Caracterização da funcionalidade de macrófagos de hamster dourado (Mesocricetus auratus) em resposta à infecção por Leishmania (Viannia) braziliensis e Leishmania (Leishmania) amazonensis

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Nuñez Prates, Marina Cambeiro
• Orientador(a): Cruz, Alda Maria da
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Fiocruz/IOC
• Link de acesso: https://arca.fiocruz.br/handle/icict/74616
• topic: Leishmaniasis; Leishmania braziliensis; Mesocricetus; Macrophages; Leishmania braziliensis; Leishmania amazonensis; Macrófagos; Modelo hamster; Leishmania braziliensis; Leishmania amazonensis; Macrophages; Hamster model; Infecções::Doenças Transmitidas por Vetores::Leishmaniose; Eucariotos::Euglenozoários::Kinetoplastida::Trypanosomatina::Leishmania::Leishmania braziliensis; Eucariotos::Animais::Cordados::Vertebrados::Mamíferos::Eutérios::Roedores::Muridae::Arvicolinae::Cricetinae::Mesocricetus; Células::Células Mieloides::Macrófagos; 03 Saúde e Bem-Estar

Nosso grupo tem estudado nos últimos anos as alterações clínicas e imunopatológicas durante a evolução da infecção por Leishmania braziliensis em hamster dourado (Mesocricetus auratus), no sentido de se estabelecer parâmetros laboratoriais que permitam utilizar este modelo para o estudo de patogênese e de proteção vacinal na leishmaniose tegumentar americana (LTA). Estudos anteriores relatam que os eventos da fase inicial da infecção podem ser um fator determinante para o seu desfecho. Assim, neste trabalho, buscamos investigar os momentos iniciais da infecção por L. amazonensis ou L. braziliensis no modelo hamster, tanto pela avaliação in vivo dos parâmetros clínicos/parasitológicos e imunológicos como pela avaliação in vitro da funcionalidade de macrófagos peritoneais (MP) e de macrófagos residentes da medula óssea (MRMO) retirados de hamsters infectados por essas duas espécies de Leishmania. Para isso, hamsters foram infectados na pata com 1x105 de promastigotas de L. amazonensis ou L. braziliensis e o desenvolvimento da lesão foi acompanhado por 7 ou 50 dias após a infecção. Após a eutanásia, foi realizada a quantificação da carga parasitária na pata, a dosagem de IgG total anti-Leishmania e foram coletados MP e MRMO. Nos experimentos in vitro, macrófagos foram incubados por 24h e foram infectados com promastigotas de L.amazonensis e L. braziliensis (proporção 1:5). Após 72h de incubação, foram avaliados a porcentagem de macrófagos infectados, o número de amastigotas por macrófago e a produção de óxido nítrico (NO). Nos momentos iniciais da infecção, as lesões dos hamsters infectados por L. amazonensis eram nodulares, não ulceradas e nos dias, 36, 40 e 43 foram significativamente menores do que as lesões daqueles infectados por L. braziliensis, que eram ulceradas e com visível dano tecidual. Por outro lado, nos dias 7 e 50 de infecção, a carga parasitária na pata no grupo infectado por L. amazonensis (7dpi= 4,7 x 104 parasitos/grama de tecido e 50dpi= 2,4 x 108)foi maior que no grupo infectado por L. braziliensis (7dpi=não detectado e 50dpi=9,2x105). No dia 50 de infecção, os níveis de IgG antiLeishmania do grupo infectado por L. amazonensis foram menores que o observado no grupo infectado por L. braziliensis. Nos estudos de funcionalidade dos macrófagos, quando foram utilizados MRMO dos hamsters não infectados, foi observada uma diminuição no número de amastigotas presentes por macrófago após a infecção in vitro por L.braziliensis em comparação com os infectados por L.amazonensis. Quando foram avaliados os macrófagos peritoneais retirados de hamsters, previamente infectados por L.amazonensis (no dia 7 após a infecção), foi observado um aumento significativo na porcentagem de macrófagos infectados in vitro por L.amazonensis quando comparamos com os MP obtidos de hamsters não infectados (naive). Nos MP de hamsters previamente infectados por L.braziliensis também foi observado um aumento na percentagem de MP infectados por L.braziliensis. Não foi detectada a produção de NO em nenhum dos experimentos. Esses resultados in vitro com macrófagos, fazem parte de uma iniciativa para estudar a relação macrófago-L. braziliensis no modelo hamster a fim de elucidar mecanismos básicos desta interação, mas que até então não foram explorados na literatura. Este trabalho reforça a contribuição do modelo hamster para estudos de imunoproteção e imunopatogênese da LTA.