Estudo do potencial do peptídeo antimicrobiano ocelatina-Pt7 em permeabilizar membranas biomiméticas

• Ano de defesa: 2018
• Autor(a) principal: Carvalho, Elizangela de Almeida [UNIFESP]
• Orientador(a): Daghastanli, Katia Regina Perez [UNIFESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
• Palavras-chave em Português: Peptídeos antimicrobianos; Membranas miméticas; Interação peptídeo lípido
• Palavras-chave em Inglês: Antimicrobial peptides; Membrane membranes; Peptide lipid interaction
• Link de acesso: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=6514047; https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/53042

Introdução: Peptídeos antimicrobianos têm sido uma alternativa promissora aos antibióticos para tratar infecções microbianas, e estão sendo de particular importância nos estudos dos últimos anos, uma vez que algumas bactérias têm apresentado resistência a alguns antibióticos. Objetivo: Avaliar o potencial da ocelatinaPT7, um peptídeo isolado da secreção da pele de um sapo brasileiro Leptodactylus pustulatus, em permear vesículas unilamelares. Métodos: As vesículas unilamelares grandes foram feitas de 1palmitoil2oleoilfosfatidilcolina, 1palmitoil2oleoilfosfatidilglicerol e colesterol nas proporções 1:0:0, 0:1:0, 1:1:0, 3:3:4 e 6:0:4, mol:mol:mol. A interação da ocelatinaPT7 com as membranas, foi investigada por Cinética de vazamento da carboxifluoresceína, Calorimetria de titulação isotérmica, Microscopia óptica para o estudo de vesículas unilamelares gigantes, Espalhamento de luz dinâmico, Potencial Zeta e Calorimetria Diferencial de Varredura. Resultados: A interação da ocelatinaPT7 foi maior em vesículas compostas por 1palmitoil2oleoilfosfatidilglicerol do que para as vesículas de 1palmitoil2oleoilfosfatidilcolina, enquanto que em membranas eletricamente neutras contendo Colesterol foi quase nula. As entalpias de ligação, dada pela interação peptídeo:lipídio, foram todas predominantemente exotérmica independentemente da composição lipídica, e foram ainda maiores para membranas contendo carga negativa. A ocelatinaPT7 apresentou estrutura secundária definida apenas para membranas contendo carga negativa. Por fim, na presença do peptídeo, a perda de contraste na microscopia óptica só foi observada para as membranas neutras, pois para vesículas contendo 1palmitoil2oleoilfosfatidilglicerol as vesículas se romperam como se estivessem na presença de um detergente. Conclusão: Os resultados em conjunto indicam que a permeabilidade do peptídeo, a conformação estrutural adquirida, a entalpia de ligação e seu mecanismo de ação são dependentes da composição lipídica da membrana e que ocelatinaPT7 tem potencial como peptídeo antimicrobiano, pois apresenta seletividade por membranas miméticas de bactéria.