Estudo dos efeitos farmacologicos do veneno de Micrurus pyrrhocryptus sobre a junção neuromuscular e de sua neutralização pelo antiveneno especifico e comercial

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2010
Autor(a) principal: Camargo, Thiago Magalhães
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: [s.n.]
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Agentes neurotoxicos
Bloqueadores neuromusculares
Nervo frênico
Neurotoxins
Neuromuscular blocking agents
Phrenic nerve
Link de acesso: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1611565
Resumo: Orientador: Lea Rodrigues Simioni
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spelling Estudo dos efeitos farmacologicos do veneno de Micrurus pyrrhocryptus sobre a junção neuromuscular e de sua neutralização pelo antiveneno especifico e comercialPharmacological study of Micrurus pyrrhocryptus venom on neuromuscular transmission and its neutralization by specific and commercial coral snake antivenomAgentes neurotoxicosBloqueadores neuromuscularesNervo frênicoNeurotoxinsNeuromuscular blocking agentsPhrenic nerveOrientador: Lea Rodrigues SimioniDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias MedicasResumo: A espécie Micrurus pyrrhocryptus, classificada anteriormente como subespécie da Micrurus frontalis, foi recentemente classificada como espécie plena baseada nas diferenças morfológicas. Esta serpente é especialmente encontrada no continente Sul Americano. No presente trabalho foram analisados os efeitos farmacológicos do veneno de M. pyrrhocryptus sob métodos para caracterização de efeitos neurotóxico e miotóxico em preparações biventer cervicis de pintainho (BCP) (0,5, 1, 5, 10, 20, 30 e 50 µg/mL, n=6 para cada concentração) e nervo frênicodiafragma de camundongo (NFD) (1, 5, 10, 20, 30 e 50 µg/mL, n=6 para cada concentração). Também foram realizados estudos sobre a capacidade de neutralização do antiveneno específico e comercial. O veneno induziu um irreversível bloqueio neuromuscular (pós-sináptico, como demonstrado pela resposta contrátil sob estímulo de alta frequência - 50 Hz, n=6 em NFD), tempo e concentração-dependente em ambas as preparações (10 µg/mL induziu 50% de bloqueio neuromuscular em 22±3 min vs 62±4 min em BCP e NFD respectivamente, n=6 para cada preparação); as contraturas em resposta a adição exógena de KCl (20 mM) não foram afetadas significativamente depois da incubação com o veneno, bem como, a determinação da atividade de CK quando comparados com os valores controle (25,8±1,75 U/L vs 24,3±2,2 U/L) ou também com o registro da resposta contrátil em preparações curarizadas (n=6). O veneno apresentou um baixo valor de atividade fosfolipásica quando comparado com o veneno de Crotalus durissus terrificus em 37ºC. Nos testes de neutralização, os antivenenos específico e comercial foram eficientes, contra o efeito bloqueador neuromuscular induzido pelo veneno, quando usados na concentração recomendada pelo fabricante (1,5 mg de veneno para 1,0 mL de antiveneno). A análise histológica mostrou apenas uma discreta alteração mesmo quando usado em alta concentração (50 µg/mL - n=5; 3,5±0,8% em mamífero e 4,3±1,5% em ave vs 1,2±0,5% em mamífero e 1,1±0,7% em ave do controle, ambos p<0,05 em relação ao controle), corroborando com as características de outros venenos de Micrurus. A razão da potência do veneno vs sensibilidade de receptores colinérgicos presentes no sítio extra juncional da preparação do músculo biventer, foi demonstrada quando usado em baixa concentração (0,5 µg/mL) aboliu totalmente em 30 min a contratura induzida pela adição ACh exógena (110 µM). O conjunto dos resultados indica que o veneno de M. pyrrhocryptus causa bloqueio pós-sináptico envolvendo os receptores nicotínicos, como as ?- neurotoxinas, sem determinar alteração significativa na membrana da fibra muscularAbstract: Micrurus pyrrhocryptus, originally known as a Micrurus frontalis subspecies, was recently classified as a species based on selected morphological features. It can be found in the South America. Only two studies are apparently available on its venom effects. Herein, pharmacological approaches were used to characterize the neurotoxic and myotoxic effects of M. pyrrhocryptus venom in chick biventer cervicis (BC, 0.5, 1, 5, 10 and 50 µg/mL, n=6 for each concentration) and mouse phrenic nerve-diaphragm preparations (NFD, 1, 5, 10 and 50 µg/mL, n=6 for each concentration). In addition, studies on neutralization capacity of specific and commercial antivenom were performed. The venom induced an irreversible, time and concentrationdependent neuromuscular blockade (postsynaptic, as demonstrated by the high frequency twitch tension response - 50Hz, n=6 in NFD) in both preparations (10 µg/mL induced 50% neuromuscular blockade in 22±3 min vs 62±4 min in BC and NFD respectively, n=6 for each preparation); the contractures in response to exogenous KCl (20 mM) were not significant after venom incubation as well as the value of CK released when compared with control values (25.8±1.75 U/L vs 24.3±2.2 U/L) or also twitch tension record in curarized preparations (n=6). The venom showed a very low PLA2 activity when compared with c. d. terrificus venom at 37ºC. In neutralization test the specific and Brazilian commercial antielapidic serum were efficient when used in concentration recommended by the producer (1.5 of venom to 1.0 mL of antivenom). The histological analysis showed a mild myotoxic effect, even using high venom concentration (50 µg/mL - n=5, 3.5±0.8% in mammalian and 4.3±1.5% on avian vs 1.2±0.5% in mammalian and 1.1±0.7% in avian of control), corroborating characteristics of other Micrurus venoms). The ratio venom potency vs preparation sensitivity was shown when a concentration as low as 0.5 µg/mL totally abolished within only 30 min the contracture induced by the exogenously added ACh (110µM) to chick preparation. Altogether the results indicate that M. pyrrhocryptus venom has a postsynaptic blocking effect involving nicotinic receptors as does the ?-neurotoxins, and without any significant myotoxic effectMestradoMestre em Farmacologia[s.n.]Simioni, Lea Rodrigues, 1942-Moura, Priscila Randazzo deBraga, Angélica de Fátima de AssunçãoUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em FarmacologiaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASCamargo, Thiago Magalhães2010info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf76 f. : il.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1611565CAMARGO, Thiago Magalhães. Estudo dos efeitos farmacologicos do veneno de Micrurus pyrrhocryptus sobre a junção neuromuscular e de sua neutralização pelo antiveneno especifico e comercial. 2010. 76 f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1611565. 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