Uso de astaxantina em cultivo in vitro de embriões bovinos e efeitos na criopreservação

• Ano de defesa: 2023
• Autor(a) principal: Aidar, Fernanda Said [UNESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: eng
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Astaxanthin; Reactive oxygen species; Cryoprotectants; Carotenoids
• Link de acesso: https://hdl.handle.net/11449/251330; https://wwws.cnpq.br/cvlattesweb/PKG_MENU.menu?f_cod=FFB16C0B317E29ECCF598892A2DC3426; https://orcid.org/0000-0001-6117-2883

O objetivo deste trabalho é avaliar se a adição de astaxantina (AST) ao meio de cultivo in vitro (CIV) pode exercer efeitos positivos em embriões bovinos após vitrificação. A AST é um carotenoide com altas propriedades antioxidantes, devido a uma estrutura molecular única contendo igações duplas conjugadas e grupos hidroxila (–OH) e ceto (C=O), que contribuem para eliminar EROs e bloquear a peroxidação lipídica (LPO). Os presumíveis zigotos foram atribuídos 22 horas após a fertilização in vitro em um dos seguintes tratamentos: G-CONT) Controle, G-DMSO) dimetilsulfóxido (1 μl de DMSO / 999 μl de meio CIV), G-AST 0,8) 0,8 nM de AST, G- AST 3) 3 nM de AST e G-AST 13) 13 nM de AST. Apenas blastocistos expandidos (BX) grau I no 7º dia de desenvolvimento foram vitrificados (n = 92, 95, 86, 99 e 95/grupo, respectivamente). Os embriões foram avaliados a fresco e vitrificados quanto à taxa de eclosão e reexpansão, viabilidade celular incluindo número total de células e apoptose pelo teste TUNEL, além dos níveis lipídicos de peroxidação dos meios de cultura com substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). Nossos resultados mostraram que não houve diferença devido à suplementação de AST na formação de blastocistos no D7. Entretanto, a adição de 0,8, 3 e 13 nM de AST ao meio CIV aumentou a taxa de expansão dos blastocistos após 24 h nos grupos G-AST 0,8 (100A(100-100)); G-AST 3 (98A(100-100)); G-AST 13 (100A(100-100)) quando comparado ao G-CONT (93B(100-100)) e G-DMSO (94,3B(100-100)) e 48 h de cultura G-AST 0,8 (100A( 100-100)); G-AST 13 (100A(100-100)) quando comparado ao G-CONT (91,3B(83,3-100)); G-DMSO (92,4B(80-100)); G-AST 3 (95,5AB(100-100)), independente se o embrião era fresco ou vitrificado. A porcentagem de células apoptóticas nos embriões após vitrificação/aquecimento foi maior no G-AST 0,8 (17,9A(13,5-21,4)); (p<0,05) comparado ao G-DMSO 9,7B(8,1-10,7) e G-AST 3 (11,1B (10,0-12,8); (p<0,05). TBARS não mostrou efeito da astaxantina sob a LPO quando adicionada ao meio da CIV, não houve diferenças entre os grupos para os embriões do G-CONT no 7º dia de estágio de desenvolvimento (p > 0,05 ). Em conclusão, a suplementação com AST no meio de cultivo controlou parcialmente os efeitos da scrioinjúrias nos embriões vitrificados, levando à formação de blastocistos com uma taxa comparativamente aumentada de embriões BX após procedimentos de aquecimento. Tomados em conjunto, este estudo fornece novas perspectivas na compreensão de como a AST poderia melhorar a competência de desenvolvimento de embriões bovinos vitrificados.