Diversidade e bioprospecção de fungos endofíticos associados a Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (Barbatimão - Fabaceae)

• Ano de defesa: 2011
• Autor(a) principal: Camila Rodrigues de Carvalho
• Orientador(a): Luiz Henrique Rosa
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Minas Gerais
• Palavras-chave em Português: Microbiologia
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-B27MYE

Fungos endofíticos são microrganismos que ocupam o interior de tecidos de plantas sem causar sintomas aparentes de doença. Estes microrganismos podem ser encontrados em diferentes tipos vegetais e representam fontes promissoras de metabólitos bioativos de interesse farmacológico. Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (Fabaceae) é uma angiosperma de ampla distribuição geográfica e utilizada devido sua ação cicatrizante, antiinflamatória, hemostática, antimicrobiana, anti-séptica e antidiarréica. Apesar de seu amplo emprego na medicina popular, nenhum trabalho foi realizado, até o momento, com o objetivo de conhecer a micota endofítica associada a esta planta. Este trabalho teve como objetivo caracterizar a diversidade de fungos endofíticos associados a S. adstringens e avaliá-los quanto à produção de metabólitos antifúngicos, citotóxicos e antiparasitários. Fragmentos de folhas e cascas de 30 indivíduos jovens e adultos de S. adstringens foram desinfestados superficialmente e inoculados em Ágar Dextrose Batata (BDA). As placas foram incubadas por até 60 dias e os fungos obtidos foram purificados em meio BDA. Das plantas jovens foram obtidos 200 isolados de fungos filamentosos e das plantas adultas, 147 isolados. Todos os isolados foram depositados na Coleção de Microrganismos e Células da Universidade Federal de Minas Gerais. De acordo com as características macromorfológicas, os isolados foram agrupados em 99 morfotipos. Um representante de cada morfotipo foi selecionado para o sequenciamento da região ITS do gene do rRNA. Os isolados foram identificados foram pertencentes aos gêneros: Alternaria, Arthrobotrys, Aspergillus, Botryosphaeria, Cladosporium, Colletotrichum, Coniochaeta, Cytospora, Diaporthe, Fimetariella, Guignardia, Massarina, Muscodor, Neofusicoccum, Nigrospora, Paraconiothyrium, Penicillium, Pestalotiopsis, Phomopsis, Preussia, Pseudofusicoccum, Sordaria, Sporormiella, Trichoderma e Xylaria. Todos estes gêneros pertencem ao filo Ascomycota. Além disso, três táxons foram identificados como Diaporthales sp., Pezizales sp. e Glomerellaceae sp. A abundância dos táxons variou de 0,31 a 20,76%. Destes, Phomopsis sp., Diaporthe phaseolorum, Diaporthales sp. e Guignardia camelliae foram os mais abundantes. A diversidade de táxons foi avaliada em termos de riqueza e equitabilidade por meio dos índices de Shannon (H) e de Simpson. O maior valor de H foi atribuído a comunidadefúngica associada às plantas adultas (H = 2,79), mas o índice de Simpson apresentou valores próximos entre plantas jovens e adultas (0,90 e 0,88), o que indica uma distribuição homogênea dos táxons dentro de cada comunidade. Os fungos endofíticos foram cultivados em BDA por 15 dias e após este período, o crescimento fúngico e o meio de cultura foram tratados com etanol para obtenção dos extratos brutos. A atividade antifúngica dos extratos foi avaliada pelo método de microdiluição em placa utilizando como alvo linhagens de Candida albicans (ATCC 18804, 2.1A, 15.3C). O ensaio de toxicidade para células tumorais humanas foi avaliado utilizando-se as linhagens tumorais MCF-7 (mama) e TK-10 (renal). A ação antiparasitária foi avaliada sobre a forma amastigota de Leishmania amazonensis. Na determinação da atividade antifúngica, 0,3% dos extratos foram promissores (apresentaram valores de inibição maior ou igual a 70%), 5,2% medianamente promissores (apresentaram valores de inibição entre 50-69%) e 94,5% não promissores (apresentaram valores de inibição menor ou igual a 49%) contra pelo menos uma linhagem alvo de C. albicans quando os extratos foram utilizados na concentração de 100 g/mL. Já nos testes dos extratos na concentração de 250 g/mL, 13,7% dos extratos foram promissores, 56,8% medianamente promissores e 39,5% não promissores. Nenhum extrato apresentou atividade contra L. amazonensis e 18,7% dos extratos fúngicos foram ativos contra células tumorais humanas. Os fungos produtores de extratos ativos foram identificados como: Colletotrichum boninense, Diaporthe phaseolorum, Glomerellaceae sp., Guignardia mangiferae, Nigrospora oryzae, Penicillium sp., Pestalotiopsis clavispora, Phomopsis sp., Pseudofusicoccum sp. e Xylaria sp. Os resultados obtidos neste trabalho contribuem para o conhecimento da micota endofítica associada a S. adstringens. Os fungos endofíticos com extratos bioativos representam uma possível fonte potencial de substâncias que podem ser utilizadas como protótipos para o desenvolvimento de novas drogas antimicrobianas e antitumorais