Efeito da solução de nanopartículas de quitosana no biofilme de Candida spp. e nas propriedades de superfície da resina acrílica

• Ano de defesa: 2015
• Autor(a) principal: Gondim, Brenna Louise Cavalcanti
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal da Paraíba; Brasil; Odontologia; Programa de Pós-Graduação em Odontologia; UFPB
• Palavras-chave em Português: Quitosana; Candida; Biofilmes; Prótese Dentária; Nanopartículas; Chitosan; Biofilms; Dental Prosthesis; Nanoparticles; CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::ODONTOLOGIA
• Link de acesso: https://repositorio.ufpb.br/jspui/handle/123456789/11641

Introdução: A propriedade antifúngica da quitosana possibilita sua aplicação como inibidor da formação de biofilme sobre próteses dentárias. Objetivos: Sintetizar, caracterizar e avaliar a atividade antifúngica da solução de nanopartículas de quitosana (ChNP) sobre Candida spp., na aderência, formação e redução do biofilme maduro, bem como nas propriedades físicas da resina acrílica e na redução do biofilme de Candida spp. desenvolvido na superfície da mesma. Metodologia: A solução de 3,8 mg/mL nanopartículas de quitosana (ChNP) foi obtida pela técnica de geleificação iônica. A caracterização da solução foi realizada por espectroscopia de absorção na região do infravermelho (FTIR) e microscopia eletrônica de transmissão (MET). Foi realizado a determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Fungicida Mínima (CFM) frente as cepas de C. albicans ATCC 60193, C. albicans ATCC 10,231, C. albicans CBS 562, C. tropicallis CBS 94 e C. krusei CBS 73 utilizando como controle positivo o hipoclorito de sódio 1% (NaOCl). A análise da cinética de crescimento por contagem de unidades formadoras de colônias (UFC) sobre C. albicans ATCC 60193 e a alteração da micromorfologia fúngica frente a diferentes concentrações da ChNP e hipoclorito de sódio foram avaliadas. A inibição da aderência inicial, formação e redução do biofilme maduro de C. albicans foi realizado em microplacas de 96 poços e com exposição das soluções por 1 min e 8 h, a % de inibição das células fúngicas foi obtida utilizando cristal de violeta e leitura das placas por meio de leitor de microplacas, com comprimento de onda de 600 nm. O controle positivo foi a solução de hipoclorito de sódio 1% e o controle negativo foi a solução de cloreto de sódio. Para a análise de aderência e colonização de Candida spp. sobre a base de resina acrílica foram confeccionados quarenta e oito corpos de prova (2 x 4mm) de resina acrílica, os quais foram distribuídos em quatro grupos (n=6): G1(controle), G2 (ChNP CIM), G3 (ChNP CIM x 4) e G4 (hipoclorito de sódio 1%). Os testes foram realizados em placas de 24 poços, e as soluções permaneceram em contato por 8h diárias após biofilme multiespécie de C. albicans ATCC 60193, C. tropicallis CBS 94 e C. krusei CBS 73 desenvolvido por 24 h. Os resultados foram avaliados em 48 h e 5 dias após o início do teste. A análise foi realizada por meio de contagem de UFC das cepas de Candida e comparação entre os grupos e a UFC inicial. Aferições de rugosidade (Ra) e microdureza (VHN) foram realizadas 24h antes e após o experimento. Os ensaios foram conduzidos em triplicata. Os dados foram estatisticamente e descritivamente analisados (a=0.05). Resultados: A CIM83% encontrada da ChNP foi de 30,08 µg/mL, e a relação CIM/CFM demonstrou atividade fungicida para todas as cepas testadas. ChNP demonstrou inibição do crescimento fúngico quando comparado ao controle de crescimento e uma total inibição da CIM x 4 na cinética de crescimento, e mostrou inibição de pseudohifas e clamidoconídeos, apresentando somente a micromorfologia de blastoconídeos. Os resultados dos efeitos inibitórios do ChNP na adesão inicial, na formação e na redução do biofilme de C. albicans mostrou que a maior concentração testada (CIM x 4) foi a mais eficaz. A ChNP demostrou resultado positivo sobre a aderência inicial de C. albicans, uma vez que na CIM x 4 apresentou % I semelhante ao NaOCl (p>0,05). Depois de 1 min de contato, apenas ChNP em CIM x 4 apresentou maior % I na formação de biofilme (51,1%) do que NaOCl. Após 8 h em todas as concentrações, a ChNP mostrou maior I% (50,2; 56.6 e 57,8%) quando comparado ao NaOCl. Durante 72 h de incubação com 3 aplicações de 1 mim, ChNP foi capaz de inibir o biofilme maduro de C. albicans em 52,2% e reduziu o crescimento fúngico em 66,1%, após aplicar por 8 h. Além disso, ChNP com um aplicativo de 8 h tiveram %I maior do que o NaOCl. Apenas a concentração de MIC x 4 para a ChNP foi eficaz de inibir o biofilme maduro de 96 h, (6 x 1 min ou 2 x 8 h). Houve redução significativa de UFC de Candida spp. sobre a superfície de resina acrílica, após 48h para os grupos ChNP CIM x 4) e NaOCl Para o período de 5 dias, ChNP CIM x 4 apresentou redução de UFC (2,0 x 105 UFC/mL) quando comparada ao controle de crescimento (7,5 x 105 UFC/mL), entretanto, o NaOCl apresentou a maior redução UFC (3,0 x 104 UFC/mL) quando comparado as outras soluções. Com relação a alteração de superfície, apenas NaOCl apresentou aumento de Ra significante no período de 5 dias, enquanto todos os grupos apresentaram diminuição significante nos valores VHN, sendo a maior redução VNN para o grupo NaOCl. Conclusão e benefícios esperados: A solução de nanopartículas de quitosana apresentou atividade antifúngica no biofilme maduro de C. albicans e atividade anti-biofilme de Candida spp. sobre resina acrílica, causando mínimas alterações de superfície no material, apresentando assim elevado potencial de uso como agente de desinfecção para próteses dentárias.