Bioprospecção de antimicrobianos produzidos por fungos do solo amazônico com ação frente as principais bactérias multiresistentes

• Ano de defesa: 2016
• Autor(a) principal: Lima, Rildo Mendes de
• Outros Autores: http://lattes.cnpq.br/1066014948975873
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal do Amazonas; Faculdade de Ciências Farmacêuticas; Brasil; UFAM; Programa de Pós-graduação em Ciências Farmacêuticas
• Palavras-chave em Português: Fungos do solo Amazônico; Bioprospecção de antimicrobianos; Bactérias multiresistentes; Atividade antimicrobiana; Fungi of the amazonian soil; Bioprospecting of antimicrobials; Multiresistant bacteria; Antimicrobial activity; CIÊNCIAS DA SAÚDE: FARMÁCIA
• Link de acesso: https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/7170

O aumento no número de bactérias resistentes a múltiplas drogas nos últimos anos, tornou-se um problema mundial, aumentando a necessidade da descoberta e desenvolvimento de novos antimicrobianos. Dentre as principais bactérias caracterizadas como multiresistentes, podemos destacar o Staphylococcus aureus resistente à meticilina/oxacilina (MRSA), o Enterococcus spp. resistente à vancomicina (VRE), as enterobactérias β-lactamase de espectro estendido (ESβL) e resistente à carbapêmicos (ERC), Pseudomonas aeruginosa e Acinetobacter baumannii multi-droga resistente (MDR). Diante desse contexto, dez linhagens fúngicas pertencentes a coleção de interesse médico do Instituto de Pesquisa da Amazônia – INPA, foram utilizadas neste estudo, a fim de realizar a bioprospecção de antimicrobianos produzidos por fungos de solo Amazônico, em virtude do grande potencial biotecnológico que esses microrganismos apresentam. Para investigar a atividade antimicrobiana, foram realizados bioprocessos para a produção do filtrado de cultura dos fungos e realizado o método de difusão em ágar. A determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM), cromatografias em camada delgada, bioautografia e fator de retenção (Rf), foram realizados para o filtrado de cultura dos fungos que apresentaram atividade antimicrobiana. Para a caracterização química da fração com maior atividade antimicrobiana, foram utilizadas técnicas de fracionamento cromatográfico (cromatografia em camada delgada comparativa, extração líquido-líquido e cromatografia em coluna aberta), ressonância magnética nuclear (RMN) e espectrometria de massas (EM). O filtrado de cultura do Aspergillus (H63) e do Paecilomyces (H59) apresentaram atividade antimicrobiana pelo método de difusão em ágar, variante poço. O concentrado do filtrado do Aspergillus (H63) apresentou CIM de 1600 µg/mL para o S. aureus (MRSA) e o S. aureus (selvagem). O Paecilomyces (H59) apresentou CIM de 800 µg/mL para o S. aureus (MRSA), S. aureus (selvagem), Klebsiella pneumoniae (ESβL), K. pneumoniae (KPC) e Escherichia coli (selvagem); e de 400 µg/mL para o A. baumannii (OXA-23). O sistema de eluição acetato de etila/metanol (1:1 – v/v) revelou a presença de três zonas em UV 365 nm e a bioautografia determinou uma zona com atividade antimicrobiana. A fase acetato de etila apresentou atividade antimicrobiana pelo método de difusão em ágar frente ao S. aureus (MRSA). O sistema diclorometano/acetato de etila (1:9) obteve as melhores eleições, que foram separadas de acordo com a similaridade, gerando as frações 3-4, 5-7 e 8. A fração 5-7, apresentaram atividade antimicrobiana pelo método de difusão em ágar frente ao S. aureus (MRSA) e A. baumannii (OXA-23). A RMN e o EM revelou uma substância com atividade antimicrobiana, sendo necessário mais estudos para elucidação de sua estrutura química e avaliação de sua atividade antimicrobiana isoladamente das demais frações. Os resultados desse trabalho indicam que a bioprospecção de substâncias com atividade antimicrobiana produzidas por Paecilomyces (H59) é uma alternativa para a pesquisa de novos antimicrobianos frente a bactérias MDR.