Efeito da fotobiomodulação vascular sobre o perfil de macrófagos nas diferentes fases do processo de regeneração em modelo de lesão muscular aguda

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2024
Autor(a) principal: Silva, Raquel Lira Ortiz da lattes
Orientador(a): Ferrari, Raquel Agnelli Mesquita lattes
Banca de defesa: Ferrari, Raquel Agnelli Mesquita lattes, Rodrigues, Maria Fernanda Setúbal Destro lattes, Iemma, Mônica Rosas da Costa lattes
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Nove de Julho
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Medicina – Biofotônica
Departamento: Saúde
País: Brasil
Palavras-chave em Português:
Palavras-chave em Inglês:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: http://bibliotecatede.uninove.br/handle/tede/3786
Resumo: Muscle injuries cause significant functional restriction and are more common in sedentary individuals or high-performance athletes. During the muscle injury process, satellite cells are activated, and inflammatory cells are recruited through the signaling of inflammatory mediators. This process leads to the presence of neutrophils and macrophages, which exhibit either pro-inflammatory or anti- inflammatory profiles, in the injured muscle microenvironment. However, disruption of this process may result in the formation of muscle fibrosis, leading to functional limitation and potential morphological alterations. Photobiomodulation therapy, applied locally (PBML) or vascularly (PBMV), has been shown in the literature to modulate inflammatory processes, increase vascularization, reduce myonecrosis, and enhance fiber diameter and cross- sectional area, in both preventive (pre) and/or therapeutic (post) applications. This study aimed to evaluate the effects of PBMV using low-level laser therapy (LLLT) on macrophage recruitment in M1 and M2 phenotypes (CD68+; CD206+) in an experimental model of acute muscle injury. A total of 85 male Wistar rats (12 weeks old) were divided into the following experimental groups: G1 - control (n=5); G2 - cryoinjury without treatment (n=20); G3 - no cryoinjury + PBMV (n=20); G4 - PBMV prior + injury (n=20); G5 - injury + PBMV (n=20). PBMV was applied to the tail vein/artery (780 nm, 40 mW, 80 s, and 3.2 J). Euthanasia was performed at four time points: 1, 2, 5, and 7 days after cryoinjury. The tibialis anterior muscle was collected for macrophage phenotype analysis (M1 - CD68+; M2 - CD206+) via immunohistochemistry, and data were subjected to statistical analysis. CD68+ cell immunostaining revealed a significant inflammatory infiltrate on day 1, with the highest cell count in the PBMV prior + injury group, peaking on day 2 and progressively decreasing by day 7 in irradiated groups. CD206+ cells were most abundant in the PBMV prior + injury group on day 1, peaked on day 2, and significantly reduced by day 7, especially in the PBMV post-injury group. Cellular recruitment peaked on day 2, followed by a decline or stabilization depending on the PBMV strategy. We conclude that PBMV effectively modulates macrophage recruitment, with preventive PBMV accelerating the arrival of these cells in the injured environment.
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During the muscle injury process, satellite cells are activated, and inflammatory cells are recruited through the signaling of inflammatory mediators. This process leads to the presence of neutrophils and macrophages, which exhibit either pro-inflammatory or anti- inflammatory profiles, in the injured muscle microenvironment. However, disruption of this process may result in the formation of muscle fibrosis, leading to functional limitation and potential morphological alterations. Photobiomodulation therapy, applied locally (PBML) or vascularly (PBMV), has been shown in the literature to modulate inflammatory processes, increase vascularization, reduce myonecrosis, and enhance fiber diameter and cross- sectional area, in both preventive (pre) and/or therapeutic (post) applications. This study aimed to evaluate the effects of PBMV using low-level laser therapy (LLLT) on macrophage recruitment in M1 and M2 phenotypes (CD68+; CD206+) in an experimental model of acute muscle injury. A total of 85 male Wistar rats (12 weeks old) were divided into the following experimental groups: G1 - control (n=5); G2 - cryoinjury without treatment (n=20); G3 - no cryoinjury + PBMV (n=20); G4 - PBMV prior + injury (n=20); G5 - injury + PBMV (n=20). PBMV was applied to the tail vein/artery (780 nm, 40 mW, 80 s, and 3.2 J). Euthanasia was performed at four time points: 1, 2, 5, and 7 days after cryoinjury. The tibialis anterior muscle was collected for macrophage phenotype analysis (M1 - CD68+; M2 - CD206+) via immunohistochemistry, and data were subjected to statistical analysis. CD68+ cell immunostaining revealed a significant inflammatory infiltrate on day 1, with the highest cell count in the PBMV prior + injury group, peaking on day 2 and progressively decreasing by day 7 in irradiated groups. CD206+ cells were most abundant in the PBMV prior + injury group on day 1, peaked on day 2, and significantly reduced by day 7, especially in the PBMV post-injury group. Cellular recruitment peaked on day 2, followed by a decline or stabilization depending on the PBMV strategy. We conclude that PBMV effectively modulates macrophage recruitment, with preventive PBMV accelerating the arrival of these cells in the injured environment.As lesões musculares causam uma importante restrição funcional, sendo mais comuns em indivíduos sedentários ou atletas de alto desempenho. Durante o processo de lesão muscular ocorre a ativação de células satélites e o recrutamento de células inflamatórias, por meio da sinalização de mediadores inflamatórios. Esse processo resulta na presença de neutrófilos e macrófagos, que exibem perfil pró ou anti-inflamatório, no microambiente muscular lesionado. No entanto, a perturbação desse processo pode ocasionar na formação de fibrose muscular, acarretando a limitação funcional e possíveis alterações morfológicas. A fotobiomodulação aplicada de forma local (FBML) ou vascular (FBMV), tem demonstrado na literatura ser capaz de modular o processo inflamatório, aumentar a vascularização, reduzir mionecrose e aumentar o diâmetro e área de secção transversa das fibras musculares, em aplicação preventivas (pré) e/ou terapêuticas (pós). Assim, este estudo tem como objetivo avaliar o efeito da FBMV, utilizando o laser em baixa intensidade (LBI), no recrutamento tecidual de macrófagos nos fenótipos M1 e M2 (CD68+; CD206+) em modelo experimental de lesão muscular aguda. Foram utilizados 85 ratos Wistar machos com 12 semanas de vida e avaliados nos seguintes grupos experimentais: G1- controle (n=5); G2 – criolesão sem tratamento (n=20); G3 sem criolesão + FBMV (n=20); G4- FBMV prévia + lesão (n=20); G5- lesão + FBMV (n=20). A aplicação da FBMV foi feita de forma pontual, sobre veia/artéria da base da cauda do animal (780 nm, 40mW, 80s e 3,2J). A eutanásia dos animais ocorreu em quatro períodos distintos: 1, 2, 5 e 7 dias após a realização da criolesão. O músculo Tibial Anterior foi coletado para análises de fenótipos de macrófagos M1 (CD68+) e M2 (CD 206+) através da imuno-histoquímica. Os dados foram submetidos a análise estatística. Observamos que a imunomarcação de células CD68+ revelou infiltrado inflamatório significativo no dia 1, com maior número de células no grupo FBMV prévia + lesão, pico no 2º dia e redução progressiva até o 7º dia nos grupos irradiados. As células CD206+ apresentaram maior número no grupo FBMV prévia + lesão no dia 1, pico no 2º dia e redução significativa no 7º dia, especialmente no grupo FBMV pós-lesão. O recrutamento celular foi mais evidente no 2º dia, seguido por queda ou estabilização nos grupos experimentais, dependendo da estratégia de FBMV utilizada. Concluímos que a FBMV foi capaz de modular o processo de recrutamento de macrófagos, porém a FBMV preventiva é capaz de adiantar a chegada dessas células no meio lesionado.Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2025-09-01T16:04:24Z No. of bitstreams: 1 Raquel Lira Ortiz da Silva.pdf: 1871287 bytes, checksum: afc07463e66f3947ed38f140fe1ed2d0 (MD5)Made available in DSpace on 2025-09-01T16:04:24Z (GMT). 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