Valor diagnostico de paineis de PCR em tempo-real para detectar a prevalência de agentes etiológicos de diarréia em cães
| Ano de defesa: | 2014 |
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Resumo: | Orientadora : Profª Drª Simone Tostes de Oliveira Stedile |
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Gizzi, Aline Baumann da RochaStedile, Simone Tostes de OliveiraUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias2014-10-14T16:12:20Z2014-10-14T16:12:20Z2014http://hdl.handle.net/1884/36279Orientadora : Profª Drª Simone Tostes de Oliveira StedileDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa: Curitiba, 24/03/2014Inclui referênciasÁrea de concentração : Ciências veterináriasResumo: Diarréia é uma das queixas mais comuns apresentadas aos veterinários diariamente, onde muitas vezes o manejo e diagnóstico definitivo da mesma é um grande desafio, devido a sua variedade de patógenos, ausência de sinais clínicos específicos e presença concomitante de co-infecções por vírus, bactérias e protozoários. Como as doenças infecciosas e parasitárias estão entre as causas mais comuns de diarreia e os testes diagnósticos, assim como os respectivos tratamentos frequentemente variam de acordo com a etiologia da mesma, fazer esta caracterização inicial é importante. Raramente a realização de vários testes diagnósticos são realizados para identificar todas as possíveis causas da diarreia em cães. Isso pode ser em parte porque os métodos tradicionais para a identificação de infecções gastrointestinais são caros, de baixa sensibilidade diagnóstica ou lentos para produzir resultados. A falta de um diagnóstico definitivo, a falha no tratamento com diarréia persistente ou recorrente e a despesa com medicamentos ineficazes, podem levar à insatisfação do cliente, resistência medicamentosa, bem como colocar em risco a saúde do animal. O objetivo deste estudo foi o uso de um painel de PCR em tempo-real e do parasitológico de fezes para pesquisa da prevalência de patógenos e co-infecções em uma população de cães com e sem diarreia atendidos em um hospital veterinário particular. Para tanto, o trabalho foi dividido em dois capítulos, sendo o primeiro um artigo de revisão preparado para a revista Clínica Veterinária, sobre o uso do PCR em tempo-real no diagnóstico de doenças infecciosas em cães e gatos e comparação desta com outras técnicas de diagnóstico. O segundo capítulo compreende a tabulação dos resultados obtidos com as análises realizadas e confecção de um artigo submetido e aceito pelo jornal BMC Veterinary Research. As amostras de fezes foram testadas para o vírus da cinomose canina, coronavírus canino, parvovírus canino tipo 2 (CPV-2), Clostridium perfringens alfa toxina (CPA), Cryptosporidium spp., Giardia spp. e Salmonella spp. através de técnicas moleculares e a pesquisa de larvas, ovos, cistos e trofozoítos por meio do parasitológico de fezes. Do total das 104 amostras de fezes diarreicas e 43 controles, 71/104 (68.3%) dos cães com diarreia foram positivos para pelo menos um patógeno, onde destes, infecção única foi observada em 39/71 (54,9%) e coinfecção em 32/71 (45,1%), incluindo 21/32 (65,6%) dos cães com duas, 5/32 (15,6%) com três e 6/32 (18,8%) com quatro infecções. No grupo controle, 13/43 (30,2%) dos cães foram positivos, todos com infecção única. Os patógenos mais prevalentes nos cães com diarreia foram CPA (40/104 cães, 38.5%), CPV-2 (36/104 cães, 34.6%), e Giardia spp. (14/104 Cães, 13.5%). O CPV-2 foi o patógeno mais prevalentemente associado a co-infecções, principalmente com os agentes CPA, Cryptosporidium spp. e Giardia spp. Palavras-chave: Cães, Co-infecção, Prevalência, Diarreia, Painel, PCR em temporealAbstract: Diarrhea is one of the most common reasons pets are taken to the veterinary clinician daily. Definitive diagnosis and management often pose great challenges due to its variety of pathogens, absence of specific clinical signs and concomitant presence of co-infections with viruses, bacteria and protozoa. Since infectious and parasitic diseases are among the most common causes of diarrhea and diagnostic tests, as well as their treatments, often vary according to the etiology of the disease, prompt characterization is important. Rarely various diagnostic tests are performed to identify all possible causes of diarrhea in dogs. This may be partly because traditional methods for identification of gastrointestinal infections are expensive, have low diagnostic sensitivity and are time-consuming. The lack of a definitive diagnosis, failing to treat persistent or recurrent diarrhea and spending on ineffective drugs, can lead to customer dissatisfaction, drug resistance, as well as put the animal's health at risk. The aim of this study was the use of a Real-Time PCR panel and parasitological stool examination to survey prevalence of pathogens and co-infections in a population of dogs with and without diarrhea seen at a private veterinary hospital, as well as frequency in different countries. Therefore, the work was divided in two chapters, the first a review article prepared for the Clínica Veterinária journal on the use of Real-Time PCR for diagnosis of infectious diseases in dogs and cats and comparison with other diagnostic techniques. The second chapter contains a tabulation of the results obtained from the analyses, and the preparation of a paper submitted and accepted by the BMC Veterinary Research journal. Stool samples were tested for canine distemper virus, canine coronavirus, canine parvovirus type 2 (CPV-2), Clostridium perfringens alpha toxin (CPA), Cryptosporidium spp., Giardia spp. and Salmonella spp. through molecular techniques and examined for larvae, eggs, cysts and trophozoites by parasitological stool examination. Of the total of 104 samples of diarrheal stools and 43 controls, 71/104 (68.3 %) of the dogs with diarrhea were positive for at least one pathogen. For positive samples, single infection was observed in 39/71 (54.9%) and co-infection in 32/ 71 (45.1 %), including 21/32 (65.6%) dogs with two, 5/32 (15.6%) dogs with three and 6/32 (18.8%) dogs with four infections. In the control group, 13/43 (30.2 %) dogs were positive, all with single infections. The most prevalent pathogens observed in dogs with diarrhea were CPA (40/104 dogs, 38.5 %), CPV-2 (36/104 dogs, 34.6 %) and Giardia spp. (14/104 dogs, 13.5 %). CPV - 2 was the pathogen most prevalently associated with co- infections, especially associatd with CPA, Cryptosporidium spp. and Giardia spp. Keywords: Dogs, Co-infection, Prevalence, Diarrhea, Panel, Real-Time PCR.83f. : il., algumas color., tabs., grafs.application/pdfDisponível em formato digitalDissertaçõesMedicina veterináriaValor diagnostico de paineis de PCR em tempo-real para detectar a prevalência de agentes etiológicos de diarréia em cãesinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALR - D - ALINE BAUMANN DA ROCHA GIZZI.pdfapplication/pdf3903728https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/36279/1/R%20-%20D%20-%20ALINE%20BAUMANN%20DA%20ROCHA%20GIZZI.pdf82063ef1cc7f5f4ff4a3cf38cf5d22a6MD51open accessTEXTR - D - ALINE BAUMANN DA ROCHA GIZZI.pdf.txtR - D - ALINE BAUMANN DA ROCHA GIZZI.pdf.txtExtracted Texttext/plain130777https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/36279/2/R%20-%20D%20-%20ALINE%20BAUMANN%20DA%20ROCHA%20GIZZI.pdf.txta51555d48a162461e02c297b592a9cb1MD52open accessTHUMBNAILR - D - ALINE BAUMANN DA ROCHA GIZZI.pdf.jpgR - D - ALINE BAUMANN DA ROCHA GIZZI.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1215https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/36279/3/R%20-%20D%20-%20ALINE%20BAUMANN%20DA%20ROCHA%20GIZZI.pdf.jpg0f3238e91eda62c35af9240eeedbf79cMD53open access1884/362792016-04-13 03:04:46.247open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/36279Repositório InstitucionalPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestinformacaodigital@ufpr.bropendoar:3082016-04-13T06:04:46Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false |
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