Infecção por Giardia duodenalis e diversidade da microbiota intestinal em crianças de 0 a 6 anos de idade

• Ano de defesa: 2019
• Autor(a) principal: Arbex, Ana Paula Oliveira [UNESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: parasitas intestinais; crianças; Giardia duodenalis; diversidade genética; Sequenciamento de Nova Geração (GS); microbiota; intestinal parasite; children; genetic diversity; Next Generation Sequencing (NGS)
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/184156

Giardia duodenalis é um dos principais agentes etiológicos de diarreia infecciosa, sobretudo em crianças em idade pré-escolar que vivem em comunidades de baixa renda. Estudos da diversidade genética de G. duodenalis ampliaram o conhecimento da epidemiologia nas infecções humanas, entretanto um dos temas mais interessantes e menos conhecidos é a possível interação de Giardia com o microbioma do hospedeiro e com patógenos concomitantes. No presente estudo, avaliou-se a composição e a diversidade da comunidade bacteriana de crianças saudáveis e crianças com diarreia, parasitadas por Giardia e outros protozoários intestinais. Os isolados de Giardia obtidos nessa população foram caracterizados geneticamente. Amostras de fezes foram obtidas de 181 crianças de 0 a 6 anos de idade, das quais 156 crianças hígidas atendidas em centros de educação infantil e 25 crianças com diarreia atendidas no PS Infantil Municipal. Cada amostra de fezes foi processada para o exame microscópico e submetida à extração de DNA a ser empregado em duas etapas distintas: (1) amplificação e sequenciamento Sanger para a caracterização genética de Giardia e o diagnóstico de Blastocystis sp, Dientamoeba fragilis, Enterocytozoon bieneusi e Cryptosporidium spp. e (2) amplificação do gene 16s RNA ribossomal e sequenciamento de nova geração (plataforma Illumina MiSeq) para a caracterização da microbiota intestinal. Giardia (36,5%) e Blastocystis (41,7%) foram os parasitas mais prevalentes. A caracterização genética de 61 isolados de Giardia revelou infecções por assemblages A (64%), B (33%) e infecções mistas A+B (3%). As análises metagenômicas revelaram similaridade da diversidade e riqueza do microbioma bacteriano entre os grupos de crianças assintomáticas e parasitadas por Giardia e/ou outros protozoários e o grupo de crianças não parasitadas em comparação com o grupo de crianças com Giardia e diarreia. Redução e aumento marcantes da abundância relativa, respectivamente, nos filos Bacteroidetes e Proteobacteria foram observados no grupo de crianças com diarreia. Aumento do filo Verrucomicrobia com predomínio do gênero Akkermansia foi observado nas infecções sintomáticas e assintomáticas por este protozoário, particularmente no grupo com diarreia. Além disso, Bifidobacterium foi mais abundante nas crianças com giardíase sintomática do que nos casos assintomáticos. A despeito dessas variações, geralmente a colonização por Giardia mostrou-se associadas associada a uma microbiota saudável. A existência de associações entre parasitas intestinais e diversidade de microbiota é um fato, porém requer mais estudos.