Proteção contra a infecção por Leishmania (Leishmania) amazonensis pela imunização de camundongos BALB/c com peptídeos sintéticos selecionados por phage display e spot synthesis

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2008
Autor(a) principal: Miguel Angel Chavez Fumagalli
Orientador(a): Carlos Delfin Chavez Olortegui
Banca de defesa: Rubens Antonio Carneiro, Stella Maria Barrouin-Melo
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de Minas Gerais
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Phage display
Vacina
Spot synthesis
peptideo sintético
Leishmania amazonensis
Link de acesso: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-AF3SJB
Resumo: Leishmania amazonensis e um dos principais agentes etiologicos em um amplo espectro de formas clinicas de leishmanioses e apresenta ampla distribuicao geografica nas Americas, que coincide com areas comuns de transmissao de outras especies de Leishmania. Neste trabalho, a eficacia protetora induzida pela imunizacao com o polimero formado por dois peptideos sinteticos selecionados pelas tecnicas dePhage Display e Spot synthesis foi avaliada em camundongos BALB/c contra a infeccaodesafio com L. amazonensis. Os peptideos foram selecionados utilizando anticorpos da classe IgG purificados a partir de uma mistura de amostras de soro de caes com leishmaniose visceral. Foram obtidos tres clones de bacteriofagos expressando peptideos de interesse que apresentaram maior especificidade em relacao aosanticorpos IgGs purificados. Os peptideos sinteticos foram sintetizados pelo metodo de Spot synthesis (tecnica de sintese quimica de peptideos em membranas de celulose) e testados em experimentos de screening. Dois peptideos (denominados de 11H e 12A) foram reconhecidos pela tecnica de Spot synthesis e foram sintetizados nas suas formas soluveis; em seguida, foram conjugados covalentemente com glutaraldeido, originando um polimero de aproximadamente 30 kDa e nesta forma, usados como imunogeno. A imunizacao com o polimero foi capaz de induzir uma elevada resposta imune Th1 antes da infeccao. Apos o desafio, uma producao elevada de IFN-, baixos niveis de IL-4, IL-10 e anticorpos especificos ao parasita foram observados nestesanimais. Em contraste, camundongos dos grupos controle exibiram baixos niveis de IFN e niveis elevados de IL-4, IL-10 e anticorpos anti-parasita. Dessa forma, o polimero composto pelos dois peptideos mostrou-se como um bom candidato a vacina contra a Leishmaniose Tegumentar Americana.
id UFMG_a57c7c46cb83075e3bd6e70956a3c818
oai_identifier_str oai:repositorio.ufmg.br:1843/BUBD-AF3SJB
network_acronym_str UFMG
network_name_str Repositório Institucional da UFMG
repository_id_str
spelling Carlos Delfin Chavez OlorteguiRubens Antonio CarneiroStella Maria Barrouin-MeloMiguel Angel Chavez Fumagalli2019-08-12T05:16:35Z2019-08-12T05:16:35Z2008-08-21http://hdl.handle.net/1843/BUBD-AF3SJBLeishmania amazonensis e um dos principais agentes etiologicos em um amplo espectro de formas clinicas de leishmanioses e apresenta ampla distribuicao geografica nas Americas, que coincide com areas comuns de transmissao de outras especies de Leishmania. Neste trabalho, a eficacia protetora induzida pela imunizacao com o polimero formado por dois peptideos sinteticos selecionados pelas tecnicas dePhage Display e Spot synthesis foi avaliada em camundongos BALB/c contra a infeccaodesafio com L. amazonensis. Os peptideos foram selecionados utilizando anticorpos da classe IgG purificados a partir de uma mistura de amostras de soro de caes com leishmaniose visceral. Foram obtidos tres clones de bacteriofagos expressando peptideos de interesse que apresentaram maior especificidade em relacao aosanticorpos IgGs purificados. Os peptideos sinteticos foram sintetizados pelo metodo de Spot synthesis (tecnica de sintese quimica de peptideos em membranas de celulose) e testados em experimentos de screening. Dois peptideos (denominados de 11H e 12A) foram reconhecidos pela tecnica de Spot synthesis e foram sintetizados nas suas formas soluveis; em seguida, foram conjugados covalentemente com glutaraldeido, originando um polimero de aproximadamente 30 kDa e nesta forma, usados como imunogeno. A imunizacao com o polimero foi capaz de induzir uma elevada resposta imune Th1 antes da infeccao. Apos o desafio, uma producao elevada de IFN-, baixos niveis de IL-4, IL-10 e anticorpos especificos ao parasita foram observados nestesanimais. Em contraste, camundongos dos grupos controle exibiram baixos niveis de IFN e niveis elevados de IL-4, IL-10 e anticorpos anti-parasita. Dessa forma, o polimero composto pelos dois peptideos mostrou-se como um bom candidato a vacina contra a Leishmaniose Tegumentar Americana.Leishmania amazonensis is one of the major etiologic agents of a broad spectrum of clinical forms of leishmaniasis and has a wide geographical distribution in Americas, which overlaps with the areas of transmission of many other Leishmania species. In this work, the protective efficacy induced by immunization with a polymer originatedfrom two synthetic peptides selected by Phage Display and Spot-Synthesis techniques was evaluated in BALB/c mice against L. amazonensis challenge infection. Phagedisplayed peptides were screened using IgGs antibodies purified from serum samplesof dogs with active visceral leishmaniasis. Three clones were found to interact with antibodies and the corresponding synthetic peptides were synthesized by the Spot-Synthesis method on cellulose membrane. In the screening using the peptides, two of them (named 11H and 12A) were recognized in Spot-ELISA and, synthesized in their soluble form, covalently conjugated with glutaraldehyde originating a polymer ofapproximately 30 kDa and these was used as immunogen. Immunization with polymer was able to induce a Th1 immune response prior to infection. After challenge infection, a sustained IFN- production, low levels of IL-4, IL-10 and specific antiparasite antibodies were detected in this mices. In contrast, mice of the control groups displayed low levels of IFN- and high levels from IL-4, IL-10 and specific anti-parasiteantibodies. We concluded that the use of synthetic peptides can be an alternative approach to generate vaccines against American Tegumentary Leishmaniasis.Universidade Federal de Minas GeraisUFMGFarmacologiaPhage displayVacinaSpot synthesispeptideo sintéticoLeishmania amazonensisProteção contra a infecção por Leishmania (Leishmania) amazonensis pela imunização de camundongos BALB/c com peptídeos sintéticos selecionados por phage display e spot synthesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UFMGinstname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)instacron:UFMGORIGINALppgfarmacologiabioqmolecular_miguelangelchavezfumagalli_dissertacaomestrado.pdfapplication/pdf1348479https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/BUBD-AF3SJB/1/ppgfarmacologiabioqmolecular_miguelangelchavezfumagalli_dissertacaomestrado.pdf1bdbfd547b6b9df780bfd419df35b1ebMD51TEXTppgfarmacologiabioqmolecular_miguelangelchavezfumagalli_dissertacaomestrado.pdf.txtppgfarmacologiabioqmolecular_miguelangelchavezfumagalli_dissertacaomestrado.pdf.txtExtracted texttext/plain133149https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/BUBD-AF3SJB/2/ppgfarmacologiabioqmolecular_miguelangelchavezfumagalli_dissertacaomestrado.pdf.txtfb33677874ef5285e5fea1f36d90c6d3MD521843/BUBD-AF3SJB2019-11-14 08:18:49.8oai:repositorio.ufmg.br:1843/BUBD-AF3SJBRepositório de PublicaçõesPUBhttps://repositorio.ufmg.br/oaiopendoar:2019-11-14T11:18:49Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Proteção contra a infecção por Leishmania (Leishmania) amazonensis pela imunização de camundongos BALB/c com peptídeos sintéticos selecionados por phage display e spot synthesis
title Proteção contra a infecção por Leishmania (Leishmania) amazonensis pela imunização de camundongos BALB/c com peptídeos sintéticos selecionados por phage display e spot synthesis
spellingShingle Proteção contra a infecção por Leishmania (Leishmania) amazonensis pela imunização de camundongos BALB/c com peptídeos sintéticos selecionados por phage display e spot synthesis
Miguel Angel Chavez Fumagalli
Phage display
Vacina
Spot synthesis
peptideo sintético
Leishmania amazonensis
Farmacologia
title_short Proteção contra a infecção por Leishmania (Leishmania) amazonensis pela imunização de camundongos BALB/c com peptídeos sintéticos selecionados por phage display e spot synthesis
title_full Proteção contra a infecção por Leishmania (Leishmania) amazonensis pela imunização de camundongos BALB/c com peptídeos sintéticos selecionados por phage display e spot synthesis
title_fullStr Proteção contra a infecção por Leishmania (Leishmania) amazonensis pela imunização de camundongos BALB/c com peptídeos sintéticos selecionados por phage display e spot synthesis
title_full_unstemmed Proteção contra a infecção por Leishmania (Leishmania) amazonensis pela imunização de camundongos BALB/c com peptídeos sintéticos selecionados por phage display e spot synthesis
title_sort Proteção contra a infecção por Leishmania (Leishmania) amazonensis pela imunização de camundongos BALB/c com peptídeos sintéticos selecionados por phage display e spot synthesis
author Miguel Angel Chavez Fumagalli
author_facet Miguel Angel Chavez Fumagalli
author_role author
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Carlos Delfin Chavez Olortegui
dc.contributor.referee1.fl_str_mv Rubens Antonio Carneiro
dc.contributor.referee2.fl_str_mv Stella Maria Barrouin-Melo
dc.contributor.author.fl_str_mv Miguel Angel Chavez Fumagalli
contributor_str_mv Carlos Delfin Chavez Olortegui
Rubens Antonio Carneiro
Stella Maria Barrouin-Melo
dc.subject.por.fl_str_mv Phage display
Vacina
Spot synthesis
peptideo sintético
Leishmania amazonensis
topic Phage display
Vacina
Spot synthesis
peptideo sintético
Leishmania amazonensis
Farmacologia
dc.subject.other.pt_BR.fl_str_mv Farmacologia
description Leishmania amazonensis e um dos principais agentes etiologicos em um amplo espectro de formas clinicas de leishmanioses e apresenta ampla distribuicao geografica nas Americas, que coincide com areas comuns de transmissao de outras especies de Leishmania. Neste trabalho, a eficacia protetora induzida pela imunizacao com o polimero formado por dois peptideos sinteticos selecionados pelas tecnicas dePhage Display e Spot synthesis foi avaliada em camundongos BALB/c contra a infeccaodesafio com L. amazonensis. Os peptideos foram selecionados utilizando anticorpos da classe IgG purificados a partir de uma mistura de amostras de soro de caes com leishmaniose visceral. Foram obtidos tres clones de bacteriofagos expressando peptideos de interesse que apresentaram maior especificidade em relacao aosanticorpos IgGs purificados. Os peptideos sinteticos foram sintetizados pelo metodo de Spot synthesis (tecnica de sintese quimica de peptideos em membranas de celulose) e testados em experimentos de screening. Dois peptideos (denominados de 11H e 12A) foram reconhecidos pela tecnica de Spot synthesis e foram sintetizados nas suas formas soluveis; em seguida, foram conjugados covalentemente com glutaraldeido, originando um polimero de aproximadamente 30 kDa e nesta forma, usados como imunogeno. A imunizacao com o polimero foi capaz de induzir uma elevada resposta imune Th1 antes da infeccao. Apos o desafio, uma producao elevada de IFN-, baixos niveis de IL-4, IL-10 e anticorpos especificos ao parasita foram observados nestesanimais. Em contraste, camundongos dos grupos controle exibiram baixos niveis de IFN e niveis elevados de IL-4, IL-10 e anticorpos anti-parasita. Dessa forma, o polimero composto pelos dois peptideos mostrou-se como um bom candidato a vacina contra a Leishmaniose Tegumentar Americana.
publishDate 2008
dc.date.issued.fl_str_mv 2008-08-21
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2019-08-12T05:16:35Z
dc.date.available.fl_str_mv 2019-08-12T05:16:35Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/1843/BUBD-AF3SJB
url http://hdl.handle.net/1843/BUBD-AF3SJB
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal de Minas Gerais
dc.publisher.initials.fl_str_mv UFMG
publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal de Minas Gerais
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFMG
instname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)
instacron:UFMG
instname_str Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)
instacron_str UFMG
institution UFMG
reponame_str Repositório Institucional da UFMG
collection Repositório Institucional da UFMG
bitstream.url.fl_str_mv https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/BUBD-AF3SJB/1/ppgfarmacologiabioqmolecular_miguelangelchavezfumagalli_dissertacaomestrado.pdf
https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/BUBD-AF3SJB/2/ppgfarmacologiabioqmolecular_miguelangelchavezfumagalli_dissertacaomestrado.pdf.txt
bitstream.checksum.fl_str_mv 1bdbfd547b6b9df780bfd419df35b1eb
fb33677874ef5285e5fea1f36d90c6d3
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1797973320722808832

Registros relacionados