Avalia??o dos mecanismos de reparo de DNA por recombina??o em c?lulas de carcinoma epiderm?ide de boca

• Ano de defesa: 2009
• Autor(a) principal: Bohrer, Paula Luce
• Orientador(a): Silva, Vin?cius Duval da
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul
• Programa de Pós-Graduação: Programa de P?s-Gradua??o em Medicina e Ci?ncias da Sa?de
• Departamento: Faculdade de Medicina
• País: BR
• Palavras-chave em Português: MEDICINA; DNA; CARCINOMA DE C?LULAS ESCAMOSAS; NEOPLASIAS BUCAIS
• Área do conhecimento CNPq: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA
• Link de acesso: http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/1516

Com a finalidade de obter maiores conhecimentos sobre mecanismos de reparo de DNA no desenvolvimento do c?ncer bucal, foi avaliado o reparo da quebra da dupla fita de DNA (DSBs) em c?lulas de indiv?duos com menos de 40 anos e com mais de 40 anos. O objetivo foi determinar se as c?lulas de carcinomas epiderm?i?ides de boca de indiv?duos com menos de 40 anos de idade e com mais de 40 anos diferem em rela??o ? capacidade para reparar as DSBs por meio de ambos os mecanismos de reparo por recombina??o, a recombina??o hom?loga (HR) e a jun??o de extremidades n?o hom?logas (NHEJ). Foi acessada funcionalmente a quebra da dupla fita de DNA utilizando linhagens celulares UT-SCC desenvolvidas a partir de indiv?duos com menos de 40 anos e com mais de 40 anos. Foi examinado o dano global de DNA pelo ensaio do cometa utilizando radia??o ionizante (RI). Um total de 200 c?lulas por amostra foi analisado utilizando o sistema de an?lise de imagem, Komet software. Para a an?lise da capacidade das linhagens celulares UT-SCC repararem o dano ao DNA por HR e NHEJ, foi utilizado um ensaio com plasm?deo, descrito por Secretan et al., 2004. No ensaio do cometa foram realizados tr?s experimentos independentes para cada linhagem celular, e n?o foi observada diferen?a entre as linhas celulares provenientes de indiv?duos com menos de 40 anos e com mais de 40 anos em rela??o ao reparo das DSBs de forma global. Quando foram comparadas c?lulas irradiadas versus c?lulas n?o-irradiadas, observou-se que ambas as linhagens de celulares foram capazes de reparar as DSBs causadas pela radia??o ionizante em um per?odo de 24 horas. Para testar se houve defici?ncia ou compensa??o de um mecanismo de reparo sobre o outro, foi realizada uma an?lise de HR e NHEJ, na qual se observou que tanto nas linhagens celulares de indiv?duos com menos de 40 anos quanto nas dos com mais de 40 houve uma redu??o em ambos os mecanismos de reparo por recombina??o, quando comparados ? linhagem celular de ceratin?citos normais. Com base nos resultados, concluiu-se que as linhagens celulares de indiv?duos com menos de 40 anos, bem como os com mais de 40 anos, t?m seus mecanismos de reparo por recombina??o reduzidos. N?o h? diferen?a estatisticamente significante na efici?ncia de recombina??o NHEJ entre as linhagens celulares UT-SCC de indiv?duos jovens e com mais de 40 anos. H? uma maior redu??o no reparo das DSBs por HR em linhagens celulares de indiv?duos com mais de 40 anos.