Teor de isoflavonas e atividades de ß-glucosidase em grãos de soja germinada e de diferentes grupos de maturação. Purificação e caracterização bioquímica parcial da ß-glucosidase

• Ano de defesa: 2006
• Autor(a) principal: Maria Lucia Luiz Ribeiro
• Orientador(a): Elza Iouko Ida .
• Banca de defesa: Marilde Luiz Bordgnon, Nehemias Curvelo Pereira, Geni Varéa Pereira
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual de Londrina. Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciência de Alimentos.
• País: BR
• Link de acesso: http://www.bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls000119369

Isoflavonas da soja são compostos fenólicos classificados como agluconas, b-glucosídeos e b-glucosídeos conjugados com grupos malonil e acetil. A b-glucosidase (b-glucosídeo glucohidrolase, EC 3.2.1.21) hidrolisa isoflavonas b-glucosídicas com liberação de agluconas que possuem ação benéfica na saúde humana. O objetivo deste trabalho foi determinar o teor de isoflavonas, atividade de b-glucosidase e sua correlação em 18 cultivares de soja de diferentes dias de maturação semeados nas mesmas condições de cultivo. Experimentos foram realizados para observar o comportamento destes componentes na germinação de uma cultivar de soja (BRS 213), que apresentou a maior atividade da enzima, por 72 h a 25°C. Além disso, a b-glucosidase de cotilédones de soja foi purificada por cromatografia com caracterização bioquímica parcial. A análise de regressão não foi significativa entre número de dias de maturação e todas as formas de isoflavonas. A correlação não foi significativa entre dias de maturação e b-glucosídeos e malonil-glicosídeos. Entretanto, a correlação foi significativa (P<0,08) entre dias de maturação e agluconas. As análises de regressão e correlação não foram significativas entre atividade de b-glucosidase e cultivares de diferentes dias de maturação e atividade de b-glucosidase não se correlacionou com o teor das formas de isoflavonas (P<0,05). Em soja germinada, cultivar BRS 213, a atividade de b-glucosidase aumentou 3,3 vezes nas radículas e 2,3 vezes nos cotilédones. Nas radículas ocorreu redução significativa no teor de isoflavonas totais (6,3 vezes) enquanto que nos cotilédones houve aumento no teor de isoflavonas totais (2,4 vezes). A b-glucosidase foi purificada por cromatografia de troca iônica com CM Sephadex C-50 e filtração em gel com Sephadex G-100. A fração de b-glucosidase denominada de F42, com caracterização bioquímica parcial, apresentou condições ótimas de reação de pH 5,0 e 30 minutos de incubação a 45°C. A enzima foi estável a 25°C, enquanto que a 45°C a redução foi de 60% após 1 h de incubação. Em temperatura superior a 60°C, a enzima apresentou baixa estabilidade, com redução 95% de atividade, após 5 min de incubação. O Km e Vmax da enzima com o substrato p-nitrofenil-b-D-glucopiranosídeo foi de 0,16 mM e 4,3 mM p-nitrofenol/min, respectivamente. A enzima apresentou especificidade para os substratos derivados de p-nitrofenil-b-D-glicopiranosídeos e também para substratos que possuem ligantes na posição para, ligações do tipo a ou b e do tipo 1®4 ou 1®6.