Reatividade de anticorpos IgA aos Antígenos PPE59 E MT10.3:MPT64 de Mycobacterium tuberculosis em população indígena de Dourados, Mato Grosso do Sul

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2020
Autor(a) principal: Macaiba, Ana Caroline Azevedo
Orientador(a): Saad, Maria Helena Feres
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Link de acesso: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/47383
Resumo: Testes diagnósticos práticos, rápidos, de fácil operacionalidade e com potencial para formato point of care (POC) são necessários para a melhor eficácia do controle da TB, principalmente em populações negligenciadas ou de difícil manejo diagnóstico como a indígena. A organização mundial da saúde (OMS) divulgou perfis de produtos-alvo de alta prioridade (TPPs) para auxiliar no diagnóstico de TB: TPP1- teste não baseado em escarro, capaz de detectar TB através da identificação de biomarcadores com alta especificidade (Sp) \226598% e sensibilidade (S) >65 %; TPP2- teste de triagem para identificar pacientes de risco, que apresentem sintomas de TB, ou descartar a doença ou indicar para testes confirmatórios (Sp \226570% e S \226590). Os testes sorológicos são atrativos pelo potencial em preencher estas características, mas devido a heterogeneidade da resposta imune entre os pacientes é necessário explorar novos biomarcadores para adequar sua sensibilidade e/ou especificidade aos perfis TPP. Assim, este estudo propõe avaliar biomarcadores micobacterianos como produtos alvos auxiliares no diagnóstico da TB. As proteínas recombinantes PPE59 e a quimera F1 (MT10.3:MPT64) foram purificadas, padronizadas e ensaiadas para a detecção de IgA em soro por meio da técnica do ensaio imunoenzimático (ELISA). Soros de 113 indivíduos de origem indígena, dos quais 37 (33%) tinham TB pulmonar confirmada e 76 (67%) eram indivíduos sadios, foram testados. Os resultados das sorologias foram analisados isoladamente e em combinação entre si e com os resultados da microscopia em escarro (SM). A maioria dos indivíduos (62%) são do sexo masculino e 22 (59,5%) dos pacientes TB resultaram SM+ . A sensibilidade no ELISA IgA F1 (81%) foi superior ao do PPE59 (37,8%, p = 0.0003) e da SM (59%, p=0,04), ambos ELISAs obtiveram especificidades moderadas (76,3% x 89,5%, respectivamente). A combinatória dos resultados dos ELISA IgA F1 e PPE 59 não adicionou acurácia ao teste (S = 81%, Sp = 72,3%), mas com a adição dos resultados da SM houve um pequeno aumento na sensibilidade do ELISA IgA F1 (83,8 %) e moderado para PPE59 (70,2%). O ELISA IgA F1 identificou todos, exceto um (21/22, 95,4 %) dos casos SM+ , e 60% (9/15) dos casos SM- , enquanto PPE59 45% (10/22) e 20% (4/15), respectivamente. Portanto, o ELISA IgA F1, embora não perfeitamente, tem potencial para ser validada como um WHO-TPP adicional na identificação de pacientes suspeitos de TB em população indígena.
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spelling Macaiba, Ana Caroline AzevedoSaad, Maria Helena Feres2021-05-26T13:45:30Z2021-05-26T13:45:30Z2020MACAIBA, Ana Caroline Azevedo. Reatividade de anticorpos IgA aos Antígenos PPE59 E MT10.3:MPT64 de Mycobacterium tuberculosis em população indígena de Dourados, Mato Grosso do Sul. 2020. 75 f. Dissertação (Mestrado em Medicina Tropical) - Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2020.https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/47383Testes diagnósticos práticos, rápidos, de fácil operacionalidade e com potencial para formato point of care (POC) são necessários para a melhor eficácia do controle da TB, principalmente em populações negligenciadas ou de difícil manejo diagnóstico como a indígena. A organização mundial da saúde (OMS) divulgou perfis de produtos-alvo de alta prioridade (TPPs) para auxiliar no diagnóstico de TB: TPP1- teste não baseado em escarro, capaz de detectar TB através da identificação de biomarcadores com alta especificidade (Sp) \226598% e sensibilidade (S) >65 %; TPP2- teste de triagem para identificar pacientes de risco, que apresentem sintomas de TB, ou descartar a doença ou indicar para testes confirmatórios (Sp \226570% e S \226590). Os testes sorológicos são atrativos pelo potencial em preencher estas características, mas devido a heterogeneidade da resposta imune entre os pacientes é necessário explorar novos biomarcadores para adequar sua sensibilidade e/ou especificidade aos perfis TPP. Assim, este estudo propõe avaliar biomarcadores micobacterianos como produtos alvos auxiliares no diagnóstico da TB. As proteínas recombinantes PPE59 e a quimera F1 (MT10.3:MPT64) foram purificadas, padronizadas e ensaiadas para a detecção de IgA em soro por meio da técnica do ensaio imunoenzimático (ELISA). Soros de 113 indivíduos de origem indígena, dos quais 37 (33%) tinham TB pulmonar confirmada e 76 (67%) eram indivíduos sadios, foram testados. Os resultados das sorologias foram analisados isoladamente e em combinação entre si e com os resultados da microscopia em escarro (SM). A maioria dos indivíduos (62%) são do sexo masculino e 22 (59,5%) dos pacientes TB resultaram SM+ . A sensibilidade no ELISA IgA F1 (81%) foi superior ao do PPE59 (37,8%, p = 0.0003) e da SM (59%, p=0,04), ambos ELISAs obtiveram especificidades moderadas (76,3% x 89,5%, respectivamente). A combinatória dos resultados dos ELISA IgA F1 e PPE 59 não adicionou acurácia ao teste (S = 81%, Sp = 72,3%), mas com a adição dos resultados da SM houve um pequeno aumento na sensibilidade do ELISA IgA F1 (83,8 %) e moderado para PPE59 (70,2%). O ELISA IgA F1 identificou todos, exceto um (21/22, 95,4 %) dos casos SM+ , e 60% (9/15) dos casos SM- , enquanto PPE59 45% (10/22) e 20% (4/15), respectivamente. Portanto, o ELISA IgA F1, embora não perfeitamente, tem potencial para ser validada como um WHO-TPP adicional na identificação de pacientes suspeitos de TB em população indígena.Practical, fast and easy-to-operate diagnostic tests with potential for point-of-care (POC) format are required for optimal TB control effectiveness, especially in neglected or difficult-to-diagnose populations such as the indigenous. World Health Organization (WHO) has released high priority target product profiles (TPPs) to assist in the diagnosis of TB: TPP1 - non-sputum-based test capable of detecting TB by identifying biomarkers with high specificity (Sp \226598%) and sensitivity (S >65%); TPP2 - screening test to identify at-risk patients who have symptoms of TB, or rule out the disease or indicate for confirmatory testing (Sp \226570% and S \226590). Serological tests are attractive because of the potential to fulfill these characteristics, but due to the heterogeneity of the immune response among patients, it is necessary to explore new biomarkers to adapt their sensitivity and/or specificity to TPP profiles. Thus, this study proposes to evaluate mycobacterial biomarkers as auxiliary target products in the diagnosis of TB. The recombinant proteins PPE59 and chimera F1 (MT10.3: MPT64) were purified, standardized and analyzed for ELISA IgA detection. Serums from 113 individuals of indigenous origin, of which 37 (33%) had confirmed pulmonary TB and 76 (67%) are healthy individuals, were included. Serology results were analyzed separately, in combination and with sputum microscopy (SM) results. Most individuals (62%) are male and 22/37 (59.5%) of TB patients resulted in SM+ . The sensitivity for ELISA IgA F1 (81%) was higher than PPE59 (37.8%, p = 0.0003) and SM (p = 0.04), both ELISAs obtained moderate specificities (76.3 % x 89.5%, respectively). The combined ELISA IgA F1 and PPE 59 results did not add accuracy to the test (S=81%, Sp= 72.3%, respectively), but combined with the SM result there was a slight increase in ELISA IgA F1 sensitivity (83.8%) and moderate for PPE59 (70.2%). The ELISA IgA F1 identified all SM+ cases (21/22, 95.4%) except one, and 60% (9/15) SMcases, while PPE 59 45% (10/22) e 20% (4/15), respectively. Therefore, the ELISA IgA F1, although imperfectly, has potential to be validated as an additional WHO-TPP in identification of suspected TB patients in an indigenous population.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.porPovos IndígenasMycobacterium tuberculosisTestes ImunológicosProteínas RecombinantesPovos IndígenasMycobacterium tuberculosisTestes ImunológicosProteínas RecombinantesReatividade de anticorpos IgA aos Antígenos PPE59 E MT10.3:MPT64 de Mycobacterium tuberculosis em população indígena de Dourados, Mato Grosso do Sulinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2020Instituto Oswaldo CruzFundação Oswaldo CruzRio de JaneiroPrograma de Pós-Graduação em Medicina Tropicalinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/47383/1/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD51ORIGINALana_macaiba_ioc_mest_2020.pdfapplication/pdf2126430https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/47383/2/ana_macaiba_ioc_mest_2020.pdf4231cbf70d975b6ac9043559aac4f52dMD52TEXTana_macaiba_ioc_mest_2020.pdf.txtana_macaiba_ioc_mest_2020.pdf.txtExtracted texttext/plain177826https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/47383/3/ana_macaiba_ioc_mest_2020.pdf.txt4e7759e49b30a6b70afff12b77475624MD53icict/473832023-09-04 11:49:20.876oai:www.arca.fiocruz.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352023-09-04T14:49:20Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false
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