Avaliação toxicológica de protótipos à base de rutênio para o tratamento do câncer utilizando metodologias alternativas ao uso de mamíferos
Ano de defesa: | 2020 |
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Universidade Federal de Goiás
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Resumo: | Aufgrund der weltweit zunehmenden Zahl von Krebsfällen haben sich Rutheniumkomplexe als vielversprechende Chemotherapeutika erwiesen, da sie eine geringe Toxizität aufweisen und selektiver für Tumorgewebe sind. Die RuLap- und RuLau-Rutheniumkomplexe wurden gegen mehrere Tumor- und Nicht-Tumorzelllinien getestet, um die In-vitro-Zytotoxizität durch den MTT-Test und auch Neutralrot zu bewerten. Der RuLau-Komplex zeigte einen Selektivitätsindex von 1,17 bis 10,91 für die HeLa-Tumorlinie. Bei der Auswertung des In-vitro-Mincronukleus-Tests war die RuLau-Verbindung diejenige mit dem niedrigsten genotoxischen Potential, die nur bei einer Konzentration von 2 mg / l eine signifikante Genotoxizität zeigte. Im Kometen-In-vitro-Assay zeigten sowohl RuLap- als auch Rulau-Verbindungen eine genotoxische Wirkung Potenzial, ohne Unterschied zwischen den Belichtungszeiten von 24 Stunden und 48 Stunden. In akuten Toxizitätstests an Zebrafischembryonen zeigte die RuLau-Verbindung im Vergleich zur RuLap-Verbindung weniger ausgeprägte subletale Wirkungen. Die Rulau-Verbindung ließ die Embryonen selbst bei den höchsten Konzentrationen nicht sterben. Die RuLap-Verbindung war die einzige Verbindung, die tatsächlich toxischer war, was zu einer Verzögerung des Schlupfes der Embryonen führte und auch deren Letalität verursachte, noch bevor sie schlüpften. Im neurotoxischen Potentialbewertungstest unter Verwendung des Netzhauttests bei Zebrafischembryonen gab es bei den niedrigsten Konzentrationen (½ EC10 und EC10) keine signifikante Abnahme im Bereich der inneren plexiformen Schicht (CPI), was nur bei der höchsten Konzentration Veränderungen zeigte (2x EC10), und als die Netzhautdicke bewertet wurde, gab es eine signifikante Zunahme der Netzhautdicke bei der niedrigsten Konzentration. Im Acetylcholinesterase-Hemmungstest induzierte keine der getesteten Verbindungen die Enzymhemmung, nicht einmal die RuLau-Verbindung, die möglicherweise mit der Nichtinduktion neurotoxischer Wirkungen zusammenhängt. Der RuLau-Rutheniumkomplex zeigt dann eine größere Selektivität für Tumorstämme und ein geringeres toxisches Potential, wenn er gegen Zebrafischembryonen bewertet wird. |
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Lacerda, Elisângela de Paula Silveirahttp://lattes.cnpq.br/9390789693192751Lacerda, Elisângela de Paula SilveiraGrisólia, César KoppeMachado, Mônica Rodrigues FerreiraSá, Viviane de Souza VelozoFranchi, Leonardo Pereirahttp://lattes.cnpq.br/1016749262144067Teixeira, Thallita Monteiro2021-04-12T14:53:04Z2021-04-12T14:53:04Z2020-09-09TEIXEIRA, T. M. Avaliação toxicológica de protótipos à base de rutênio para o tratamento do câncer utilizando metodologias alternativas ao uso de mamíferos. 2020. 115 f. Tese (Doutorado em Ciências Farmacêuticas) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2020.http://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tede/11237Aufgrund der weltweit zunehmenden Zahl von Krebsfällen haben sich Rutheniumkomplexe als vielversprechende Chemotherapeutika erwiesen, da sie eine geringe Toxizität aufweisen und selektiver für Tumorgewebe sind. Die RuLap- und RuLau-Rutheniumkomplexe wurden gegen mehrere Tumor- und Nicht-Tumorzelllinien getestet, um die In-vitro-Zytotoxizität durch den MTT-Test und auch Neutralrot zu bewerten. Der RuLau-Komplex zeigte einen Selektivitätsindex von 1,17 bis 10,91 für die HeLa-Tumorlinie. Bei der Auswertung des In-vitro-Mincronukleus-Tests war die RuLau-Verbindung diejenige mit dem niedrigsten genotoxischen Potential, die nur bei einer Konzentration von 2 mg / l eine signifikante Genotoxizität zeigte. Im Kometen-In-vitro-Assay zeigten sowohl RuLap- als auch Rulau-Verbindungen eine genotoxische Wirkung Potenzial, ohne Unterschied zwischen den Belichtungszeiten von 24 Stunden und 48 Stunden. In akuten Toxizitätstests an Zebrafischembryonen zeigte die RuLau-Verbindung im Vergleich zur RuLap-Verbindung weniger ausgeprägte subletale Wirkungen. Die Rulau-Verbindung ließ die Embryonen selbst bei den höchsten Konzentrationen nicht sterben. Die RuLap-Verbindung war die einzige Verbindung, die tatsächlich toxischer war, was zu einer Verzögerung des Schlupfes der Embryonen führte und auch deren Letalität verursachte, noch bevor sie schlüpften. Im neurotoxischen Potentialbewertungstest unter Verwendung des Netzhauttests bei Zebrafischembryonen gab es bei den niedrigsten Konzentrationen (½ EC10 und EC10) keine signifikante Abnahme im Bereich der inneren plexiformen Schicht (CPI), was nur bei der höchsten Konzentration Veränderungen zeigte (2x EC10), und als die Netzhautdicke bewertet wurde, gab es eine signifikante Zunahme der Netzhautdicke bei der niedrigsten Konzentration. Im Acetylcholinesterase-Hemmungstest induzierte keine der getesteten Verbindungen die Enzymhemmung, nicht einmal die RuLau-Verbindung, die möglicherweise mit der Nichtinduktion neurotoxischer Wirkungen zusammenhängt. Der RuLau-Rutheniumkomplex zeigt dann eine größere Selektivität für Tumorstämme und ein geringeres toxisches Potential, wenn er gegen Zebrafischembryonen bewertet wird.Em decorrência do aumento no número de casos de câncer no mundo, os complexos de rutênio têm se mostrado como promissores agentes quimioterápicos, já que apresentam baixa toxicidade e são mais seletivos para os tecidos tumorais. Os complexos de rutênio RuLap e RuLAu foram testados frente a diversas linhagens celulares tumorais e não tumorais para se avaliar a citotoxicidade in vitro através do teste de viabilidade celular (MTT) e do teste vermelho neutro. Dentre os complexos testados, os complexos RuLap e RuLau apresentaram maior índice de seletividade de 1,17 e 10,91, respectivamente para a linhagem tumoral HeLa. Desta forma, estes compostos foram selecionados para estudos mais aprofundados da segurança toxicológica. Na avaliação do teste do mincronúcleo in vitro, o composto RuLau foi o que apresentou menor potencial genotóxico, o qual apresentou genotoxicidade significativa apenas na concentração de 2 mg.L (0,8µM). No ensaio cometa in vitro, ambos os compostos RuLap e RuLau apresentaram potencial genotóxico em todas as concentrações testadas, não apresentando diferença entre os tempos de exposição de 24h e 48h. Nos testes de toxicidade aguda em embriões de zebrafish, o composto RuLau apresentou efeitos subletais menos acentuados quando comparados ao composto RuLap. O composto RuLau não provocou a morte dos embriões em nehuma das concentrações testadas. O composto RuLap foi o único composto que se mostrou mais tóxico, levando a um atraso na eclosão dos embriões e causando letalidade nos animais, antes mesmo de eclodirem. No teste de avaliação do potencial neurotóxico por meio do teste de retina em embriões de zebrafish, não houve diminuição significativa da área da Camada Plexiforme Interna (CPI) quando testadas nas concentrações mais baixas (½EC10 e EC10), apresentando alterações apenas na concentração mais alta (2x EC10). Na avaliação da espessura da retina, houve um aumento significativo nessa espessura quando testada na concentração mais baixa do composto (0,25uM). Já no teste de inibição da acetilcolinesterase, nenhum dos dois compostos testados induziram a inibição da enzima, podendo estar relacionado com a não indução de efeitos neurotóxicos. Diante dos dados observados, o complexo de rutênio RuLau apresenta maior segurança toxicológica entre os demais por apresentar maior seletividade para linhagens tumorais e menor potencial tóxico quando avaliado frente à embriões de zebrafish.Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2021-04-09T13:37:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 805 bytes, checksum: 4460e5956bc1d1639be9ae6146a50347 (MD5) Tese - Thallita Monteiro Teixeira - 2020.pdf: 3007226 bytes, checksum: 3a294fe9241ea40abe6cc0015645fc5e (MD5)Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2021-04-12T14:53:03Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 805 bytes, checksum: 4460e5956bc1d1639be9ae6146a50347 (MD5) Tese - Thallita Monteiro Teixeira - 2020.pdf: 3007226 bytes, checksum: 3a294fe9241ea40abe6cc0015645fc5e (MD5)Made available in DSpace on 2021-04-12T14:53:04Z (GMT). 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