Estudo funcional da regulação transcricional e traducional da albumina no trato reprodutor masculino e na fertilidade

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2018
Autor(a) principal: Barbieri, Mainara Ferreira, 1987-
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: [s.n.]
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Albumina
Testículos
Epidídimo
Vasos deferentes
Andrógenos
Albumin
Testis
Epididymis
Vas deferens
Androgens
Link de acesso: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1637711
Resumo: Orientadores: Luis Antonio Violin Dias Pereira, Lúcia Elvira Alvares
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spelling Estudo funcional da regulação transcricional e traducional da albumina no trato reprodutor masculino e na fertilidadeFunctional study of albumin transcriptional and translational regulation in the male reproductive tract and fertilityAlbuminaTestículosEpidídimoVasos deferentesAndrógenosAlbuminTestisEpididymisVas deferensAndrogensOrientadores: Luis Antonio Violin Dias Pereira, Lúcia Elvira AlvaresTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: A albumina e sua família gênica desempenham importantes funções de manutenção no organismo, não sendo alvos comuns da seleção natural. O provável envolvimento dessa molécula na reprodução de mamíferos, no entanto, parece destoar dessa premissa. Testando sua condição constitutiva, esse estudo priorizou a análise de abordagens integrativas do sistema testículo-epidídimo-ducto deferente e se propôs a realizar, em camundongos adultos C57Bl6, via experimentações cirúrgicas (orquidectomia, ligadura de túbulos eferentes, criptorquidismo e orquidopexia) e intervenções farmacológicas (flutamida e finasterida) a indução de microambientes, os quais permitiram a emersão de cenários de sinalização e da expressão de fatores-chave ao contexto da fertilidade. Tais interpretações foram mensuradas via investigação transcricional (RT-PCR e PCR quantitativo), traducional (imuno-histoquímica, morfometria e immunoblotting) e funcional (fertilização in vitro; FIV). O cenário induzido pela interferência da orquidectomia evidenciou que os eventos de síntese e secreção da albumina no epidídimo e ducto deferente são regulados pela disponibilidade de testosterona bioativa, ainda que, isoladamente, esse estímulo não seja suficiente para manutenção do padrão total de expressão gênico e proteico da albumina nas orquidectomias unilaterais (estímulo androgênico endógeno) ou nas bilaterais com reposição de cipionato de testosterona injetável (estímulo androgênico exógeno), sinalizando provável dependência de fatores luminais testiculares e/ou testosterona por ação parácrina. Outros metabólitos, além da testosterona, influenciaram na síntese e secreção de albumina, como a diidrotestosterona (cenário de modulação hormonal por finasterida), principalmente em epidídimo e ducto deferente. Houve falha no papel antagonista exercido pela flutamida, no cenário da expressão/presença da albumina. Evidenciado pelo contexto da ligadura de túbulos eferentes, sinalizou-se a dependência da albumina da presença ipsilateral de fluido luminal advindo do testículo, principalmente pela alteração da expressão/presença de albumina no segmento inicial do epidídimo. Soma-se a esse cenário de dependência, a presença de espermatozoides (ausentes no contexto do criptorquidismo) e/ou estresse térmico (hipertermia), nos quais, apesar da manutenção de estímulos androgênicos, testículo e fatores luminais, a expressão/presença de albumina mostra-se alterada em todos os órgãos analisados, sendo somente parcialmente restaurada após o retorno da espermatogênese à normalidade (orquidopexia). Ademais à orquestração dos eventos de espermatogênese, experimentos de FIV demonstraram a capacidade da albumina de transcender sua usual atribuição constitutiva, relacionando-se à interação espermatozoide-zona pelúcida (possivelmente via reação acrossômica) e operando como agente potencializador mesmo em contextos de variação androgênica. Com seu evidente papel carreador e a caracterização da dependência de sua expressão gênica e presença proteica frente aos cenários testados nessa tese, desperta-se o interesse para estudos futuros que busquem a compreensão da integração de estímulos autócrinos, parácrinos e endócrinos na espermatogênese, projetando-se uma perspectiva de uso futuro da albumina para a dispensabilidade de fármacos de ação específica no contexto da aquisição de capacidade fértil. Ademais, ao se relacionar a processos espécie-específicos, cria-se um vínculo direto entre a evolução da albumina de vertebrados e a perpetuação gênica desse grupoAbstract: Albumin and its gene family perform important maintenance functions in the body, not being common targets of natural selection. The probable involvement of this molecule in mammals reproduction, however, seems to run counter to this premise. Testing its constitutive condition, this study prioritized the analysis of integrative approaches of the testis-epididymis-vas deferens system and proposed to carry out in adult C57Bl6 mice, through surgical experiments (orchidectomy, efferent tubule ligation, cryptorchidism and orchidopexy) and pharmacological interventions (flutamide and finasteride), the induction of microenvironments, which allowed the emergence of signaling scenarios and the expression of key factors in the context of fertility. These interpretations were measured through transcriptional (RT-PCR and quantitative PCR), translational (immunohistochemistry, morphometry and immunoblotting) and functional (in vitro fertilization, IVF) investigations. The scenario induced by the orchidectomy showed that the events of albumin synthesis and secretion in the epididymis and vas deferens are regulated by the availability of bioactive testosterone, although this single stimulus is not sufficient to maintain the total pattern of gene and protein expression in unilateral orchidectomy (endogenous androgenic stimulus) or bilateral orchidectomy with replacement of injectable testosterone cypionate (exogenous androgenic stimulus), signaling a probable dependence of testicular luminal factors and/or testosterone by paracrine action. Other metabolites, in addition to testosterone, influenced the synthesis and secretion of albumin, such as dihydrotestosterone (scenario of hormonal modulation by finasteride), especially in the epididymis and vas deferens. Flutamide exerted an antagonistic role in the albumin expression/presence scenario. The albumin dependence on the ipsilateral presence of luminal fluid coming from the testis was evidenced in the context of efferent tubule ligation, mainly by the alteration of expression/presence of albumin in the initial segment of the epididymis. It is added to this scenario of dependence, the presence of spermatozoa (absent in cryptorchidism) and/or thermal stress (hyperthermia), in which, despite the maintenance of androgenic stimuli, testis and luminal factors, albumin expression/presence was altered in all analyzed organs, being only partially restored after the return of spermatogenesis to normality (orchidopexy). In addition to the orchestration of spermatogenesis events, IVF experiments demonstrated the ability of albumin to transcend its usual constitutive attribution, relating to the spermatozoa-zona pellucida interaction (possibly via acrosome reaction) and operating as a potentiating agent even in contexts of androgenic variation. With its evident carrier role and the characterization of the dependence of its gene expression and protein presence against the scenarios tested in this thesis, draws out the interest for future studies that seek the understanding of the integration of autocrine, paracrine and endocrine stimuli in spermatogenesis, to the prospect of future albumin use for the dispensability of specific drugs¿ action in the context of the acquisition of fertile capacity. In addition, when relating to species-specific processes, a direct link is created between the evolution of vertebrate albumin and the genetic perpetuation of this groupDoutoradoBiologia CelularDoutora em Biologia Celular e EstruturalCNPQ140808/2014-0[s.n.]Pereira, Luis Antonio Violin Dias, 1968-Alvares, Lucia Elvira, 1968-Avellar, Maria Christina Werneck dePerobelli, Juliana ElaineDolder, Mary Anne HeidiGomes-Marcondes, Maria Cristina CintraUniversidade Estadual de Campinas. Instituto de BiologiaPrograma de Pós-Graduação em Biologia Celular e EstruturalUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASBarbieri, Mainara Ferreira, 1987-20182018-08-31T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdf1 recurso online (207 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1637711BARBIERI, Mainara Ferreira. Estudo funcional da regulação transcricional e traducional da albumina no trato reprodutor masculino e na fertilidade. 2018. 1 recurso online (207 p.) Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1637711. Acesso em: 15 mai. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/1095863Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDFporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2019-12-09T16:56:36Zoai::1095863Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2019-12-09T16:56:36Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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