Inibição da metaloproteinase 2 por dois monômeros amplamente utilizados na formulação de adesivos dentinários

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2009
Autor(a) principal: Carvalho, Rodrigo Varella de
Orientador(a): Etges, Adriana
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de Pelotas
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Odontologia
Departamento: Odontologia
País: BR
Palavras-chave em Português:
Palavras-chave em Inglês:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/123456789/2265
Resumo: The aim of this study was to evaluate the effect of different concentrations of 2-hydroxyethyl methacrylate (HEMA) triethyleneglycol dimethacrylate (TEGDMA) on the inhibition of matrix metalloproteinase 2 (MMP-2). Mouse gingival explants were cultured overnight in DMEM and the expression of secreted enzymes was analyzed by gelatin zymography in buffers containing 5 mM CaCl2 (Tris-CaCl2) in 50 mM Tris-HCl buffer with the addition of HEMA and TEGDMA at different concentrations (0.62, 1.25, 2.5 or 5.0% (v/v)). The gelatinolytic proteinase present in the conditioned media was characterized as matrix metalloproteinase by means of specific chemical inhibition with 0.5 mM of EDTA and 0.5 mM of NEM. The matrix metalloproteinases present in the conditioned media were characterized as MMP-2 by immunoprecipitation.The eletrophoretic bands were scanned and the transmittance values were analyzed with ImageJ software. Data was plotted and submitted to linear regression to investigate MMP-2 inhibition as a function of HEMA and TEGDMA concentration. Three major bands were detected in the zymographic assays. Those bands were characterized as MMP-2. Zymogene (72 kDa), intermediate (66 kDa) and active forms of MMP-2 (62 kDa) were inhibited by HEMA and TEGDMA in a dose-dependent way. These findings suggest that HEMA and TEGDMA could inhibit MMP-2 expression even at small concentrations.
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Mouse gingival explants were cultured overnight in DMEM and the expression of secreted enzymes was analyzed by gelatin zymography in buffers containing 5 mM CaCl2 (Tris-CaCl2) in 50 mM Tris-HCl buffer with the addition of HEMA and TEGDMA at different concentrations (0.62, 1.25, 2.5 or 5.0% (v/v)). The gelatinolytic proteinase present in the conditioned media was characterized as matrix metalloproteinase by means of specific chemical inhibition with 0.5 mM of EDTA and 0.5 mM of NEM. The matrix metalloproteinases present in the conditioned media were characterized as MMP-2 by immunoprecipitation.The eletrophoretic bands were scanned and the transmittance values were analyzed with ImageJ software. Data was plotted and submitted to linear regression to investigate MMP-2 inhibition as a function of HEMA and TEGDMA concentration. Three major bands were detected in the zymographic assays. Those bands were characterized as MMP-2. Zymogene (72 kDa), intermediate (66 kDa) and active forms of MMP-2 (62 kDa) were inhibited by HEMA and TEGDMA in a dose-dependent way. These findings suggest that HEMA and TEGDMA could inhibit MMP-2 expression even at small concentrations.O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito de diferentes concentrações de 2-hidroxietil metacrilato (HEMA) e trietilenoglicol dimetacrilato (TEGDMA) na inibição da metaloproteinase da matriz 2 (MMP-2). Tecidos gengivais de ratos foram incubados em DMEM e a expressão das enzimas secretadas foi analisada por zimografia em tampões de incubação contendo 5 mM de CaCl2 (Tris-CaCl2) em 50 mM de Tris-HCl com a adição de diferentes concentrações de HEMA e TEGDMA (0,62; 1,25; 2,5 e 5%) em volume. Para caracterizar as enzimas como MMPs foi realizado ensaio de inibição química específica com 0,5 mM de EDTA (um conhecido inibidor de MMPs) e 0,5 de NEM (um conhecido inibidor de proteinases serinas).Para caracterizar as enzimas como MMP-2 foi realizado o ensaio de imunoprecipitação. As bandas produzidas no gel foram escaneadas e os valores de transmitância foram analizados com o auxílio do programa ImageJ. Os resultados foram submetidos a regressão linear em função da concentração de HEMA e TEGDMA. Três bandas foram identificadas após a zimografia. Essas bandas foram caracterizadas como MMP-2. O zimogênio (72 kDa), a forma intermediária (66 kDa) e a forma ativa da MMP-2 (62 kDa) foram inibidas pelo HEMA e pelo TEGDMA de forma dose-dependente. Nossos resultados sugerem que o HEMA e o TEGDMA podem inibir a expressão da MMP-2 mesmo em pequenas concentrações.porUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em OdontologiaUFPelBROdontologiaMetaloproteinases da matriz extracellularMetalloproteinase 2Gelatinase A2-hidroxietil metacrilatoTrietilenoglicol dimetacrilatoAdesivos dentináriosColágenoCamada híbridaMatrix metalloproteinasesMetalloproteinase 2Gelatinase A2-hydroxyethil methacrylateTryetilenoglycol dimethacrylateDentin bonding agentsCollagenHybrid layerCNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::ODONTOLOGIAInibição da metaloproteinase 2 por dois monômeros amplamente utilizados na formulação de adesivos dentináriosInhibition of metalloproteinase 2 by two monomers thoroughly used on the dentin bonding formulation.info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELTEXTInibição da metaloproteinase 2 por dois monômeros amplamente utilizados na formulação de adesivos dentinários.pdf.txtInibição da metaloproteinase 2 por dois monômeros amplamente utilizados na formulação de adesivos dentinários.pdf.txtExtracted texttext/plain97894http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/123456789/2265/2/Inibi%c3%a7%c3%a3o%20da%20metaloproteinase%202%20por%20dois%20mon%c3%b4meros%20amplamente%20utilizados%20na%20formula%c3%a7%c3%a3o%20de%20adesivos%20dentin%c3%a1rios.pdf.txt4d2dfdcd31e26c9d849bc7618d0e918eMD52open accessTHUMBNAILInibição da metaloproteinase 2 por dois monômeros amplamente utilizados na formulação de adesivos dentinários.pdf.jpgInibição da metaloproteinase 2 por dois monômeros amplamente utilizados na formulação de adesivos dentinários.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1779http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/123456789/2265/3/Inibi%c3%a7%c3%a3o%20da%20metaloproteinase%202%20por%20dois%20mon%c3%b4meros%20amplamente%20utilizados%20na%20formula%c3%a7%c3%a3o%20de%20adesivos%20dentin%c3%a1rios.pdf.jpge8f2891e61e28b073368e2e92dd1a65aMD53open accessORIGINALInibição da metaloproteinase 2 por dois monômeros amplamente utilizados na formulação de adesivos dentinários.pdfInibição da metaloproteinase 2 por dois monômeros amplamente utilizados na formulação de adesivos dentinários.pdfapplication/pdf1229107http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/123456789/2265/1/Inibi%c3%a7%c3%a3o%20da%20metaloproteinase%202%20por%20dois%20mon%c3%b4meros%20amplamente%20utilizados%20na%20formula%c3%a7%c3%a3o%20de%20adesivos%20dentin%c3%a1rios.pdfa90787317f111812c78d5c09bc1302deMD51open access123456789/22652023-07-13 03:25:36.206open accessoai:guaiaca.ufpel.edu.br:123456789/2265Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.ufpel.edu.br/oai/requestrippel@ufpel.edu.br || repositorio@ufpel.edu.br || aline.batista@ufpel.edu.bropendoar:2023-07-13T06:25:36Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca - Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)false
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