O papel do epítopo α-Gal (Galα1-3Galβ1-4GlcNAc-R) no diagnóstico sorológico e na infecção experimental pelo Trypanosoma cruzi

• Ano de defesa: 2017
• Autor(a) principal: Carlos Ramon do Nascimento Brito
• Orientador(a): Alexandre Ferreira Marques
• Banca de defesa: Ricardo Nascimento Araújo, Andréa Teixeira de Carvalho, José Ronnie Carvalho de Vasconcelos, Daniella Castanheira Bartholomeu
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Minas Gerais
• Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Parasitologia
• Departamento: ICB - INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLOGICAS
• País: Brasil
• Palavras-chave em Português: Doença de Chagas; Diagnóstico; ELISA; epítopo α-Gal; Anticorpos anti-α- Gal; virus-like particles; BSA; camundongos α1; 3galactosiltransferase knockout
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/1843/34828

O protozoário Trypanosoma cruzi apresenta uma superfície celular abundante em glicoconjugados imunogênicos que contém o epítopo α-Gal, responsável pela produção de elevados níveis de anticorpos específicos anti-α-Gal, excelentes alvos para o diagnóstico sorológico em indivíduos chagásicos. Nesse sentido, as plataformas Albumina Sérica Bovina (BSA) e Qβ virus-like particles (Qβ-VLP), que aumentam o número do epítopo α-Gal exposto, foram avaliadas como ferramentas para o diagnóstico sorológico da infecção pelo T. cruzi na fase crônica. Para isso, aproximadamente 22 unidades do epítopo α-Gal foram acopladas à BSA, e a reatividade dos anticorpos anti-α-Gal purificados de indivíduos chagásicos foi 230 vezes maior quando comparada àqueles purificados de indivíduos não chagásicos. Da mesma forma, o pool de soros de indivíduos chagásicos apresentou uma reatividade aproximadamente 20 vezes maior que o pool de soros de indivíduos não chagásicos. A outra plataforma utilizada, na qual 540 unidades de α-Gal foram acopladas ao Qβ-VLP foi testada frente a soros de indivíduos infectados pelo T. cruzi, não infectados ou com leishmaniose visceral. Os resultados evidenciaram uma excelente discriminação entre indivíduos chagásicos e não chagásicos, independente da parasitemia, grau de cardiopatia chagásica crônica e idade, assim como ausência de reatividade cruzada. Além disso, os níveis de IgG anti-α-Gal diminuíram, com o passar do tempo, em pacientes que receberam tratamento com benznidazol, sugerindo que a avaliação dos níveis séricos deste anticorpo pode fornecer informações importantes sobre a evolução da doença. Estes resultados indicam que o α-Gal acoplado à BSA ou ao Qβ-VLP poderia ser um potencial candidato para diagnóstico da infecção pelo T. cruzi. Sendo α-Gal altamente imunogênico, e não produzido em células ou tecidos de humanos, foi levantada a hipótese deste epítopo ser utilizado como partícula vacinal. Com isso, avaliamos, na outra parte deste trabalho, camundongos que não expressam o epítopo α-Gal em seus tecidos como modelos experimentais na infecção pelo T. cruzi. Esses camundongos foram mais eficientes em controlar a infecção, e a elevada produção de anticorpos líticos anti-α-Gal pode ser um dos mecanismos responsáveis por essa proteção, assim como pela maior sobrevivência encontrada quando estes animais foram desafiados com uma dose letal de tripomastigotas da cepa Y de T. cruzi.