Identificação das fases latente e replicativa do vírus Epstein-Barr: análise em tecidos parafinados de lesões de cabeça e pescoço através das técnicas de imuno-histoquímica, hibridização in situ e Nested PCR
Ano de defesa: | 2022 |
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Resumo: | O vírus Epstein-Barr pertence à família do grupo herpes e dados sorológicos indicam que mais de 90% da população mundial está infectada com o EBV latente nos linfócitos B. O mecanismo pelo qual ocorre a replicação viral em indivíduos saudáveis ainda não está bem esclarecido, mas é certo o envolvimento de tecidos da orofaringe e a eliminação viral periódica pela saliva. O EBV tem sido associado a doenças benignas e malignas, entre as quais os linfomas (Hodgkin, não-Hodgkin, de células B e T), carcinomas nasofaríngeos, gástricos e mamários, mononucleose infecciosa e a leucoplasia pilosa oral. Lesões papilomatosas bucais têm sido relacionadas etiopatogenicamente com o Papilomavírus humano (HPV) e até com o vírus Epstein-Barr (EBV). Até o momento, os resultados encontrados na literatura relativos às lesões exofíticas malignas e benignas da mucosa bucal são controversos e imprecisos quanto à relação da etiopatogenia. Lesões papilomatosas bucais têm sido relacionadas etiopatogenicamente com o Papilomavírus humano (HPV) e até com o vírus Epstein-Barr (EBV), além do papel destes vírus na carcinogênese bucal. Até o momento, os resultados encontrados na literatura relativos às lesões exofíticas malignas e benignas da mucosa bucal são controversos e imprecisos quanto a relação da etiopatogenia com diferentes tipos de HPV e EBV. Este trabalho tem como objetivo principal estudar as alterações morfológicas e moleculares em linfócitos e células epiteliais infectados pelo vírus Epstein-Barr através de cortes de tecidos parafinados, utilizando as técnicas de detecção de proteínas, DNA e RNA. Foram selecionadas 125 amostras de tecidos parafinados de lesões suspeitas de infecção pelo vírus Epstein-barr que foram submetidas ao Nested-PCR para identificação do genoma do vírus. O EBV foi identificado em 52(42%). Sendo detectado em 5/5 (100%) das leucoplasias pilosas orais, 10/52 papilomas,14/15(93%) carcinomas nasofaríngeos, 13/24 (54%) tonsilites e 10/29 (34%) linfomas. Na hibridização in situ para o transcrito EBER observou-se uma maior marcação positiva no grupo das leucoplasias pilosas (100%) seguidos pelos carcinomas nasofaríngeos e linfomas (80% cada). A identificação do EBER pela ISH, em leucoplasias pilosas não foi relatada na literatura. Conclui-se que a PCR foi a técnica com maior sensibilidade na detecção do EBV quando comparada a ISH e IHQ. A boa sensibilidade observada com a imuno-histoquímica para a BZLF-1 em leucoplasias pilosas torna a técnica uma boa escolha na investigação das infecções replicativas. A infecção latente e replicativa nas leucoplasias pilosas são demonstradas através da imuno-histoquimica e hibridização in situ nas áreas dos efeitos citopáticos do EBV |
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O EBV tem sido associado a doenças benignas e malignas, entre as quais os linfomas (Hodgkin, não-Hodgkin, de células B e T), carcinomas nasofaríngeos, gástricos e mamários, mononucleose infecciosa e a leucoplasia pilosa oral. Lesões papilomatosas bucais têm sido relacionadas etiopatogenicamente com o Papilomavírus humano (HPV) e até com o vírus Epstein-Barr (EBV). Até o momento, os resultados encontrados na literatura relativos às lesões exofíticas malignas e benignas da mucosa bucal são controversos e imprecisos quanto à relação da etiopatogenia. Lesões papilomatosas bucais têm sido relacionadas etiopatogenicamente com o Papilomavírus humano (HPV) e até com o vírus Epstein-Barr (EBV), além do papel destes vírus na carcinogênese bucal. Até o momento, os resultados encontrados na literatura relativos às lesões exofíticas malignas e benignas da mucosa bucal são controversos e imprecisos quanto a relação da etiopatogenia com diferentes tipos de HPV e EBV. Este trabalho tem como objetivo principal estudar as alterações morfológicas e moleculares em linfócitos e células epiteliais infectados pelo vírus Epstein-Barr através de cortes de tecidos parafinados, utilizando as técnicas de detecção de proteínas, DNA e RNA. Foram selecionadas 125 amostras de tecidos parafinados de lesões suspeitas de infecção pelo vírus Epstein-barr que foram submetidas ao Nested-PCR para identificação do genoma do vírus. O EBV foi identificado em 52(42%). Sendo detectado em 5/5 (100%) das leucoplasias pilosas orais, 10/52 papilomas,14/15(93%) carcinomas nasofaríngeos, 13/24 (54%) tonsilites e 10/29 (34%) linfomas. Na hibridização in situ para o transcrito EBER observou-se uma maior marcação positiva no grupo das leucoplasias pilosas (100%) seguidos pelos carcinomas nasofaríngeos e linfomas (80% cada). A identificação do EBER pela ISH, em leucoplasias pilosas não foi relatada na literatura. Conclui-se que a PCR foi a técnica com maior sensibilidade na detecção do EBV quando comparada a ISH e IHQ. A boa sensibilidade observada com a imuno-histoquímica para a BZLF-1 em leucoplasias pilosas torna a técnica uma boa escolha na investigação das infecções replicativas. A infecção latente e replicativa nas leucoplasias pilosas são demonstradas através da imuno-histoquimica e hibridização in situ nas áreas dos efeitos citopáticos do EBVEpstein-Barr virus (EBV) belongs to the herpes virus family and sorological data indicate that about 90% of the world population is infected by latent EBV infection in B lymphocytes. The mechanism of viral replication in healthy subjects is still not completely understood, but involvement of the oropharynx soft-tissues and periodic salivary elimination of the virus are well accepted. EBV has been associated to several benign and malignant diseases, including lymphomas (Hodgkin, no-Hodgkin, B-cell and T-cell), nasopharyngeal, gastric and mammary carcinomas, infectious mononucleosis and oral hairy leukoplakia. Oral papillomatous lesions have been also pathogenically associated with human papillomavirus (HPV) and EBV. Data from the literature regarding benign and malignant oral exophytic diseases are controversial in confirming this ethiopatogenic relationship. Oral papillomatous lesions have been pathogenetically associated to HPV and EBV, and both these virus have been also proved to play a role in oral carcinogenesis. The aim of this study was to evaluate the morphological and molecular alterations in lymphocytes and epithelial cells infected by EBV, through the use of protein, DNA and RNA detection techniques in histological sections obtained from paraffin-embedded specimens. A total of 125 paraffin-embedded specimens from EBV-infected suspected lesions were selected and submitted to nested-PCR for EBV identification. The virus was identified in 52 (42%), including 5/5 (100%) oral hairy leukoplakias, 10/52 papillomas, 14/15 (93%) nasopharyngeal carcinomas, 13/24 (54%) tonsillitis and 10/29 (34%) lymphomas. In situ hybridization for EBER showed higher positiveness in oral hairy leukoplakia (100%), followed by nasopharyngeal carcinoma and lymphomas (80% each). Identification of EBER by in situ hybridization in oral hairy leukoplakia was not previously reported in the literature. We concluded that PCR was the most sensitive technique for EBV detection, compared to in situ hybridization and immunohistochemistry. Sensitivity observed with the use of immunohistochemistry to BZLF-1 protein in oral hairy leukoplakia indicates that this technique can be a trustful option in the investigation of infections due to replication of EBV. Latent and replicative EBV infection in oral hairy leukoplakia can be demonstrated through the use of immunhohistochemistry and in situ hybridization in areas with cytopathic effects of EBV227 f.Dias, Eliane Pedrahttp://lattes.cnpq.br/4383696340593005Amorim, Lídia Maria da Fonte dehttp://lattes.cnpq.br/0861996456068059Soares, Fernando Augustohttp://lattes.cnpq.br/9150503056390851Silva Júnior, Arleyhttp://lattes.cnpq.br/9066619136266441Pires, Fábio Ramoahttp://lattes.cnpq.br/0665035067388144Canedo, Nathalie Henriques Silvahttp://lattes.cnpq.br/4295929194142461Frugulhetti, Izabel Christina Nunes de Palmer Paixãohttp://lattes.cnpq.br/3007049156248946http://lattes.cnpq.br/2764923121270556Rocha, Mônica Lage da2022-10-07T12:44:48Z2022-10-07T12:44:48Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfROCHA, Mônica Lage da. 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