Modulação da autofagia pelo tetrandrine via TFEB no hepatocarcinoma celular humano

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Sperandio, Letícia Paulino [UNIFESP]
• Orientador(a): Pereira, Gustavo José da Silva [UNIFESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/001300001nh6z
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo
• Palavras-chave em Português: Hepatocarcinoma celular humano; Autofagia; Tetrandrine; TFEB
• Link de acesso: https://hdl.handle.net/11600/72859

O hepatocarcinoma celular humano (HCC) é uma neoplasia primária do fígado que se origina em hepatócitos causados por infecções pelo vírus da hepatite B e C, que são as principais causas etiológicas do HCC, seja por carcinogênese ou cirrose. O fígado é um órgão que apresenta múltiplas funções importantes para a homeostase celular e funcionamento do organismo como um todo. A autofagia é um dos mecanismos fisiológicos importantes para a homeostasia celular, e, nos hepatócitos, encontra-se em níveis aumentados devido a intensa atividade metabólica e alta demanda de energia. No entanto, a autofagia no câncer pode apresentar um papel duplo no hepatocarcinoma, com mecanismos supressores de tumor ou promotores da tumorigênese. Uma das vias chave em resposta à privação de nutrientes e ação de quimioterápicos é a translocação para o núcleo dos fatores de transcrição TFEB e TFE3 (TFEB/3) que potencializam a autofagia e a biogênese lisossomal. O Tetrandrine é um composto com potencial farmacológico importante na terapêutica contra o câncer, uma vez que muitos trabalhos discutem sua capacidade de modular a autofagia seja na indução ou bloqueio da autofagia de forma tempo dependente. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi investigar os mecanismos de modulação da autofagia pelo tetrandrine via TFEB em células HeLa e em modelo celular de HCC (HuH-7). Para tanto foram avaliados o fluxo autofágico e proteínas de sinalização celular pelo método de Western blotting, a translocação do TFEB e TFE3 por imunofluorescência, e espécies reativas de oxigênio (EROs) por citometria de fluxo. Os resultados demonstraram que o tetrandrine induziu a sensibilização celular pelo bloqueio do fluxo autofágico sugerindo ser de forma independente da atividade da mTORC1 e dependente da translocação nuclear do TFEB e TFE3. Quando associado ao sorafenibe, o tetrandrine modulou a sinalização de MCL-1 e fosforilação da ERK1/2, sendo que a translocação nuclear do TFEB não ocorreu de forma dependente da produção de EROs. Esses resultados sugeriram que o tetrandrine induziu bloqueio do fluxo autofágico via TFEB e TFE3, independente de mTORC1 e produção de EROs em células HuH-7 e de adenocarcinoma celular humano (HeLa), demonstrando que o tetrandrine pode ter um possível papel adjuvante no tratamento contra o câncer.