Avaliação de polimorfismos genéticos em HIF1A e expressão da proteína HIF-1α durante a compressão ortodôntica

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2020
Autor(a) principal: Teodoro, Vinicius Broska lattes
Orientador(a): Scariot, Rafaela lattes
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Positivo
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Odontologia Clínica
Departamento: Pós-Graduação
País: Brasil
Palavras-chave em Português:
Odontologia
Hipóxia
Técnicas de movimentação dentária
Polimorfismo genético
Área do conhecimento CNPq:
CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::ODONTOLOGIA
Link de acesso: https://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/handle/123456789/2120
Resumo: Muitos genes de sinalização estão envolvidos no movimento dentário ortodôntico (MDO), estabilizado mecanicamente e hipoxicamente. O HIF-1α tem demonstrado desempenhar um papel decisivo na sinalização do ligamento periodontal (LPD) durante MDO. Este estudo in vitro teve como objetivo investigar se polimorfismos genéticos em HIF1A (subunidades α do fator induzível por hipóxia) influenciam o padrão de expressão da proteína HIF-1α durante a pressão compressiva ortodôntica simulada. Foram utilizadas amostras de fibroblastos do ligamento periodontal humano (hPDL) de 57 pacientes e seu DNA foi genotipado por PCR em tempo real para os polimorfismos genéticos rs2301113 e rs2057482 em HIF1A. Para experimentos de cultura de células e expressão de proteínas, seis linhas celulares de fibroblastos hPDL foram selecionadas com base no genótipo dos pacientes. Para simular a pressão de compressão ortodôntica nos fibroblastos hPDL, uma força de 2g/cm2 foi aplicada em condições de cultura celular por 48h. A expressão de proteínas foi avaliada por Western Blot. Os testes t pareados foram utilizados para comparar a expressão de HIF-1α com e sem aplicação de pressão compressiva e os testes T para comparar a expressão entre os genótipos em rs2057482 e rs2301113 (p <0,05). A expressão da proteína HIF-1α foi aumentada pela aplicação de pressão compressiva, independentemente do genótipo (p <0,0001). Os genótipos nos polimorfismos genéticos rs2301113 e rs2057482 não foram associados à expressão da proteína HIF-1α. Em conclusão, os polimorfismos genéticos em HIF1A não influenciaram no padrão de expressão da proteína HIF-1α pelos fibroblastos hPDL durante a pressão compressiva ortodôntica simulada
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Para simular a pressão de compressão ortodôntica nos fibroblastos hPDL, uma força de 2g/cm2 foi aplicada em condições de cultura celular por 48h. A expressão de proteínas foi avaliada por Western Blot. Os testes t pareados foram utilizados para comparar a expressão de HIF-1α com e sem aplicação de pressão compressiva e os testes T para comparar a expressão entre os genótipos em rs2057482 e rs2301113 (p <0,05). A expressão da proteína HIF-1α foi aumentada pela aplicação de pressão compressiva, independentemente do genótipo (p <0,0001). Os genótipos nos polimorfismos genéticos rs2301113 e rs2057482 não foram associados à expressão da proteína HIF-1α. Em conclusão, os polimorfismos genéticos em HIF1A não influenciaram no padrão de expressão da proteína HIF-1α pelos fibroblastos hPDL durante a pressão compressiva ortodôntica simuladaMany genes and signaling molecules are involved in orthodontic tooth movement (OTM) with mechanically and hypoxically stabilized HIF-1α having been shown to play a decisive role in PDL signaling during OTM. Therefore, this in vitro study aimed to investigate, if genetic polymorphisms in HIF1A (Hypoxia-inducible factor α-subunits) influence the expression pattern of HIF-1α protein during simulated orthodontic compressive pressure. Samples from human periodontal ligament (hPDL) fibroblasts were used and their DNA was genotyped using real time PCR for the genetic polymorphisms rs2301113 and rs2057482 in HIF1A. For cell culture and protein expression experiments, six hPDL fibroblast cell lines were selected based on the patients’ genotype. To simulate orthodontic compressive pressure in hPDL fibroblasts, a force of 2 g/cm2 was applied under cell culture conditions for 48h. Protein expression was evaluated by Western Blot. Paired t-tests were used to compare HIF-1α expression with and without compressive pressure application and T tests to compare expression among the genotypes in rs2057482 and rs2301113 (p<0.05). The expression of HIF-1α protein was significantly enhanced by compressive pressure application regardless of the genotype (p<0.0001). The genotypes in the genetic polymorphisms rs2301113 and rs2057482 were not associated with HIF-1α protein expression. In conclusion, the genetic polymorphisms in HIF1A did not impact on the expression pattern of HIF-1α protein by hPDL fibroblasts during simulated orthodontic compressive pressure.porUniversidade PositivoPrograma de Pós-Graduação em Odontologia ClínicaUPBrasilPós-GraduaçãoCNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::ODONTOLOGIAOdontologiaHipóxiaTécnicas de movimentação dentáriaPolimorfismo genéticoAvaliação de polimorfismos genéticos em HIF1A e expressão da proteína HIF-1α durante a compressão ortodônticainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisScariot, Rafaelahttp://lattes.cnpq.br/8726711027143249Kirschneck, Christianhttp://lattes.cnpq.br/7243586659095670Teodoro, Vinicius Broskainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da Universidade Cruzeiro do Sulinstname:Universidade Cruzeiro do Sul (UNICSUL)instacron:UNICSULORIGINALVinicius Broska.pdfVinicius Broska.pdfDissertaçãoapplication/pdf582936http://dev.siteworks.com.br:8080/jspui/bitstream/123456789/2120/1/Vinicius%20Broska.pdf9ab5b7f0088109963ff691bd45a5c620MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81748http://dev.siteworks.com.br:8080/jspui/bitstream/123456789/2120/2/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD52123456789/21202021-06-17 15:44:10.398oai:repositorio.cruzeirodosul.edu.br: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Repositório InstitucionalPRIhttps://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/oai/requestmary.pela@unicid.edu.bropendoar:2021-06-17T18:44:10Repositório Institucional da Universidade Cruzeiro do Sul - Universidade Cruzeiro do Sul (UNICSUL)false
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