Expressão de anexina II em oócitos e no desenvolvimento embrionário bovino

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2004
Autor(a) principal: Costa, Luís Fabiano Santos da lattes
Orientador(a): Gonçalves, Paulo Bayard Dias lattes
Banca de defesa: Mello, Carlos Fernando de lattes, Barreto, Katia Padilha lattes
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de Santa Maria
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária
Departamento: Medicina Veterinária
País: BR
Palavras-chave em Português:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: http://repositorio.ufsm.br/handle/1/4080
Resumo: The present study as conducted to examine semiquantitative gene expression of annexin II (ANEII) during all follicular phases of folliculogenesis in bovine, in preantral follicles and oocytes of antral follicles too in different size (<3mm, 5-8mm e >9mm in diameter). It was investigated the gene expression of ANEII influenced by retinol during oocyte maturation. In addition we examine annexin II (ANEII) presence during embryonic development and regulation of gene expression to ANEII by retinol and insulin like growth factor (IGF-I) was availed. Bovine ovaries from adults and fetal females was collected in abattoir and cumulus-oocyte complexes and preantral follicles were recovered. mRNA extraction and cDNA formation was carried out to produce ANEII amplification by polymerase chain reaction. Bovine embryos were used at initial phases of development from in vitro production in SOF medium or retinol and/or IGF-I supplemented. Bovine embryos were submitted to mRNA extraction and cDNA formation and ANEII amplification was obtained by polymerase chain reaction (PCR). Preantral follicles at secondary stages presented gene expression to ANEII. Oocytes from different follicular sources in germinal vesicle (GV) stage were significantly different (p<0,05) in gene expression. Gene expression to ANEII in oocytes of larger 8mm follicles were significantly higher than those from 3mm and 5-8mm (p<0,05). The similar results were obtained in metaphase II (MII) phase. However difference was not observed between oocytes from 3mm and 5-8mm follicles. Oocytes from follicles larger 8mm presented higher ANEII expression than those from 3mm follicles, but difference was not observed to the oocytes from 5-8mm (p<0,05). The ANEII gene expression was increase with retinol supplementation during maturation process in contrast to control group (p<0,05). The ANEII was present during early embryonic development except in 16 cells. The rate of embryo production was increased by supplementation with retinol in culture medium (p<0,05) in contrast with control and IGF-I group. The control group (20,5%; 24/117) was similar with IGF-I group (25,8%; 24/93) and both were significantly lower than retinol (37,8%; 45/119). Semi quantitative analyses of ANEII gene expression was significantly higher in control group than retinol or IGF-I embryo treated (p<0,05). However retinol and IGF-I were not different. ANEII have more expression in oocytes in capacitating process. Retinol increases the mRNA availability to ANEII and could be involved in oocyte competence. In conclusion, in vitro embryo production is increased by retinol supplementation and could be regulating the gene expression of ANEII during embryo development. Decrease in gene expression to ANEII determines a qualitative and quantitative increase in in vitro embryo production.
id UFSM-20_ee080a431d76f46581926d33fc6093b4
oai_identifier_str oai:repositorio.ufsm.br:1/4080
network_acronym_str UFSM-20
network_name_str Manancial - Repositório Digital da UFSM
repository_id_str
spelling 2017-06-142017-06-142004-08-31COSTA, Luís Fabiano Santos da. Annexin II gene expression in bovine oocytes and embrionic development. 2004. 96 f. Tese (Doutorado em Medicina Veterinária) - Universidade Federal de Santa Maria, Santa Maria, 2004.http://repositorio.ufsm.br/handle/1/4080The present study as conducted to examine semiquantitative gene expression of annexin II (ANEII) during all follicular phases of folliculogenesis in bovine, in preantral follicles and oocytes of antral follicles too in different size (<3mm, 5-8mm e >9mm in diameter). It was investigated the gene expression of ANEII influenced by retinol during oocyte maturation. In addition we examine annexin II (ANEII) presence during embryonic development and regulation of gene expression to ANEII by retinol and insulin like growth factor (IGF-I) was availed. Bovine ovaries from adults and fetal females was collected in abattoir and cumulus-oocyte complexes and preantral follicles were recovered. mRNA extraction and cDNA formation was carried out to produce ANEII amplification by polymerase chain reaction. Bovine embryos were used at initial phases of development from in vitro production in SOF medium or retinol and/or IGF-I supplemented. Bovine embryos were submitted to mRNA extraction and cDNA formation and ANEII amplification was obtained by polymerase chain reaction (PCR). Preantral follicles at secondary stages presented gene expression to ANEII. Oocytes from different follicular sources in germinal vesicle (GV) stage were significantly different (p<0,05) in gene expression. Gene expression to ANEII in oocytes of larger 8mm follicles were significantly higher than those from 3mm and 5-8mm (p<0,05). The similar results were obtained in metaphase II (MII) phase. However difference was not observed between oocytes from 3mm and 5-8mm follicles. Oocytes from follicles larger 8mm presented higher ANEII expression than those from 3mm follicles, but difference was not observed to the oocytes from 5-8mm (p<0,05). The ANEII gene expression was increase with retinol supplementation during maturation process in contrast to control group (p<0,05). The ANEII was present during early embryonic development except in 16 cells. The rate of embryo production was increased by supplementation with retinol in culture medium (p<0,05) in contrast with control and IGF-I group. The control group (20,5%; 24/117) was similar with IGF-I group (25,8%; 24/93) and both were significantly lower than retinol (37,8%; 45/119). Semi quantitative analyses of ANEII gene expression was significantly higher in control group than retinol or IGF-I embryo treated (p<0,05). However retinol and IGF-I were not different. ANEII have more expression in oocytes in capacitating process. Retinol increases the mRNA availability to ANEII and could be involved in oocyte competence. In conclusion, in vitro embryo production is increased by retinol supplementation and could be regulating the gene expression of ANEII during embryo development. Decrease in gene expression to ANEII determines a qualitative and quantitative increase in in vitro embryo production.O objetivo do presente estudo foi determinar o perfil de expressão de anexina II (ANEII) em folículos pré-antrais, oócitos e desenvolvimento embrionário bovino, e sua regulação pelo retinol e fator de crescimento semelhante à insulina-I (IGF-I). Expressão de ANEII foi verificada em folículos primordial, primário e secundário, em oócitos de folículos antrais de diferentes tamanhos (<3mm, 5-8mm e >8mm de diâmetro), em embriões de 2, 4, 8, 16 e 32 células e em blastocisto e blastocisto expandido. Além disso, foi investigada a influência do retinol sobre a expressão de ANEII em oócitos e no desenvolvimento embrionário e, neste último, também foi estudada a participação do IGF-I na expressão dessa proteína. Ovários de fêmeas bovinas adultas e de fetos foram coletados em abatedouro e submetidos a punção folicular ou isolamento de folículos pré-antrais. Complexos cumulus-oócito e folículos préantrais foram processados para extração de RNAm, obtenção de cDNA e realizado reação da polimerase em cadeia (PCR) com oligonucleotídeos específicos para ANEII. Foram utilizados embriões bovinos produzidos in vitro em diferentes estádios de desenvolvimento em meio SOF e também suplementados com retinol e IGF-I. Os embriões foram processados para extração de RNAm, obtenção de cDNA e realizada a reação da polimerase em cadeia (PCR) com oligonucleotídeos específicos para ANEII. Apenas folículos préantrais secundários apresentaram expressão de ANEII. Em estádio de vesícula germinativa (VG), os oócitos oriundos de diferentes tamanhos foliculares diferiram entre si (p<0,05) quanto à expressão de ANEII, onde oócitos de folículos <3mm e de 5-8mm foram significativamente inferiores aos oócitos de folículos >8mm. Em metáfase II (MII), oócitos de folículos <3mm apresentaram menor expressão de ANEII em relação à oócitos de folículos >8mm (p<0,05) e não diferiram de oócitos de folículos de 5-8mm. No entanto, oócitos de folículos de 5-8mm foram similar na expressão de ANEII aos oócitos de folículos >8mm. O retinol utilizado no período de maturação promoveu um incremento na expressão de ANEII quando comparado ao controle (p<0,05). A ANEII está presente em todos os estádios de desenvolvimento embrionário precoce, com exceção em embriões de 16 células. A utilização de retinol durante o desenvolvimento embrionário, promoveu um incremento significativo (p<0,05) na produção de blastocisto, avaliados no dia 6 após a fecundação, em relação ao grupo controle e ao grupo IGF-I. No grupo controle foi obtido um percentual de 20,5% (24/117) de blastocistos sobre o número total de oócitos cultivados, não diferindo do grupo IGF-I, onde se obteve um índice de 25,8% (24/93) de blastocistos. No grupo retinol, o percentual de blastocisto foi significativamente superior com 37,8% (45/119). Na avaliação semiquantitativa da expressão de ANEII em embriões produzidos em meio suplementado com IGF-I (10ng/ml de meio) ou retinol (0,1ng/ml de meio), foi observado uma menor expressão de ANEII quando estas substâncias estavam presentes no meio em relação ao controle (p<0,05). A expressão semiquantitativa de ANEII não diferiu entre os grupos retinol e IGF-I. A ANEII tem uma maior expressão em oócitos capacitados e o retinol aumenta a disponibilidade de RNAm para ANEII, podendo estar envolvido na regulação da competência oocitária por diminuir a tradução ou evitar a degradação. A produção de embriões in vitro é incrementada na presença de retinol que atua modulando a expressão de ANEII durante o desenvolvimento embrionário. A diminuição na expressão de ANEII na embriogênese de bovinos determina um aumento qualitativo e quantitativo na produção in vitro de embriões.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superiorapplication/pdfporUniversidade Federal de Santa MariaPrograma de Pós-Graduação em Medicina VeterináriaUFSMBRMedicina VeterináriaBovinosOócitosReprodução animalEmbriogeneseCNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIAExpressão de anexina II em oócitos e no desenvolvimento embrionário bovinoAnnexin II gene expression in bovine oocytes and embrionic developmentinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisGonçalves, Paulo Bayard Diashttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4781845H4Mello, Carlos Fernando dehttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4782674D2Barreto, Katia Padilhahttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4727510Z9http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4794804D6Costa, Luís Fabiano Santos da500500000007400300300500500fcd33ccc-f08d-428c-b7da-9d3757cf0a963b36e846-50fc-45f5-ae55-c9f1c19c23102eae42ef-4267-45db-b60a-1bce1a137e9d7d233f19-66ff-4aca-a9fc-784eddf6b946info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Manancial - Repositório Digital da UFSMinstname:Universidade Federal de Santa Maria (UFSM)instacron:UFSMORIGINALLUISFABIANO.pdfTese de Doutoradoapplication/pdf209038http://repositorio.ufsm.br/bitstream/1/4080/1/LUISFABIANO.pdf835d1c63d6e1219e7e426fbfe5619616MD51TEXTLUISFABIANO.pdf.txtLUISFABIANO.pdf.txtExtracted texttext/plain125730http://repositorio.ufsm.br/bitstream/1/4080/2/LUISFABIANO.pdf.txt15bab5013c0f6d5906f6051892bcabf6MD52THUMBNAILLUISFABIANO.pdf.jpgLUISFABIANO.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg4958http://repositorio.ufsm.br/bitstream/1/4080/3/LUISFABIANO.pdf.jpg6602928e883af8b0ceedebe497fe442fMD531/40802017-12-02 13:17:11.137oai:repositorio.ufsm.br:1/4080Repositório Institucionalhttp://repositorio.ufsm.br/PUBhttp://repositorio.ufsm.br/oai/requestopendoar:39132017-12-02T15:17:11Manancial - Repositório Digital da UFSM - Universidade Federal de Santa Maria (UFSM)false
dc.title.por.fl_str_mv Expressão de anexina II em oócitos e no desenvolvimento embrionário bovino
dc.title.alternative.eng.fl_str_mv Annexin II gene expression in bovine oocytes and embrionic development
title Expressão de anexina II em oócitos e no desenvolvimento embrionário bovino
spellingShingle Expressão de anexina II em oócitos e no desenvolvimento embrionário bovino
Costa, Luís Fabiano Santos da
Bovinos
Oócitos
Reprodução animal
Embriogenese
CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA
title_short Expressão de anexina II em oócitos e no desenvolvimento embrionário bovino
title_full Expressão de anexina II em oócitos e no desenvolvimento embrionário bovino
title_fullStr Expressão de anexina II em oócitos e no desenvolvimento embrionário bovino
title_full_unstemmed Expressão de anexina II em oócitos e no desenvolvimento embrionário bovino
title_sort Expressão de anexina II em oócitos e no desenvolvimento embrionário bovino
author Costa, Luís Fabiano Santos da
author_facet Costa, Luís Fabiano Santos da
author_role author
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Gonçalves, Paulo Bayard Dias
dc.contributor.advisor1Lattes.fl_str_mv http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4781845H4
dc.contributor.referee1.fl_str_mv Mello, Carlos Fernando de
dc.contributor.referee1Lattes.fl_str_mv http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4782674D2
dc.contributor.referee2.fl_str_mv Barreto, Katia Padilha
dc.contributor.referee2Lattes.fl_str_mv http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4727510Z9
dc.contributor.authorLattes.fl_str_mv http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4794804D6
dc.contributor.author.fl_str_mv Costa, Luís Fabiano Santos da
contributor_str_mv Gonçalves, Paulo Bayard Dias
Mello, Carlos Fernando de
Barreto, Katia Padilha
dc.subject.por.fl_str_mv Bovinos
Oócitos
Reprodução animal
Embriogenese
topic Bovinos
Oócitos
Reprodução animal
Embriogenese
CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA
dc.subject.cnpq.fl_str_mv CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA
description The present study as conducted to examine semiquantitative gene expression of annexin II (ANEII) during all follicular phases of folliculogenesis in bovine, in preantral follicles and oocytes of antral follicles too in different size (<3mm, 5-8mm e >9mm in diameter). It was investigated the gene expression of ANEII influenced by retinol during oocyte maturation. In addition we examine annexin II (ANEII) presence during embryonic development and regulation of gene expression to ANEII by retinol and insulin like growth factor (IGF-I) was availed. Bovine ovaries from adults and fetal females was collected in abattoir and cumulus-oocyte complexes and preantral follicles were recovered. mRNA extraction and cDNA formation was carried out to produce ANEII amplification by polymerase chain reaction. Bovine embryos were used at initial phases of development from in vitro production in SOF medium or retinol and/or IGF-I supplemented. Bovine embryos were submitted to mRNA extraction and cDNA formation and ANEII amplification was obtained by polymerase chain reaction (PCR). Preantral follicles at secondary stages presented gene expression to ANEII. Oocytes from different follicular sources in germinal vesicle (GV) stage were significantly different (p<0,05) in gene expression. Gene expression to ANEII in oocytes of larger 8mm follicles were significantly higher than those from 3mm and 5-8mm (p<0,05). The similar results were obtained in metaphase II (MII) phase. However difference was not observed between oocytes from 3mm and 5-8mm follicles. Oocytes from follicles larger 8mm presented higher ANEII expression than those from 3mm follicles, but difference was not observed to the oocytes from 5-8mm (p<0,05). The ANEII gene expression was increase with retinol supplementation during maturation process in contrast to control group (p<0,05). The ANEII was present during early embryonic development except in 16 cells. The rate of embryo production was increased by supplementation with retinol in culture medium (p<0,05) in contrast with control and IGF-I group. The control group (20,5%; 24/117) was similar with IGF-I group (25,8%; 24/93) and both were significantly lower than retinol (37,8%; 45/119). Semi quantitative analyses of ANEII gene expression was significantly higher in control group than retinol or IGF-I embryo treated (p<0,05). However retinol and IGF-I were not different. ANEII have more expression in oocytes in capacitating process. Retinol increases the mRNA availability to ANEII and could be involved in oocyte competence. In conclusion, in vitro embryo production is increased by retinol supplementation and could be regulating the gene expression of ANEII during embryo development. Decrease in gene expression to ANEII determines a qualitative and quantitative increase in in vitro embryo production.
publishDate 2004
dc.date.issued.fl_str_mv 2004-08-31
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2017-06-14
dc.date.available.fl_str_mv 2017-06-14
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
format doctoralThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.citation.fl_str_mv COSTA, Luís Fabiano Santos da. Annexin II gene expression in bovine oocytes and embrionic development. 2004. 96 f. Tese (Doutorado em Medicina Veterinária) - Universidade Federal de Santa Maria, Santa Maria, 2004.
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://repositorio.ufsm.br/handle/1/4080
identifier_str_mv COSTA, Luís Fabiano Santos da. Annexin II gene expression in bovine oocytes and embrionic development. 2004. 96 f. Tese (Doutorado em Medicina Veterinária) - Universidade Federal de Santa Maria, Santa Maria, 2004.
url http://repositorio.ufsm.br/handle/1/4080
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.cnpq.fl_str_mv 500500000007
dc.relation.confidence.fl_str_mv 400
300
300
500
500
dc.relation.authority.fl_str_mv fcd33ccc-f08d-428c-b7da-9d3757cf0a96
3b36e846-50fc-45f5-ae55-c9f1c19c2310
2eae42ef-4267-45db-b60a-1bce1a137e9d
7d233f19-66ff-4aca-a9fc-784eddf6b946
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal de Santa Maria
dc.publisher.program.fl_str_mv Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária
dc.publisher.initials.fl_str_mv UFSM
dc.publisher.country.fl_str_mv BR
dc.publisher.department.fl_str_mv Medicina Veterinária
publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal de Santa Maria
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Manancial - Repositório Digital da UFSM
instname:Universidade Federal de Santa Maria (UFSM)
instacron:UFSM
instname_str Universidade Federal de Santa Maria (UFSM)
instacron_str UFSM
institution UFSM
reponame_str Manancial - Repositório Digital da UFSM
collection Manancial - Repositório Digital da UFSM
bitstream.url.fl_str_mv http://repositorio.ufsm.br/bitstream/1/4080/1/LUISFABIANO.pdf
http://repositorio.ufsm.br/bitstream/1/4080/2/LUISFABIANO.pdf.txt
http://repositorio.ufsm.br/bitstream/1/4080/3/LUISFABIANO.pdf.jpg
bitstream.checksum.fl_str_mv 835d1c63d6e1219e7e426fbfe5619616
15bab5013c0f6d5906f6051892bcabf6
6602928e883af8b0ceedebe497fe442f
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Manancial - Repositório Digital da UFSM - Universidade Federal de Santa Maria (UFSM)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1794524304511074304