Investigação dos efeitos celulares, moleculares e clínicos da metformina em neoplasias mieloproliferativas com ativação da via JAK/STAT

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Fonseca, Natasha Peixoto
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: CSF3R T618I; JAK2 V617F; JAK/STAT; Metformin; Metformina; Myeloproliferative neoplasms; Neoplasias mieloproliferativas
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17154/tde-26052025-105114/

As neoplasias mieloproliferativas (NMP) são doenças clonais derivadas das células-tronco hematopoéticas que causam um aumento desordenado na produção de células sanguíneas da linhagem mieloide. A leucemia neutrofílica crônica (LNC) é uma NMP marcada pela mutação CSF3RT618I, que ativa a via JAK/STAT. NMP clássicas, como a mielofibrose primária (MFP), ativam a via JAK/STAT devido a mutações em JAK2, CALR e MPL, sendo a mutação JAK2V617F a mais frequente. O ruxolitinibe, inibidor de JAK1/2, apresenta eficácia comprovada para mielofibrose, e seu efeito antineoplásico vem sendo avaliado na LNC. Entretanto, ruxolitinibe não está disponível para pacientes do Sistema Único de Saúde (SUS) devido seu alto custo. Diante disso, a busca por novas alternativas terapêuticas para NMP é essencial. A metformina, utilizada no tratamento de diabetes mellitus tipo 2, tem se mostrado promissora como agente antineoplásico em modelos de NMP. Nosso grupo de pesquisa demonstrou seus benefícios em modelos pré-clínicos: redução da viabilidade celular, inibição da via JAK/STAT e da atividade mitocondrial in vitro em células JAK2V617F, e redução de esplenomegalia in vivo em modelos murinos. O objetivo desta pesquisa foi avaliar os efeitos celulares, moleculares e clínicos da metformina em modelos de NMP com ativação em JAK/STAT. Os efeitos da metformina foram avaliados em três modelos biológicos: modelos pré-clínicos in vitro e in vivo de LNC CSF3RT618I; modelos pré-clínicos in vitro em células primárias de pacientes com NMP; e estudo clínico com pacientes com mielofibrose tratados com metformina por 6 meses (METFORMF). Nos modelos pré-clínicos de LNC CSF3RT618I, observou-se redução na viabilidade celular e aumento de apoptose de forma dose-dependente, mediada pela regulação negativa das vias de sinalização STAT3 e MAPK por ativação da AMPK. In vivo, o tratamento com metformina reduziu a carga tumoral em camundongos transplantados com células Ba/F3 CSF3RT618I após 9 dias, com perda de resposta nos dias posteriores. Em células primárias de um paciente com LNC CSF3RT618I, a metformina aumentou a apoptose e reduziu a formação de colônias hematopoéticas ex vivo. A análise proteômica revelou inibição de processos metabólicos. Em células primárias de pacientes com NMP, a combinação de metformina com ruxolitinibe induziu apoptose e diminuiu o potencial de membrana mitocondrial nas células CD34+ de pacientes com mielofibrose. A análise do metabolismo celular indicou que células CD34+ dependem mais da fosforilação oxidativa para geração de energia, processo biológico que foi inibido pela metformina. Foi observada uma diminuição da resposta à combinação em células CD34+ CD36+ (transportador de ácidos graxos), indicando uma possível população de células resistentes ao tratamento. No estudo clínico METFORMF, oito pacientes com mielofibrose foram tratados com metformina por 6 meses. Um paciente atingiu o desfecho primário, com redução do volume do baço ≥ 35%, e apresentou desfechos secundários de melhora da fibrose de grau 3 para grau 1 e melhora nos parâmetros hematológicos. A metformina oral reduziu a formação de colônias hematopoéticas em quatro dos cinco pacientes avaliados. Esses resultados, em conjunto, reforçam o potencial antineoplásico da metformina e indicam o reposicionamento da metformina no tratamento da LNC e mielofibrose como uma opção terapêutica viável.