Análise do desempenho da técnica de PCR em tempo real para o diagnóstico da tuberculose pulmonar

• Ano de defesa: 2012
• Autor(a) principal: Lira, Laís Ariane de Siqueira
• Orientador(a): Schindler, Haiana Charifker
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Link de acesso: https://arca.fiocruz.br/handle/icict/63816
• topic: Tuberculose; Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real; Mycobacterium tuberculosis; Tuberculosis; Real-Time Polymerase Chain Reaction; Mycobacterium tuberculosis; Tuberculosis; Reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real; Mycobacterium tuberculosis; Tuberculose; Réaction en chaîne de la polymérase en temps réel; Mycobacterium tuberculosis; Humanos; Masculino; Feminino; Criança; Adolescente; TuberculoseDiag; Reação em Cadeia da Polimerase; Mycobacterium TuberculosisGenet

A tuberculose constitui um grave problema de saúde pública, com preocupação e repercussão mundial. No Brasil, foram notificados 78.564 mil casos no ano de 2011, com 83.55% dos casos da forma pulmonar, sendo Recife a capital brasileira com maior taxa de mortalidade específica por tuberculose. O controle da doença consiste em um diagnóstico precoce e eficaz associado a um tratamento adequado, contudo os métodos convencionais apresentam limitações, como a baixa sensibilidade e o resultado tardio. Por isto, métodos moleculares vêm sendo propostos para o diagnóstico de diversas doenças infecciosas. Recentemente, a técnica da reação em cadeia de polimerase em tempo real (qPCR) tem sido desenvolvida, apresentando como diferencial a capacidade de amplificação e detecção do DNA ocorrerem simultaneamente, através de um sistema de fluorescência. O estudo avaliou o desempenho da técnica de qPCR na detecção específica do complexo Mycobacterium tuberculosis nos pacientes com tuberculose pulmonar. Para avaliar o limite de detecção, foi construída uma curva de diluição a partir de cepa de referência do M. tuberculosis, em que se determinou que o sistema foi capaz de detectar até 3x100 bacilos/ml. Este limite foi correspondente ao ciclo de amplificação 30, o qual foi utilizado como limite máximo de positividade das amostras analisadas. Foram avaliadas 165 amostras de escarro de pacientes suspeitos de tuberculose pulmonar, apresentando sensibilidade de 87.9% e especificidade de 98%, considerando a cultura e/ou resposta ao tratamento específico como padrão-ouro. A técnica de qPCR demonstrou um excelente desempenho, podendo ser utilizada como uma ferramenta auxiliar para o diagnóstico da tuberculose pulmonar. O diagnóstico da TB deve estar fundamentado na análise conjunta de vários parâmetros como baciloscopia, cultura, manifestações clínicas e a prova terapêutica .