Determinação simultânea de sulfonilureias em plasma humano empregando cromatografia a líquido com coluna de meio de acesso restrito e coluna com partículas de núcleo fundido

• Ano de defesa: 2015
• Autor(a) principal: Juliana Veloso Ferreira
• Orientador(a): Gerson Antonio Pianetti
• Banca de defesa: Leonardo de Souza Teixeira, Isabela da Costa Cesar
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Minas Gerais
• Palavras-chave em Português: Partículas de Núcleo Fundido; Sulfonilureias; Plasma Humano; Meio de Acesso Restrito; Preparo de Amostras; Column Switching
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-BAVK8A

O diabetes mellitus é uma das principais causas de morbidade e mortalidade na população, sendo a classe das sulfonilureias amplamente utilizadas no seu tratamento. Atualmente, sua determinação em matrizes biológicas é realizada por meio de técnicas de preparo de amostras convencionais, o que frequentemente leva ao aumento do tempo total da análise e dos erros analíticos. Essas limitações podem ser reduzidas com o uso de colunas com meio de acesso restrito (RAM), que possibilitam a injeção direta de fluidos biológicos nos sistemas cromatográficos. Ademais, o uso de colunas de núcleo fundido, que permitem o emprego de altas vazões de fase móvel (FM), leva à redução do tempo total da análise. Diante do exposto, este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de método bioanalítico para a determinação simultânea de três fármacos da classe das sulfonilureias: glibenclamida, gliclazida e glimepirida, em plasma humano, empregando cromatografia a líquido de alta eficiência bidimensional (column switching automatizado) em modo de eluição backflush, com coluna RAM, como fase de exclusão, acoplada à coluna com partículas de núcleo fundido. A média das porcentagens de exclusão das proteínas plasmáticas pela coluna RAM foi de 104,5%. As condições do método desenvolvido, para a primeira dimensão, foram: coluna RAM-ADS, FM constituída de água ultrapura pH 6,0, com vazão de 1,0 mL min-1 e tempo de viragem de válvula de 3 minutos. Na segunda dimensão foi empregada précoluna C18 acoplada a coluna analítica contendo partículas de núcleo fundido C18, FM constituída de acetonitrila e tampão fosfato 10 mM pH 3,0 (54:46 v/v), com vazão de 0,8 mL min-1. O tempo de eluição dos analitos foi de 1 minuto, a temperatura de 35°C, o volume de injeção de 200 µL e o comprimento de onda de detecção de 230 nm. Foi empregado ácido flufenâmico como padrão interno. O tempo total da análise, englobando o tempo referente à etapa cromatográfica (8 minutos) e o tempo dedicado à extração (3 minutos para exclusão proteica e 1 minuto para eluição dos analitos), foi de apenas 12 minutos.