Caracterização de proteínas e antígenos nas diferentes fases do ciclo biológico do fungo Histoplasma capsulatum

• Ano de defesa: 2019
• Autor(a) principal: Almeida, Marcos de Abreu
• Orientador(a): Oliveira, Rosely Maria Zancope, Paes, Rodrigo de Almeida
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Link de acesso: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/48567
• topic: Histoplasma; Proteoma; Antígenos; Histoplasma; Proteoma; Antígenos

Histoplasma capsulatum var. capsulatum é o agente etiológico da histoplasmose clássica, uma importante micose sistêmica, com distribuição cosmopolita e predomínio nas Américas. Histoplasma capsulatum é um fungo dimórfico, podendo se apresentar nas fases de micélio ou levedura. O dimorfismo é uma característica importante para sobrevivência fúngica em diferentes ambientes e tem sido relacionado com a virulência de H. capsulatum. Consequentemente, sua patogenicidade é frequentemente associada à transição dimórfica. Perfis proteômicos têm trazido importantes contribuições ao conhecimento do metabolismo e patogenicidade em vários modelos biológicos. No entanto, estudos do proteoma de H. capsulatum e a caracterização de prováveis proteínas antigênicas participantes tanto da resposta celular como humoral do hospedeiro têm sido ainda pouco explorados. No presente estudo, foi utilizada a cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas para avaliar o perfil proteômico das fases de levedura e micélio de H. capsulatum (G217B - ATCC 26032). Foram identificadas 696 proteínas em levedura e 623 em micélio, respectivamente. Comparadas as duas fases do fungo, 440 proteínas foram mais abundantes em levedura e 388 em micélio. Em levedura, enzimas relacionadas ao ciclo do ácido tricarboxílico e resposta ao estresse por temperatura tiveram maior abundância. Entre as proteínas que foram mais abundantes em micélio estão algumas relacionadas à via glicolítica e à fermentação alcoólica. Para identificação de potenciais alvos antigênicos na forma parasitária de H. capsulatum foram utilizados os métodos de coimunoprecipitação e posterior cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas para identificação dessas proteínas. Desta forma, foram identificadas três proteínas (antígeno M, catalase P e YPS-3) que reagiram apenas contra soros de pacientes com histoplasmose, sendo potenciais alvos antigênicos. Estes dados indicam a possibilidade da utilização destas proteínas em novos métodos para o diagnóstico da histoplasmose. Ainda, as análises de categoria funcional das proteínas identificadas no proteoma, forneceram uma melhor compreensão da reorganização metabólica que ocorre na transição morfológica de levedura para micélio.