Avaliação da interação entre neutrófilos humanos infectados por Leishmania amazonensis ou Leishmania braziliensis com células dendríticas: impacto dos receptores de adenosina
Ano de defesa: | 2019 |
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Resumo: | INTRODUÇÃO: Os neutrófilos (NØs) modulam a resposta imune pela produção de citocinas e quimiocinas ou interação direta com outras células. Células dendríticas (DCs) apresentam antígenos e ao interagirem com diferentes componentes do sistema imune, modulam a resposta adaptativa, responsável pela eliminação de microrganismos e manutenção da memória imunológica. O ATP extracelular produzido após dano celular exibe propriedades pró-inflamatórias, enquanto a adenosina, produto do catabolismo do ATP, exibe propriedades antiinflamatórias. Neste trabalho, avaliamos o efeito da interação entre DCs humanas e NØs infectados por L. braziliensis (Lb) ou L. amazonensis (La) e a participação dos receptores de adenosina. METODOLOGIA: NØs purificados do sangue de doadores saudáveis foram infectados ou não por Lb ou La e co-cultivados com DCs geradas in vitro de monócitos tratados com IL-4 / GM-CSF. As DCs nestas co-culturas foram avaliadas quanto sua taxa de infecção, expressão de moléculas de superfície e produção de citocinas. Para investigar a participação da adenosina, a carga parasitária nestas células foi avaliada após inibição de CD39, CD73 ou receptores A2A e A2B. RESULTADOS: O co-cultivo de DCs com NØs infectados com La aumentou a carga parasitária, reduziu a expressão de moléculas de superfície e a produção de IL-12 (pró-inflamatória) e aumentou a produção de IL-10 (antiinflamatória). Resultados opostos foram obtidos nas co-culturas de DCs e Nϕs infectados por Lb. O bloqueio do CD39, mas não do CD73, em NØs ou em DCs reduziu a carga parasitária nas DCs co-cultivadas com NØs infectados por La. Já a inibição dos receptores A2B ou A2A diminui a carga parasitária após a co-cultura das DCs com NØs infectados por La ou quando cultivadas com adenosina. Este mesmo tratamento só alterou a carga parasitária em DCs cocultivadas com NØs infectados por Lb na presença da adenosina. CONCLUSÃO: Nossos resultados indicam que NØs infectados por La e Lb modulam diferentemente a ativação das DCs por influência da adensosina e seus receptores. |
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Suarez, Martha SenaSaraiva, Elvira MariaBacellar, Maria Olívia Amado RamosGrassi, Maria Fernanda RiosOliveira, Camila Indiani deCarvalho, Lucas Pedreira deBrodskyn, Cláudia IdaBrodskyn, Cláudia Ida2020-01-30T17:11:21Z2020-01-30T17:11:21Z2019SUAREZ, Martha Sena. Avaliação da interação entre neutrófilos humanos infectados por Leishmania amazonensis ou Leishmania braziliensis com células dendríticas: impacto dos receptores de adenosina. 84 f. Tese (Doutorado em Patologia Humana) – Universidade Federal da Bahia; Instituto Gonçalo Moniz, Fundação Oswaldo Cruz, Salvador, 2019.https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/39642INTRODUÇÃO: Os neutrófilos (NØs) modulam a resposta imune pela produção de citocinas e quimiocinas ou interação direta com outras células. Células dendríticas (DCs) apresentam antígenos e ao interagirem com diferentes componentes do sistema imune, modulam a resposta adaptativa, responsável pela eliminação de microrganismos e manutenção da memória imunológica. O ATP extracelular produzido após dano celular exibe propriedades pró-inflamatórias, enquanto a adenosina, produto do catabolismo do ATP, exibe propriedades antiinflamatórias. Neste trabalho, avaliamos o efeito da interação entre DCs humanas e NØs infectados por L. braziliensis (Lb) ou L. amazonensis (La) e a participação dos receptores de adenosina. METODOLOGIA: NØs purificados do sangue de doadores saudáveis foram infectados ou não por Lb ou La e co-cultivados com DCs geradas in vitro de monócitos tratados com IL-4 / GM-CSF. As DCs nestas co-culturas foram avaliadas quanto sua taxa de infecção, expressão de moléculas de superfície e produção de citocinas. Para investigar a participação da adenosina, a carga parasitária nestas células foi avaliada após inibição de CD39, CD73 ou receptores A2A e A2B. RESULTADOS: O co-cultivo de DCs com NØs infectados com La aumentou a carga parasitária, reduziu a expressão de moléculas de superfície e a produção de IL-12 (pró-inflamatória) e aumentou a produção de IL-10 (antiinflamatória). Resultados opostos foram obtidos nas co-culturas de DCs e Nϕs infectados por Lb. O bloqueio do CD39, mas não do CD73, em NØs ou em DCs reduziu a carga parasitária nas DCs co-cultivadas com NØs infectados por La. Já a inibição dos receptores A2B ou A2A diminui a carga parasitária após a co-cultura das DCs com NØs infectados por La ou quando cultivadas com adenosina. Este mesmo tratamento só alterou a carga parasitária em DCs cocultivadas com NØs infectados por Lb na presença da adenosina. CONCLUSÃO: Nossos resultados indicam que NØs infectados por La e Lb modulam diferentemente a ativação das DCs por influência da adensosina e seus receptores.INTRODUCTION: Neutrophils (NØs) modulate the immune response by cytokine and chemokine production or direct interaction with other cells. Dendritic cells (DCs) present antigens and by interacting with different components of the immune system, modulate the adaptive response, responsible for the elimination of microorganisms and maintenance of immune memory. Extracellular ATP produced after cells’ injury exhibits proinflammatory properties, while adenosine, ATP catabolism product, exhibits antiinflamatory properties. In this study, we evaluated the effect of the interaction between human DCs and neutrophils infected by L. braziliensis or L. amazonensis, and the participation of adenosine receptors. METHODOLOGY: Neutrophils purified from peripheral blood of healthy donors were infected or not with L. braziliensis or L. amazonensis and co-cultured with DCs generated in vitro with IL-4/GM-CSF. Analyzing DCs in these co-cultures we assessed their infection rate, expression of surface molecules and cytokine production. To investigate the involvement of adenosine, the parasite load on these cells was assessed following inhibition of CD39, CD73, or A2A and A2B adenosine receptors. RESULTS: DCs co-cultured with L. amazonensisinfected neutrophils showed a significant increase in parasite load, reduction on the expression of surface molecules and production of pro-inflammatory cytokines, as well as increase in anti-inflammatory cytokines production. Opposite results were obtained in the cocultures of DCs and L. braziliensis-infected neutrophils. Blocking CD39 but not CD73 on neutrophils or DCs induces a decrease in parasite load in DCs co-cultured with L. amazonensis-infected neutrophils. Additionally, inhibition of A2B or A2A adenosine receptor leads to a decrease of the parasite load after the co-culture of DCs with L. amazonensisinfected neutrophils or when these cells were cultivated with adenosine. This same treatment only altered the parasite load in DCs co-cultivated with neutrophils infected by L. braziliensis in presence of adenosine. Conclusion: Neutrophils could be an important cell in modulating the activation or inhibition of DCs and different species of Leishmania present differential behaviors in the interactions between neutrophils and DCs.O presente trabalho foi realizado com apoio da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) – Código de Financiamento 001 CNPqUniversidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.porInstituto Gonçalo MonizNeutrófilosCélulas DendríticasAdenosinaNeutrophilsDendritic CellsAdenosineAvaliação da interação entre neutrófilos humanos infectados por Leishmania amazonensis ou Leishmania braziliensis com células dendríticas: impacto dos receptores de adenosinainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesis2019Coordenação de EnsinoUniversidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina.Salvador/BAPós-Graduação em Patologia Humanainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZORIGINALMartha Sena Suarez. Avaliação da interação...2019.pdfMartha Sena Suarez. Avaliação da interação...2019.pdfapplication/pdf16204952https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/39642/2/Martha%20Sena%20Suarez.%20Avalia%c3%a7%c3%a3o%20da%20intera%c3%a7%c3%a3o...2019.pdf0094531ce274c0004595a039cba4b2d3MD52LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82991https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/39642/3/license.txt5a560609d32a3863062d77ff32785d58MD53TEXTMartha Sena Suarez. Avaliação da interação...2019.pdf.txtMartha Sena Suarez. 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