Análise da influência do extrato EPs®7630 de Pelargonium sidoides na atividade tumoricida de linfócitos citotóxicos contra células Jurkat
| Ano de defesa: | 2024 |
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Universidade Federal do Triângulo Mineiro
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Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde
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Resumo: | A resposta imune, sobretudo àquela relacionada aos linfócitos T CD8 e células NK, é essencial para combater células tumorais. Estudos recentes destacam o papel de fitoterápicos no tratamento complementar em neoplasias, sendo o extrato de Pelargonium sidoides um exemplo promissor, com propriedades imunomoduladoras. Os estudos sobre o potencial citotóxico e antineoplásico dos linfócitos tratados com P. sidoides são escassos na literatura. Nesse sentido, o presente estudo buscou analisar o efeito de Pelargonium sidoides (extrato EPs® 7630) sobre a capacidade de linfócitos citotóxicos eliminar in vitro células tumorais de origem hematológica, bem como realizar o screening fitoquímico do extrato, e determinar o IC50 em células de linhagem tumoral Jurkat e PBMCs. Foi realizada a análise qualitativa metabólitos em extrato etanólico comercial das raízes de Pelargonium sidoides (EPs® 7630) Kaloba ®. Para a determinação do IC50 foi avaliado o tratamento por 24 horas nas concentrações 40, 400, 4.000, 40.000 e 400.000 μg/mL. A quantificação da morte celular foi realizada por citometria de fluxo com a marcação de 7-amino-actinomicina D (7-AAD). Células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de indivíduos saudáveis e da linhagem tumoral Jurkat foram cultivadas e expostas a diferentes tempos e concentrações do extrato EPs® 7630 para avaliar a citotoxicidade. A quantificação de morte também foi realizada pela marcação com 7-AAD, identificada por citometria de fluxo. Os resultados do estudo mostraram que o extrato EPs® 7630, obtido das raízes de Pelargonium sidoides, contém uma variedade de metabólitos secundários como cumarinas, fenois, flavonoides, flavonas e flavanonas. As PBMCs apresentaram um IC50 de 60.470 μg/mL e a linhagem tumoral Jurkat, 63.700 μg/mL do extrato. No experimento em que PBMCs tratados por 24 horas com EPs® 7630, houve maior percentual de morte de células Jurkat pelas células tratadas com 100 μg/mL, comparado às células não tratadas e àquelas tratadas com 10 μg/mL. O tratamento nas concentrações de 50 μg/mL e 100 μg/mL promoveu maior morte de células tumorais em relação ao grupo não tratado no ensaio por 4 horas em tratamento concomitante. Quanto à co-cultura por 6 horas, observou-se que houve maior percentual de morte de células Jurkat naquelas tratadas com EPs® 7630 tanto na proporção 10:1, quanto 30:1. Os resultados aqui apresentados sobre a potencialização da capacidade antitumoral de PBMCs pelo extrato EPs® 7630 de P. sidoides, estabelecem uma nova compreensão sobre a viabilidade da utilização do fármaco como terapia complementar às neoplasias. |
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Nesse sentido, o presente estudo buscou analisar o efeito de Pelargonium sidoides (extrato EPs® 7630) sobre a capacidade de linfócitos citotóxicos eliminar in vitro células tumorais de origem hematológica, bem como realizar o screening fitoquímico do extrato, e determinar o IC50 em células de linhagem tumoral Jurkat e PBMCs. Foi realizada a análise qualitativa metabólitos em extrato etanólico comercial das raízes de Pelargonium sidoides (EPs® 7630) Kaloba ®. Para a determinação do IC50 foi avaliado o tratamento por 24 horas nas concentrações 40, 400, 4.000, 40.000 e 400.000 μg/mL. A quantificação da morte celular foi realizada por citometria de fluxo com a marcação de 7-amino-actinomicina D (7-AAD). Células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de indivíduos saudáveis e da linhagem tumoral Jurkat foram cultivadas e expostas a diferentes tempos e concentrações do extrato EPs® 7630 para avaliar a citotoxicidade. A quantificação de morte também foi realizada pela marcação com 7-AAD, identificada por citometria de fluxo. Os resultados do estudo mostraram que o extrato EPs® 7630, obtido das raízes de Pelargonium sidoides, contém uma variedade de metabólitos secundários como cumarinas, fenois, flavonoides, flavonas e flavanonas. As PBMCs apresentaram um IC50 de 60.470 μg/mL e a linhagem tumoral Jurkat, 63.700 μg/mL do extrato. No experimento em que PBMCs tratados por 24 horas com EPs® 7630, houve maior percentual de morte de células Jurkat pelas células tratadas com 100 μg/mL, comparado às células não tratadas e àquelas tratadas com 10 μg/mL. O tratamento nas concentrações de 50 μg/mL e 100 μg/mL promoveu maior morte de células tumorais em relação ao grupo não tratado no ensaio por 4 horas em tratamento concomitante. Quanto à co-cultura por 6 horas, observou-se que houve maior percentual de morte de células Jurkat naquelas tratadas com EPs® 7630 tanto na proporção 10:1, quanto 30:1. Os resultados aqui apresentados sobre a potencialização da capacidade antitumoral de PBMCs pelo extrato EPs® 7630 de P. sidoides, estabelecem uma nova compreensão sobre a viabilidade da utilização do fármaco como terapia complementar às neoplasias.The immune response, especially that related to CD8 T lymphocytes and NK cells, is essential to combat tumor cells. Recent studies highlight the role of phytotherapeutics in the complementary treatment of neoplasms, with Pelargonium sidoides (P. sidoides) extract being a promising example, with immunomodulatory properties. Studies on the cytotoxic and antineoplastic potential of lymphocytes treated with P. sidoides are scarce in the literature. In this sense, the present study sought to analyze the effect of P. sidoides (EPs® 7630 extract) on the capacity of cytotoxic lymphocytes to eliminate tumor cells of hematologic origin in vitro, as well as to perform phytochemical screening of the extract and determine the IC50 in Jurkat tumor cell line and PBMCs. Qualitative analysis of metabolites was performed on a commercial ethanolic extract of the roots of P. sidoides (EPs® 7630) Kaloba®. To determine the IC50, treatment for 24 hours at concentrations of 40, 400, 4,000, 40,000 and 400,000 μg/mL was evaluated. Cell death was quantified by flow cytometry with 7-amino-actinomycin D (7-AAD) labeling. Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from healthy individuals and the Jurkat tumor cell line were cultured and exposed to different times and concentrations of the EPs® 7630 extract to evaluate cytotoxicity. Death was also quantified by 7-AAD labeling, identified by flow cytometry. The results of the study showed that the EPs® 7630 extract, obtained from the roots of Pelargonium sidoides, contains a variety of secondary metabolites such as coumarins, phenols, flavonoids, flavones and flavanones. PBMCs presented an IC50 of 60,470 μg/mL and the Jurkat tumor cell line, 63,700 μg/mL of the extract. In the experiment in which PBMCs were treated for 24 hours with EPs® 7630, there was a higher percentage of Jurkat cell death by cells treated with 100 μg/mL, compared to untreated cells and those treated with 10 μg/mL. Treatment at concentrations of 50 μg/mL and 100 μg/mL promoted greater tumor cell death compared to the untreated group in the assay for 4 hours in concomitant treatment. Regarding the co-culture for 6 hours, it was observed that there was a higher percentage of death of Jurkat cells in those treated with EPs® 7630 in both the 10:1 and 30:1 ratio. The results presented here regarding the enhancement of the antitumor capacity of PBMCs by the EPs® 7630 extract of P. sidoides provide new insights into the potential of using this drug as a complementary therapy for neoplasms.porUniversidade Federal do Triângulo MineiroPrograma de Pós-Graduação em Ciências da SaúdeUFTMBrasilInstituto de Ciências da Saúde - ICS::Programa de Pós-Graduação em Ciências da SaúdeCNPQ::CIENCIAS DA SAUDENeoplasias hematológicas.Fitoterapia.Pelargonium sidoides.EPs® 7630.Citotoxicidade.Imunomodulação.Hematologic neoplasms.Phytotherapy.Pelargonium sidoides.EPs® 7630.Cytotoxicity.Immunomodulation.Análise da influência do extrato EPs®7630 de Pelargonium sidoides na atividade tumoricida de linfócitos citotóxicos contra células Jurkatinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFTMinstname:Universidade Federal do Triangulo Mineiro (UFTM)instacron:UFTMORIGINALDissert Lorrayne R Soares.pdfDissert Lorrayne R Soares.pdfDissert Lorrayne R Soaresapplication/pdf7456297http://bdtd.uftm.edu.br/bitstream/123456789/2017/1/Dissert%20Lorrayne%20R%20Soares.pdfd23ad435243fc24ff233e48ae5028fa4MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81748http://bdtd.uftm.edu.br/bitstream/123456789/2017/2/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD52TEXTDissert Lorrayne R Soares.pdf.txtDissert Lorrayne R Soares.pdf.txtExtracted texttext/plain90584http://bdtd.uftm.edu.br/bitstream/123456789/2017/3/Dissert%20Lorrayne%20R%20Soares.pdf.txt2d7bd0b0a648b5079875b94c3d289e38MD53THUMBNAILDissert Lorrayne R Soares.pdf.jpgDissert Lorrayne R Soares.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1177http://bdtd.uftm.edu.br/bitstream/123456789/2017/4/Dissert%20Lorrayne%20R%20Soares.pdf.jpg422b5d64c25d3542c258cdbdd3ff442bMD54123456789/20172025-08-12 23:02:39.941oai:bdtd.uftm.edu.br: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Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://bdtd.uftm.edu.br/PUBhttp://bdtd.uftm.edu.br/oai/requestbdtd@uftm.edu.br||bdtd@uftm.edu.bropendoar:2025-08-13T02:02:39Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFTM - Universidade Federal do Triangulo Mineiro (UFTM)false |
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Análise da influência do extrato EPs®7630 de Pelargonium sidoides na atividade tumoricida de linfócitos citotóxicos contra células Jurkat SOARES, Lorrayne Rodarte CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE Neoplasias hematológicas. Fitoterapia. Pelargonium sidoides. EPs® 7630. Citotoxicidade. Imunomodulação. Hematologic neoplasms. Phytotherapy. Pelargonium sidoides. EPs® 7630. Cytotoxicity. Immunomodulation. |
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