Estudo bioquímicos e imunológicos das proteínas Pb28 e Pb 27r do fungo Paracoccidioídes brasiliensis
| Ano de defesa: | 2007 |
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| Tipo de documento: | Tese |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
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| Instituição de defesa: |
Universidade Federal de Minas Gerais
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| Programa de Pós-Graduação: |
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2019-08-14T16:58:36Z2025-09-08T22:51:52Z2019-08-14T16:58:36Z2007-03-27https://hdl.handle.net/1843/CMFC-78PLFLUniversidade Federal de Minas GeraisParacoccidioides brasiliensisBioquímicaParacoccidioides brasiliensisEstudo bioquímicos e imunológicos das proteínas Pb28 e Pb 27r do fungo Paracoccidioídes brasiliensisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisBernardo Sgarbi Chaves Reisinfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UFMGinstname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)instacron:UFMGAlfredo Miranda de GoesCelia Maria de Almeida SoaresAdriano Monteiro de Castro PimentaPatricia Silva CisalpinoMarcelo Torres BozzaAparacoccidioidomicose (PCM) é uma doença sistêmica, granulomatosa eendêmica da América Latina, cujo agente etiológico éo fungoParacoccidioides brasiliensis. O diagnóstico da infecção é,principalmente,realizado por biópsia do tecido acometido. Diversos pesquisadores têmvoltado sues esforços na tentativa de isolar antígenos capazes dediagnosticar, sorologicamente, pacientes comPCM, assimcomo desencadearuma resposta protetora à infecção. Oantígeno Mexo,obtido a partir daP. brasiliensis foicapaz deextração das proteínas extracelulares do fungodiscriminar pacientes comPCM de indivíduos não infectados comsensibilidade de 100%. Alémdisso, pacientes emtratamento diminuemounão mais reconhecemantígenos presentes no Mexo. Uma proteína de 28 kDa(Pb28), presente no Mexo,foireconhecida por100% dos soros de pacientescomPCM testados.Essa proteína se mostrou altamente específica àinfecção, não sendo reconhecida pornenhumdos soros depacientes cominfecções diversas testados. APb28 foipurificada porFPLC e HPLC e aseqüência de sua região N-terminaldeterminada. As análises de homologia esimilaridade embancos de dados demonstraramque a Pb28 corresponde a umP. brasiliensis. Utilizando a mesma estratégia de purificaçãonovo antígeno de sequenciamento da região N-terminal, uma outra proteína dtambémreconhecida por soro de pacientes comPCM, foiidentificada. Essaproteína foicaracterizada como sendo o antígeno de 27 kDa do fungo(U41503.1), até então uma proteína hipotética, e denominada de Pb27r. Aseqüência de DNAcodificadora para a proteína Pb27r foiamplificada, clonadexpressa emsistema de expressão pGEX-4T-2.Estudosimunológicos coma Pb27r purificada demonstraramque essa proteína éaltamente sensível(80,5%) e específica (100%) àPCM emensaios de ELISAcomsoros humanos. Ela ainda foicapaz de induzir resposta imunológicaprotetora,comalta produção deIgG2b, emcamundongos Balb/C imunizadoscoma proteína e infectados como isolado virulento do fungo,Pb18. Estudosbioquímicos da Pb27r determinarama presença de 31,0% deestruturas -hélices;10,7% deestruturas folha-ß antiparalelas;9,0% deestruturas folha-ß paralelas ;17,3% deestruturas ß-Turn;32,4%de estruturas randômicas.Anticorpos Anti-Pb27r foramcapazes de localizar a proteína Pb27r nasuperfície do fungo.Esses resultados demonstramque ambas proteínas aquiestudas, Pb28 e Pb27r,têmcapacidade de discriminar pacientes comPCMpodendo serutilizadas emensaios de imunodiagnóstico e, a Pb27r podetambémser usada na confecção de vacina contrao fungo.UFMGORIGINALbernardo_resumo.pdfapplication/pdf16097https://repositorio.ufmg.br//bitstreams/3146f8f0-20e3-4d01-8f00-f52d93e83f57/download85e6b3d5e11538ded77e8f603793f036MD51trueAnonymousREADTEXTbernardo_resumo.pdf.txttext/plain2810https://repositorio.ufmg.br//bitstreams/c701c0ca-a17d-4258-8359-9541122d6df3/downloadadf5f578ae5575b36e0a104b42d0a316MD52falseAnonymousREADTHUMBNAILbernardo_resumo.pdf.jpgbernardo_resumo.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg4868https://repositorio.ufmg.br//bitstreams/128b2414-5be8-4516-933c-98374837a5b7/download45e31389d5f9aeb90a701ec4de1423aeMD53falseAnonymousREAD1843/CMFC-78PLFL2025-09-09 15:56:23.948open.accessoai:repositorio.ufmg.br:1843/CMFC-78PLFLhttps://repositorio.ufmg.br/Repositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufmg.br/oairepositorio@ufmg.bropendoar:2025-09-09T18:56:23Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)false |
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