Avaliação do potencial de peptídeos sintéticos de Leishmania infantum para o diagnóstico da Leishmaniose visceral canina.

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2021
Autor(a) principal: Moreira, Gabriel Jose Lucas
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
dARK ID: ark:/61566/0013000003s2c
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: http://www.repositorio.ufop.br/jspui/handle/123456789/13566
Resumo: Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.
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spelling Avaliação do potencial de peptídeos sintéticos de Leishmania infantum para o diagnóstico da Leishmaniose visceral canina.Leishmania infantumSorodiagnósticoPeptídeosPrograma de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.No Brasil, o combate à Leishmaniose Visceral Canina (LVC) ainda enfrenta grandes desafios, grande parte deles são baseados no desempenho limitado dos testes diagnósticos empregados pelo protocolo atual do Ministério da Saúde. No presente estudo, avaliamos o desempenho de peptídeos selecionados por imunoinformática, como alternativa ao diagnóstico sorológico da LVC. Para avaliação dos peptídeos foi realizado um ensaio imunoenzimático em um conjunto heterogêneo de amostras de soro (n = 113), sendo composto por animais infectados por Leishmania infantum em diferentes formas clínicas, bem como animais não infectados. Além disso, foram inclusas amostras de cães com outras infecções (Erhlichia canis, Babesia Canis e Trypanosoma cruzi) e animais imunizados pela vacina comercial LeishTec® e uma promissora candidata vacinal desenvolvida pelo nosso grupo de pesquisas, a LBSap. Nossos resultados indicam alta acurácia dessa abordagem, o que pode ser demonstrado pelos valores de sensibilidade tanto dos peptídeos isolados quanto em combinação que atingiram valores entre 86,4% a 100%, além dos valores de especificidade, que alcançaram resultados próximos ou superiores a 90% em todos os ensaios. Observamos que os peptídeos são capazes de detectar corretamente a maioria dos animais infectados por L. infantum independente da forma clínica, destacando-se na detecção de todos os animais assintomáticos pelo peptídeo 48 e o Mix. Além disso, notamos que os peptídeos não apresentaram reatividade nas amostras de animais infectados por T. cruzi, entretanto o Mix dos peptídeos apresentou redução da reatividade cruzada em todas as infecções caninas analisadas, apresentando acurácia de 89,5% nas análises executadas contra 68,1% do ensaio realizado com antígeno solúvel de Leishmania infantum (ASLi). Destacamos também a baixa reatividade dos peptídeos quando analisadas amostras de cães vacinados, observando redução de resultados falso-positivos quando comparado ao ASLi. Enfatizamos, mais uma vez, o desempenho do Mix frente a tais amostras, sendo observada ausência de reatividade quando a combinação dos peptídeos foi empregada em soros de animais vacinados. Nossos resultados indicam o potencial uso da imunoinformática para identificação de alvos promissores para o diagnóstico da LVC e abrem uma perspectiva importante da aplicação de peptídeos sintéticos como alternativa para o uso no diagnóstico sorológico para da doença.In Brazil, the fight against Canine Visceral Leishmaniasis (LVC) still faces significant challenges, most of which are based on the limited performance of the diagnostic tests used by the current protocol of the Ministry of Health. In the present study, we evaluated the performance of peptides selected by immunoinformatics as an alternative to the serological diagnosis of CVL. An immunoenzymatic assay was performed to evaluate the peptides on a heterogeneous set of serum samples (n = 113), composed of animals infected with Leishmania infantum in different clinical forms, as well as uninfected animals. Besides, samples of dogs with other infections (Ehrlichia canis, Babesia Canis and Trypanosoma cruzi) and animals immunized by the commercial LeishTec® vaccine and a promising vaccine candidate developed by our research group, LBSap, were included. Our results indicate high accuracy of this approach, which can be demonstrated by the sensitivity values of both the isolated peptides and in the Mix that reached values between 86.4% to 100%, in addition to the specificity values, which achieved results close or superior 90% in all tests. We observed that the peptides could correctly detect most animals infected with L.infantum regardless of the clinical form, standing out in the detection of all asymptomatic animals by peptide 48 and the Mix. In addition, we noticed that the peptides did not show reactivity in the samples of animals infected with T. cruzi. However, the peptides' Mix showed a reduction in cross-reactivity in all analyzed canine infections, presenting an accuracy of 89.5% in the analyses performed against 68, 1% of the assay performed with soluble Leishmania infantum antigen (SLiA). We also highlight the low reactivity of peptides when analyzing samples from vaccinated dogs, observing a reduction in false-positive results when compared to SLiA. We emphasized, once again, the performance of the Mix against such samples, with the absence of reactivity being observed when the combination of the peptides was used in sera from vaccinated animals. Our results indicate the potential uses of immunoinformatics to identify promising targets for the diagnosis of CVL and open an essential perspective of applying synthetic peptides as an alternative for use in the serological diagnosis of the disease.Roatt, Bruno MendesBrito, Rory Cristiane Fortes deRoatt, Bruno MendesBrito, Rory Cristiane Fortes deMendes, Tiago Antônio de OliveiraSilva, Breno de MelloMoreira, Gabriel Jose Lucas2021-08-24T13:51:13Z2021-08-24T13:51:13Z2021info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfMOREIRA, Gabriel Jose Lucas. Avaliação do potencial de peptídeos sintéticos de Leishmania infantum para o diagnóstico da Leishmaniose visceral canina. 2021. 83 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2021.http://www.repositorio.ufop.br/jspui/handle/123456789/13566ark:/61566/0013000003s2chttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/us/Autorização concedida ao Repositório Institucional da UFOP pelo(a) autor(a) em 16/08/2021 com as seguintes condições: disponível sob Licença Creative Commons 4.0 que permite copiar, distribuir e transmitir o trabalho, desde que sejam citados o autor e o licenciante. 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