Avaliação do fenômeno de tolerância ao itraconazol em Cryptococcus neoformans

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Júlio Roger Evangelista dos Santos
• Orientador(a): Daniel de Assis Santos
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Minas Gerais
• Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Microbiologia
• Departamento: ICB - INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLOGICAS
• País: Brasil
• Palavras-chave em Português: Cryptococcus nerformans; Cryptococcus gattii; itraconazol; tolerância
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/1843/50885

Cryptococcus são leveduras encapsuladas que causam a criptococose. As principais espécies de importância clínica são Cryptococcus neoformans e C. gattii. Os fármacos utilizados para seu tratamento no Brasil são anfotericina B e derivados azólicos como o itraconazol. O tratamento é longo e muitas vezes ineficaz por mecanismos de adaptação do fungo, como a tolerância. A tolerância é definida como a capacidade de sobrevivência do fungo na presença da droga, mesmo não havendo alteração da concentração inibitória mínima (CIM). Nesse contexto, esse trabalho teve como objetivo avaliar a tolerância ao itraconazol em diferentes linhagens de C. neoformans e C. gattii. Inicialmente, foi avaliada a CIM de itraconazol para 53 linhagens de C. neoformans, sendo 17 linhagens selvagens e 36 linhagens com genes deletados, e 16 linhagens selvagens de C. gattii nas temperaturas de 30 ºC e 35 ºC. A CIM variou entre 0,03 e 2,00 µg/mL, apresentando um padrão de linhagens mais susceptíveis a 35 °C tanto para C. neoformans quanto para C. gattii. Posteriormente, selecionamos 17 linhagens com os maiores e menores valores de CIM, para análises de curva de crescimento nas concentrações de CIM, 2xCIM e 0,5CIM a fim de avaliar perfil de tolerância. Em seguida nós investigamos 10 dessas linhagens, que apresentaram crescimento na CIM para a análise de Unidades Formadoras de Colônias para verificar a viabilidade das células. Encontramos 4 linhagens capazes de crescer nas suas respectivas CIM, nas quais 2 foram capazes de crescer na CIM de 30 °C e 35 °C. A tolerância ao itraconazol causou uma mudança na morfologia dessas células, que apresentaram um aglomerado de células e o aspecto irregular se comparadas as linhagens não tratadas. As linhagens tolerantes ao itraconazol, que é um agente indutor de estresse oxidativo, não apresentaram um aumento na produção de espécies reativas de oxigênio e não houve alteração na produção de ergosterol que é um dos alvos desse fármaco. Estes resultados nos mostram que a resposta ao estresse oxidativo e a regulação do ergosterol podem ser alguns dos possíveis meios de adaptação que contribuíram para o fenômeno de tolerância.