Estudo da inibição do sistema complemento humano pela saliva de anofelinos (Diptera; Anophelinae) neotropicais

• Ano de defesa: 2015
• Autor(a) principal: Antonio Ferreira Mendes de Sousa
• Orientador(a): Nelder de Figueiredo Gontijo
• Banca de defesa: Nagila Francinete Costa Secundino, Sydnei Magno da Silva, Alvaro Cantini Nunes, Erika Martins Braga
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Minas Gerais
• Palavras-chave em Português: Glandulas salivares; Anopheles aquasalis; Sistema complemento; Anopheles albimanus; gSG7; Inibicao do complemento
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-AAGHUQ

Mosquitos pertencentes ao genero Anopheles sao os transmissoresnaturais de malaria no mundo. A transmissao ocorre durante a hematofagia, quando esses insetos inoculam na pele do hospedeiro formas infectantes do Plasmodium sp. juntamente com o conteudo de suas glandulas salivares. A saliva desses mosquitos contem moleculas importantes para o sucesso da hematofagia, como vasodilatadores e anticoagulantes. Entretanto, ha pouca informacao existente sobre a interacao de componentes salivares de anofelinos com o sistema imune do hospedeiro vertebrado. Este trabalho teve como objetivodemonstrar e caracterizar a atividade inibidora do sistema complemento na saliva de anofelinos, principalmente A. albimanus e A. aquasalis, importantes vetores de malaria na America Latina. Para isso, ensaios hemoliticos, ensaios de deposicao e Western blots para detectar ativacao de componentes do complemento foram realizados na presenca de extrato de glandulas salivares dos mosquitos. Os resultados desses experimentos mostraram inibicao significativa edose-dependente da via alternativa do sistema complemento pelo extrato de glandulas salivares das duas especies citadas. O inibidor salivar de A. albimanus foi purificado em HPLC e identificado por espectrometria de massa como sendo a proteina gSG7. O gene dessa proteina foi entao clonado e expresso em bacterias. A proteina recombinante apresentou atividade tao potente quanto o extrato deglandula salivar de A. albimanus. Anticorpos produzidos contra a recombinante foram capazes de reconhecer tanto a recombinante como a proteina nativa presente no extrato de glandulas, alem de bloquear a atividade das duas formas da proteina. Atraves de ensaio de ELISA e de ressonancia plasmonica de superficie, demonstramos que a gSG7 liga-se em properdina, um regulador positivo da via alternativa do complemento, bloqueando a acao estabilizadora dessa via. Esta e a primeira descricao de um inibidor do complemento na salivade mosquitos, e apresenta potencial importancia no processo hematofagico e na transmissao do Plasmodium sp.