Avaliação da melanina como fator de proteção para preservação de Cryptococcus neoformans na Coleção de Fungos Patogênicos INI/Fiocruz

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2015
Autor(a) principal: Elias, Mônica dos Santos
Orientador(a): Lazéra, Márcia dos Santos, Wanke, Bodo
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Link de acesso: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/25123
Resumo: Coleções de Cultura devem garantir a viabilidade dos micro-organismos por períodos prolongados de tempo, além de minimizar os riscos de contaminação e alterações fenotípicas e genéticas. Os métodos mais utilizados para a preservação de leveduras são a liofilização e criopreservação à -70°C. Entretanto, há relatos mencionando possíveis mudanças, antes e após o processo de liofilização, nas características morfológicas e por consequência na viabilidade do fungo. Face ao papel protetor celular reconhecido da melanina, consideramos de interesse incluir uma variação da metodologia utilizando meio indutor da produção deste pigmento com o objetivo de determinar metodologias mais eficazes a serem aplicadas na Coleção de Fungos Patogênicos do INI/FIOCRUZ tendo como alvo inicial C. neoformans, não só pela importância deste agente de micose sistêmica, mas também pelo grande número de isolados preservados nesta coleção. Para tal, foi analisado o crescimento de 31 cepas de C. neoformans com produção de melanina, usando Ágar Semente de Níger (ASN) e Meio Mínimo com L-Dopa (MM) em isolados preservados pelos métodos de liofilização e de criopreservação a -70°C; além do crescimento sem produção de melanina, usando Ágar Sabouraud 2% (SAB2%). Os resultados indicam que após três meses de preservação a presença de melanina protege as células de C. neoformans na criopreservação -70°C e liofilização, demonstrando seu potencial para uso em metodologias de preservação deste agente
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Face ao papel protetor celular reconhecido da melanina, consideramos de interesse incluir uma variação da metodologia utilizando meio indutor da produção deste pigmento com o objetivo de determinar metodologias mais eficazes a serem aplicadas na Coleção de Fungos Patogênicos do INI/FIOCRUZ tendo como alvo inicial C. neoformans, não só pela importância deste agente de micose sistêmica, mas também pelo grande número de isolados preservados nesta coleção. Para tal, foi analisado o crescimento de 31 cepas de C. neoformans com produção de melanina, usando Ágar Semente de Níger (ASN) e Meio Mínimo com L-Dopa (MM) em isolados preservados pelos métodos de liofilização e de criopreservação a -70°C; além do crescimento sem produção de melanina, usando Ágar Sabouraud 2% (SAB2%). Os resultados indicam que após três meses de preservação a presença de melanina protege as células de C. neoformans na criopreservação -70°C e liofilização, demonstrando seu potencial para uso em metodologias de preservação deste agenteCulture Collections must ensure the viability of microorganisms for long period of time while minimizing the risk of contamination and phenotypic and genetic changes. The most widely used methods for preserving yeasts are lyophilization and cryopreservation at -70 ° C. However, there are reports indicating potential morphological and viability changes before and after the lyophilization process. It is known the protective role of melanin in Cryptococcus neoformans, therefore we consider of interest to include a new methodology using culture media which can induce melanin production, in order to determine the most effective methodologies to be applied in the Culture Collection of Pathogenic Fungi (INI / FIOCRUZ), initially targeting C. neoformans, not only because the importance of this systemic mycosis agent but also by the large number of isolates preserved in this collection. For this, the growth of 31 strains of C. neoformans with melanin production was analyzed using seed agar niger (ASN) and Minimum Medium with L-Dopa (MM) in isolates preserved by freeze-drying at -70 ° C and cryopreservation methods. The results indicate that after three months of preservation the presence of melanin protects the cells of C. neoformans in cryopreservation at -70 ° C and lyophilization, comparing to the growth without melanin on Sabouraud medium, showing its potential for the use as preservation methods of this agent in Culture CollectionsFundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.porCryptococcus NeoformansCriopreservaçãoLiofilizaçãoMelaninasAvaliação da melanina como fator de proteção para preservação de Cryptococcus neoformans na Coleção de Fungos Patogênicos INI/Fiocruzinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2015Instituto Nacional de Infectologia Evandro ChagasFundação Oswaldo CruzRio de JaneiroPrograma de Pós-Graduação em Pesquisa Clínica em Doenças Infecciosasinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/25123/1/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD51ORIGINALmonica_elias_ini_mest_2015.pdfapplication/pdf1279836https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/25123/2/monica_elias_ini_mest_2015.pdf2d4e0c1bcf302d77446da9233a090b00MD52TEXTmonica_elias_ini_mest_2015.pdf.txtmonica_elias_ini_mest_2015.pdf.txtExtracted texttext/plain114597https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/25123/3/monica_elias_ini_mest_2015.pdf.txt98be9ba4df5b44f61657626623379a7bMD53icict/251232023-02-23 10:30:29.334oai:www.arca.fiocruz.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352023-02-23T13:30:29Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false
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