12T11:48:09Z2019-08-12T11:48:09Z2000-02-18info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/1843/BUDB-8BQGN8info:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UFMGinstname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)instacron:UFMG2019-11-14T20:43:24Zoai:repositorio.ufmg.br:1843/BUDB-8BQGN8Repositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufmg.br/oairepositorio@ufmg.bropendoar:2019-11-14T20:43:24Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)false
dc.title.none.fl_str_mv Detecção de Campylobacter fetus em lavados prepuciais de touros pela PCR
title Detecção de Campylobacter fetus em lavados prepuciais de touros pela PCR
spellingShingle Detecção de Campylobacter fetus em lavados prepuciais de touros pela PCR
Ana Paula Reinato Stynen
Bovino
Lavado prepucial
Diagnóstico
Gene 23S rDNA
Campylobacter fetus
Campilobacteriose genital bovina
PCR
Equino Doenças
Infecções por campylobacter
title_short Detecção de Campylobacter fetus em lavados prepuciais de touros pela PCR
title_full Detecção de Campylobacter fetus em lavados prepuciais de touros pela PCR
title_fullStr Detecção de Campylobacter fetus em lavados prepuciais de touros pela PCR
title_full_unstemmed Detecção de Campylobacter fetus em lavados prepuciais de touros pela PCR
title_sort Detecção de Campylobacter fetus em lavados prepuciais de touros pela PCR
author Ana Paula Reinato Stynen
author_facet Ana Paula Reinato Stynen
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Andrey Pereira Lage
Romulo Cerqueira Leite
Edel Figueiredo Barbosa
Maurilio Andrade Rocha
Dulciene Maria M Queiroz
dc.contributor.author.fl_str_mv Ana Paula Reinato Stynen
dc.subject.por.fl_str_mv Bovino
Lavado prepucial
Diagnóstico
Gene 23S rDNA
Campylobacter fetus
Campilobacteriose genital bovina
PCR
Equino Doenças
Infecções por campylobacter
topic Bovino
Lavado prepucial
Diagnóstico
Gene 23S rDNA
Campylobacter fetus
Campilobacteriose genital bovina
PCR
Equino Doenças
Infecções por campylobacter
description A PCR based on the 23S rDNA sequence was developed for the detection of C. fetus from preputial washings of bulls. Three extraction methods were evaluated for the extraction of DNA in preputial washings: the guanidiniu, tiocynate, the alkaline lysis and the Chelex 100 methods. To determine the specificity of the test, Camppylobacter sp, Helicobacter sp and Escherichia coli reference strains were submitted to PCR. Preputial washings of 47 bulls from one farm with a positive diagnosis of Bovine Genital Campilobactosis were tested by PCR and direct fluorescent antibody test (DFAT). Only C. fetus subps, fetus and C.fetus subps, venerealis were amplified by PCR and the detection limit was 3,8 x 10² CFU/ml of C. fetus. The specificity of the amplified product was confirmed by restriction analysis with Avall. Eight bulls were considered infected by the two tecniques, but three animals were only positive by PCR and seven only by DFAT. The present PCR assay was suitable to detect C. fetus in preputial washing samples.
publishDate 2000
dc.date.none.fl_str_mv 2000-02-18
2019-08-12T11:48:09Z
2019-08-12T11:48:09Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/1843/BUDB-8BQGN8
url http://hdl.handle.net/1843/BUDB-8BQGN8
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal de Minas Gerais
UFMG
publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal de Minas Gerais
UFMG
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFMG
instname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)
instacron:UFMG
instname_str Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)
instacron_str UFMG
institution UFMG
reponame_str Repositório Institucional da UFMG
collection Repositório Institucional da UFMG
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)
repository.mail.fl_str_mv repositorio@ufmg.br
_version_ 1835272853604270080

Registros relacionados