Construção de epiderme equivalente em matrizes poliméricas para avaliação de ensaios bioquímicos

• Ano de defesa: 2021
• Autor(a) principal: Denisse Esther Mallaupoma Camarena
• Orientador(a): Luiz Henrique Catalani
• Banca de defesa: Lorena Rigo Gaspar Cordeiro, Marize Campos Valadares
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade de São Paulo
• Programa de Pós-Graduação: Química
• País: BR
• Link de acesso: https://doi.org/10.11606/T.46.2021.tde-09082023-182411

Este trabalho teve como objetivo a construção de epiderme humana in vitro sobre arcabouços de matriz de polímeros sintéticos sem colágeno. Esses arcabouços foram obtidos de malhas, as quais foram fabricadas utilizando-se a técnica de eletrofiação. Os polímeros usados foram o poli (tereftalato de etileno), o poli (tereftalato de butileno) e o náilon 6,6. As malhas eletrofiadas foram caracterizadas em função de suas morfologias, distribuição de diâmetro de fibras, propriedades térmicas, porosidade e ângulo de contato. A avaliação in vitro da viabilidade das células (fibroblastos ou queratinócitos) cultivadas sobre malhas revelaram aumento da viabilidade de 1 para 7 dias. Para as construções epidérmicas in vitro foram seguidos dois protocolos: modelos de pele de completa (derme e epiderme) e epiderme humana reconstruída (RHE). Após as construções in vitro, suas morfologias foram caracterizadas por análise histológica (coloração com hematoxilina e eosina). Os resultados revelaram que a construção RHE sobre malhas eletrofiadas de náilon 6,6 (N-RHE) apresenta morfologia semelhante à da epiderme humana. No modelo N-RHE, a presença de proteínas expressas na estratificação (citoqueratina 10 e 14, involucrina e loricrina) foi confirmada por imunohistoquímica e análise de Western blotting. Finalmente, a aplicabilidade do modelo N-RHE como plataforma para a realização de ensaios de corrosão e irritação cutânea foi avaliada segundo as diretrizes sugeridas pela OECD para modelos in vitro epidérmicos. Conclui-se que o modelo NRHE apresenta estratificação adequada e funcionalidade específica, semelhante aos modelos clássicos de epiderme reconstruída, representando uma plataforma promissora na avaliação do potencial de irritação/corrosão dérmica de produtos químicos, uma vez que foram constatados apenas danos típicos relacionados à exposição da pele com substâncias corrosivas e/ou irritantes, avaliados por ensaios de viabilidade relativa e análise histológica.