Avaliação da atividade antifúngica in vitro e in vivo de derivados de chalconas e da tiossemicarbazona do lapachol contra isolados do gênero Paracoccidioides

• Ano de defesa: 2013
• Autor(a) principal: Nívea Pereira de Sá
• Orientador(a): Susana Johann
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Minas Gerais
• Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Microbiologia
• Departamento: ICB - DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA
• País: Brasil
• Palavras-chave em Português: Paracoccidioides brasiliensis; Antifúngicos; Chalconas; Tiosemicarbazona do lapachol; BALB/c; Sinergismo; Apoptose; Fagocitose
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/1843/42467

A paracoccidioidomicose (PCM) é uma doença granulomatosa sistêmica causada pelo fungo termo-dimórfico Paracoccidioides brasiliensis. Esta doença é limitada aos países da América Latina onde é reconhecida como a mais prevalente micose sistêmica. O tratamento da PCM é geralmente prolongado, sendo em muitos casos por um ou dois anos, ou mais; na ausência da terapia a doença é quase sempre fatal. A anfotericina B, as sulfonamidas, e os azólicos podem ser usados no tratamento da PCM. A anfotericina B tem sido associada à forte toxicidade, o que pode dificultar o tratamento das infecções graves. O curso prolongado do tratamento com azólicos é um fator limitante. As sulfonamidas foram a primeira classe de drogas de escolha para o tratamento da PCM, mas o longo período de tratamento, a toxicidade e o custo da terapia desfavoreceram sua utilização. Esta situação leva a necessidade de novos, seguros e efetivos compostos antifúngicos para o tratamento da PCM. Neste contexto, a busca por novos compostos com atividade contra P. brasiliensis que apresentem baixa toxicidade e custo acessível é de extrema importância. Moléculas derivadas de chalconas e a tiosemicarbazona do lapachol (TSC) tem demonstrado atividade significativa in vitro e in vivo contra o fungo P. brasiliensis. A partir disto, nós realizamos testes com as substâncias 3b, 4c, 3e, 4e e TSC para a determinação da concentração inibitória e fungicida mínima, verificação de interação com a anfotericina, itraconazol e sulfametoxazol-trimetoprima, e análise por microscopia eletrônica de varredura e transmissão do isolado Pb18 sob tratamento com estas substâncias. Foram realizados ensaios de parede celular com sorbitol, com os marcadores de morte celular DAPI e iodeto de propídeo e ensaios de fagocitose de macrófagos murinos tratados com estas substâncias. O estudo da in vivo das substâncias 4c e 4e foram realizados em camundongos BALB/c infectados com o isolado Pb18. Após 15 dias de infecção os animais foram tratados com as substâncias na dose de 5 mg/kg/dia por 15 dias. Neste trabalho verificamos que as substâncias foram ativas contra diferentes isolados representantes das espécies filogenéticas do gênero Paracoccidioides, e a 4c apresentou interação sinérgica com o itraconazol contra o isolado Pb18. Todas as substâncias provocaram alterações morfológicas na célula do isolado Pb18 que em comparação com os marcadores de morte celular DAPI e iodeto de propídeo forneceram indícios de processos de apoptose e necrose. Entretanto, nenhuma das substâncias provocou danos diretos sobre a parede celular fúngica. As substâncias 3b, 4c e 4e foram capazes de aumentar o índice fagocítico e a atividade fungicida de macrófagos murinos in vitro. As substâncias 4c e 4e presentaram atividade in vivo semelhante ao itraconazol na dose de 5 mg/kg/dia, demonstrada pela capacidade de reduzir o número de UFC recuperadas do pulmão e de favorecer o desenvolvimento de uma reposta imune, predominantemente, Th1. Contudo apenas a 4c apresentou características histopatológicas semelhantes ao itraconazol, observadas no pulmão, fígado e baço, enquanto a 4e apresentou o pulmão e fígado mais comprometido pela infecção semelhante ao grupo controle que não recebeuntratamento. Dessa forma, os resultados apresentados neste trabalho confirmaram onpotencial antifúngico das substâncias 3b, 4c, 3e, 4e e TSC apresentando-as como possíveis candidatas a terapêutica da PCM.