O colesterol de membrana tem influência na sinalização de insulina e na regeneração hepática

• Ano de defesa: 2017
• Autor(a) principal: Matheus de Castro Fonseca
• Orientador(a): Maria de Fatima Leite
• Banca de defesa: Carla Jeane Aguiar, Érika Lorena Fonseca Costa de Alvarenga, Luciana de Oliveira Andrade, Andre Ricardo Massensini
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Minas Gerais
• Palavras-chave em Português: Sinalização de Ca+2; Insulina; Regeneração hepática; Lipid-rafts
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-ALAF7D

Introdução e objetivos: O fígado está constantemente sujeito a lesões por enterotoxinas e/ou outras substâncias que entram no organismo. Sendo assim, a regeneração hepática é fundamental para o correto e intermitente funcionamento deste órgão, por um processo coordenado e regulado por diversos fatores, tais como o fator de crescimento epidermal (EGF), o fator de crescimento de hepatócitos (HGF) e a insulina. Sabe-se que alguns microdomínios de membrana enriquecidos em colesterol, conhecidos como lipid-rafts (balsas lipídicas), desempenham um papel importante na sinalização metabólica mediada por insulina em adipócitos. No entanto, o papel dos rafts como reguladores dos efeitos metabólicos e mitogênicos da insulina no fígado e sua contribuição para o processo de regeneração hepática, ainda não foram investigados. Sendo assim, neste estudo, avaliamos a contribuição dos lipid-rafts nas respostas proliferativa e metabólica induzidas pela ativação do receptor para insulina (IR) no fígado. Métodos: O IR e os lipid-rafts foram imunomarcadas em células HepG2 e hepatócitos primários de rato. Para verificar a importância do colesterol membranar sobre a sinalização de cálcio (Ca+2), proliferação celular e metabolismo induzidos por insulina, os rafts foram desfeitos através da incubação com Metil-beta-ciclodextrina. A depleção de colesterol in vivo foi realizada com administração intraperitoneal de lovastatina. No fígado, os sinais de Ca+2 induzidos pela insulina foram avaliados por exposição do órgão e visualização dos hepatócitos em microscópio confocal. O processo proliferativo do fígado foi avaliado pela regeneração hepática após hepatectomia parcial de 70%. Resultados: Observou-se que nas células hepáticas, uma subpopulação do IR está localizada em microdomínios de membrana enriquecidos em colesterol. A depleção do colesterol resultou na redistribuição desse receptor ao longo da célula hepática e na redução da sinalização de Ca+2 estimulada pela insulina. Além disso, a depleção do colesterol diminuiu a proliferação celular induzida por insulina, por um mecanismo dependente de ERK 1/2 e resultou em uma captação reduzida de glicose induzida pela insulina devido pelo menos em parte, a um comprometimento na ativação da via da Akt. In vivo, a redução do colesterol também causou um decremento na sinalização de Ca+2 desencadeada pela insulina no fígado, com consequente retardo da regeneração hepática após hepatectomia parcial. Conclusão: O colesterol de membrana e as balsas lipídicas em células hepáticas são essenciais para os efeitos metabólicos e proliferativos da insulina no fígado.