Isolamento, purificação e caracterização molecular de bacteriófagos específicos para Escherichia coli causadora de mastite bovina

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2011
Autor(a) principal: Dias, Roberto Sousa
Orientador(a): Paula, Sérgio Oliveira de lattes
Banca de defesa: Mantovani, Hilário Cuquetto lattes, Silva, Eduardo de Almeida Marques da lattes
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de Viçosa
Programa de Pós-Graduação: Mestrado em Biologia Celular e Estrutural
Departamento: Análises quantitativas e moleculares do Genoma; Biologia das células e dos tecidos
País: BR
Palavras-chave em Português:
Palavras-chave em Inglês:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: http://locus.ufv.br/handle/123456789/2338
Resumo: The bovine mastitis causes serious damage to both the producer and the dairy industry. Caused by various pathogens, divided into two main groups: environmental and contagious. While the number of cases of contagious mastitis has decreased, cases caused by environmental pathogens is greatest, and Escherichia coli the primary etiologic agent. There is a significant increase in the number of new cases caused by this bacterium, which is currently the main driver of mastitis cases that culminate in the death of the animal. The frequent emergence of multi-drug resistant strains and highly pathogenic becomes necessary to study alternatives to the use of antibiotics. So bacteriophages, viruses that infect bacteria and are highly specific, appear as a viable option mainly due to the low cost and speed with which you can isolate a specific new phage against resistant strains. Recent studies of the genetics of bacterial phages and make safer the use of fagoterapia, necessitating molecular studies, to obtain data regarding the possible use of them in fagoterapia. In this context, were isolated 15 bacteriophages specific to Escherichia coli strains, isolated in herds affected by bovine mastitis. The isolates were characterized with respect to their proteinprofile, indicating the presence of two proteins of low molecular weight, composition of double-stranded DNA genome of about 44 kb. In order to reduce costs and time to obtain suspensions with a high degree of purity, was a standardized methodology for purification by ion exchange chromatography in a FPLC system, it is possible to obtain viral suspensions with a appreciable purity.
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Dissertação (Mestrado em Análises quantitativas e moleculares do Genoma; Biologia das células e dos tecidos) - Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, 2011.http://locus.ufv.br/handle/123456789/2338The bovine mastitis causes serious damage to both the producer and the dairy industry. Caused by various pathogens, divided into two main groups: environmental and contagious. While the number of cases of contagious mastitis has decreased, cases caused by environmental pathogens is greatest, and Escherichia coli the primary etiologic agent. There is a significant increase in the number of new cases caused by this bacterium, which is currently the main driver of mastitis cases that culminate in the death of the animal. The frequent emergence of multi-drug resistant strains and highly pathogenic becomes necessary to study alternatives to the use of antibiotics. So bacteriophages, viruses that infect bacteria and are highly specific, appear as a viable option mainly due to the low cost and speed with which you can isolate a specific new phage against resistant strains. Recent studies of the genetics of bacterial phages and make safer the use of fagoterapia, necessitating molecular studies, to obtain data regarding the possible use of them in fagoterapia. In this context, were isolated 15 bacteriophages specific to Escherichia coli strains, isolated in herds affected by bovine mastitis. The isolates were characterized with respect to their proteinprofile, indicating the presence of two proteins of low molecular weight, composition of double-stranded DNA genome of about 44 kb. In order to reduce costs and time to obtain suspensions with a high degree of purity, was a standardized methodology for purification by ion exchange chromatography in a FPLC system, it is possible to obtain viral suspensions with a appreciable purity.A mastite bovina causa sérios prejuízos tanto ao produtor, quanto à indústria de produtos lácteos. É causada por diversos patógenos, divididos em dois grupos principais: ambientais e contagiosos. Enquanto o número de casos de mastite contagiosa vem diminuindo, os casos causados por patógenos ambientais aumentam, sendo a Escherichia coli o principal agente etiológico. Há um significativo aumento no número de novos casos causados por essa bactéria, sendo atualmente o principal responsável por casos de mastite que culminam com a morte do animal. O surgimento cada vez mais freqüente de linhagens multidroga resistentes e altamente patogênicas torna necessário o estudo de alternativas ao uso da antibioticoterapia. Assim os bacteriófagos, vírus que infectam bactérias e são altamente específicos, surgem como uma opção viável devido principalmente ao baixo custo e a rapidez com que é possível isolar um novo fago específico a linhagens resistentes. Estudos recentes da genética dos fagos e bacteriana tornam mais seguro o uso da fagoterapia, o que torna necessário estudos moleculares, visando obter dados com relação a possível utilização dos mesmos na fagoterapia. Neste contexto, foram isolados 15 bacteriófagos específicos para linhagens de Escherichia coli isoladas em rebanhos acometidos pela mastite bovina. Os isolados foram caracterizados com relação ao seu perfil protéico, evidenciando a presença de 2 proteínas de baixo peso molecular, composição genômica de DNA dupla fita com cerca de 44 kb. Com o objetivo de reduzir os custos e o tempo na obtenção de suspensões com alto grau de pureza, foi padronizada uma metodologia de purificação por cromatografia de troca iônica em um sistema FPLC, sendo possível a obtenção de suspensões virais com grau de pureza apreciável.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superiorapplication/pdfporUniversidade Federal de ViçosaMestrado em Biologia Celular e EstruturalUFVBRAnálises quantitativas e moleculares do Genoma; Biologia das células e dos tecidosMastite bovinaBacteriófagosEscherichia coliCromatografiaBovine mastitis, Bacteriophages, Escherichia coliChromatographyCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOLOGIA GERALIsolamento, purificação e caracterização molecular de bacteriófagos específicos para Escherichia coli causadora de mastite bovinaIsolation, purification and molecular characterization of bacteriophages specific for Escherichia coli causing bovine mastitisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:LOCUS Repositório Institucional da UFVinstname:Universidade Federal de Viçosa (UFV)instacron:UFVORIGINALtexto completo.pdfapplication/pdf2105181https://locus.ufv.br//bitstream/123456789/2338/1/texto%20completo.pdf0b882b69023aa9831f272c1aa001f55cMD51TEXTtexto completo.pdf.txttexto completo.pdf.txtExtracted texttext/plain100587https://locus.ufv.br//bitstream/123456789/2338/2/texto%20completo.pdf.txt49248d87657a316d76ca102d3b5616baMD52THUMBNAILtexto completo.pdf.jpgtexto completo.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg3636https://locus.ufv.br//bitstream/123456789/2338/3/texto%20completo.pdf.jpgaeef51107adbbaccc88207c25b8b8ba0MD53123456789/23382016-04-08 23:05:03.443oai:locus.ufv.br:123456789/2338Repositório InstitucionalPUBhttps://www.locus.ufv.br/oai/requestfabiojreis@ufv.bropendoar:21452016-04-09T02:05:03LOCUS Repositório Institucional da UFV - Universidade Federal de Viçosa (UFV)false
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